Микробиологическая диагностика. Применяется микроскопический метод диагностики трипаносомозов: мазки из крови, пунктата шейных лимфатических узлов
Применяется микроскопический метод диагностики трипаносомозов: мазки из крови, пунктата шейных лимфатических узлов, цереброспинальной жидкости красят по Романовскому—Гимзе или по Райту.
Для выделения возбудителя можно заражать белых мышей или крыс, а также делать посев на питательные среды с кровью.
При серологическом методе определяют антитела (IgM) с помощью ИФА, РСК, непрямой РИФи др.
Лечение.Для лечения африканского трипаносомоза назначают сурамин или пентами-
дин, а при поражении ЦНС — меларсопрол. Лечение американского трипаносомоза неэффективно.
Профилактика.Проводят неспецифическую профилактику трипаносомоза путем ликвидации мест выплода переносчиков возбудителя и уничтожения инфицированных животных. В личной профилактике применяют репелленты и защитную одежду. Также выявляют и лечат инфицированных лиц.
19.2.3. Лямблии, или гиардии (род Lamblia, или Giardia)
Лямблиоз (гиардиоз) — болезнь (инвазия), протекающая в латентной или манифестной форме в виде дисфункции кишечника с явлениями энтерита.
Возбудитель открыт Д. Ф. Лямблем в 1859 г. В 1915 г. возбудитель отнесен к роду Giardia в честь Жиара.
Таксономия.Лямблии (вид Lamblia intesti-nalis, или Giardia lamblia) относятся к типу Sarcomastigophorae, подтипу Mastigophora, классу Zoomastigophorea, отряду Diplomonadida.
Характеристика возбудителя.Вегетативная клетка лямблий плоская, имеет грушевидную форму (9/20х5/10 мкм), два ядра (рис. 19.4). Четыре пары жгутиков обеспечивают вращательное движение клетки. Лямблии размножаются путем продольного деления. Вегетативные
клетки лямблий прикрепляются к эпителиоци-там кишечника с помощью присасывательного диска. Попадая из мест обитания — из верхних отделов кишечника в менее благоприятные — нижние отделы кишечника, образуют овальные четырехъядерные цисты (10/14x6/10 мкм), окруженные толстой двухконтурной оболочкой.
Резистентность. Цисты лямблий, попавшие с испражнениями в окружающую среду, устойчивы к низким температурам, сохраняются в почве и холодной воде более 2 месяцев. Цисты не погибают при хлорировании воды, но мгновенно погибают при кипячении.
Эпидемиология. Источником инфицирования цистами являются люди — больные и носители, реже — собаки, бобры, олени. Механизм заражения — фекально-оральный, через загрязненные воду, пищу, руки и предметы обихода. Возможны водные вспышки диарей. Имеется связь (до 40 % случаев) между мужским гомосексуализмом и инфициро-ванностью лямблиями и (или) амебами.
Патогенез и клиника.Развитие лямблиоза зависит от степени резистентности организма. Лямблии обитают в двенадцатиперстной и тощей кишках. Размножаясь в большом количестве, они блокируют слизистую оболочку, нарушая пристеночное пищеварение и моторику кишечника. Возможно также иммунопатологическое воздействие Т-клеток на слизистую оболочку тощей кишки. Лямблии могут вызывать диарею, энтероколиты, нарушения обмена веществ, потерю аппетита, массы тела и др. Развиваются гастроэнтеро-колитический, холецистопанкреатический и астенический синдромы.
Иммунитет.Носит клеточный и гуморальный характер.
Микробиологическая диагностика.При микроскопическом методе в мазках из испражнений выявляют цисты; в случае диареи — вегетативные формы (трофозоиты), которые также обнаруживают и при дуоденальном зондировании. Серологический метод подтверждает наличие специфического процесса по нарастанию титра антител в РИФ.
Лечение.Применяют метронидазол, тини-дазол, фуразолидон.
Профилактика.Сходна с профилактическими мерами при амебиазе.
19.2.4.Трихомонады (род Trichomonas)
Трихомоноз— антропонозная болезнь (инвазия), вызываемая мочеполовой трихо-монадой (Trichomonas vaginalis); сопровождается поражениями мочеполовой системы.
Таксономия.Возбудитель относится к типу Sarcomastigophora, подтипу Mastigophora, классу Zoomastigophoreae, отряду Trichomonadida. Различают также комменсалы — ротовую (Т. tenax) и кишечную (Т. hominis) трихомонады.
Характеристика возбудителя.Trichomonas vaginalis цист не образует. Существует только как трофозо-ит, размножается делением. Имеет грушевидную форму; размеры 8/40хЗ/14 мкм. Пять жгутиков расположены на переднем конце клетки. Один из них соединен с клеткой ундулирующей мембраной, доходящей до середины клетки. Через клетку проходит осевая нить (аксостилъ), выходящая из заднего конца клетки в виде шипа (рис. 19.5).
Резистентность. Вокружающей среде быстро погибает; на банных губках и мочалках сохраняется 10—15 мин, а в слизи, сперме и моче — 24 ч.
Эпидемиология.Заболевание передается половым путем, через родовые пути (младенцу), редко — через предметы личной гигиены.
Патогенез и клиника. Trichomonas vaginalis вызывает вагинит, уретрит, простатит. Воспалительный процесс сопровождается болью, зудом, гнойно-серозными выделениями. Часто болезнь протекает бессимптомно.
Иммунитет.Не изучен.
Микробиологическая диагностика.При микроскопическом методе выявляют трихомонады в нативных и окрашенных мазках из отделяемого мочеиспускательного канала, секрета предстательной железы или осадка мочи, окрашенных метиленовым синим или по Романовскому— Гимзе. При фазово-контрастной микроскопии нативных препаратов наблюдается подвижность трихомонад. Нативный препарат готовят на предметном стекле, смешивая отделяемое с каплей теплого изотонического раствора хлорида натрия. При приготовлении препарата «висячая капля» наносят каплю исследуемого материала на покровное стекло со смазанными вазелином краями, после чего его переворачивают каплей вниз и помещают на предметное
стекло с лункой. Препараты исследуют с объективом х40 и окуляром х10. Трихомонады по размеру близки к лейкоцитам и имеют характерные толчкообразные движения ундулирую-щей мембраны и жгутиков.
При хронических формах трихомонады выращивают на питательных средах, например СКДС (солевой раствор с гидролизатами казеина, дрожжей и с мальтозой).
Лечение.Применяют метронидазол, тини-дазол, осарсол, аминарсон, фуразолидон.
Профилактика.Аналогична проводимой при венерических заболеваниях.
Споровики
Споровики (класс Sporozoa, тип Apicomplexa) включают плазмодии малярии, токсоплазмы, саркоцисты, изоспоры, циклоспоры, крип-тоспоридии, бабезии.
19.3.1. Плазмодии малярии (род Plasmodium)
Малярия — антропонозная протозойная болезнь, вызываемая простейшими рода Plasmodium; сопровождается приступами лихорадки, анемией, увеличением печени и селезенки.
Таксономия.Возбудители малярии человека относятся к типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Eucoccidiida (собственно кокцидии), подотряду Haemosporina и видам: Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, Plasmodium malariae, Plasmodium falciparum. Впервые возбудитель малярии — P. malariae был обнаружен французским врачом А. Лавераном в 1880 г.
Характеристика возбудителя.Жизненный цикл плазмодиев происходит со сменой хозяев: в комаре рода Anopheles (окончательном хозяине) осуществляется половое размножение, или спорогония (образование вытянутых клеток — спорозоитов), а в организме человека (промежуточном хозяине) происходит бесполое размножение — шизогония, точнее мерогония, при которой образуются мелкие клетки — мерозоиты.
После укуса спорозоиты из слюнных желез комара попадают в кровь и далее (в течение часа) — в клетки печени (гепатоциты), в которой совершается первый этап размножения — тканевая (экзоэритроцитарная) шизогония. При этом в гепатоцитах спорозоит превращается в тканевой трофозоит (растущая клетка), который переходит в стадию тканевого шизонта (делящаяся клетка). Тканевой шизонт делится
(меруляция) с образованием тканевых меро-зоитов, поступающих в кровь. Из одного спо-розоита образуется 2000—40 000 мерозоитов. Мерозоиты проникают эндоцитозом в эритроциты, в которых совершается несколько циклов эритроцитарной шизогонии. Из мерозоита в эритроците развиваются трофозоиты — растущие формы паразита: кольцевидный трофозо-ит юный, полувзрослый, взрослый трофозоит. Они содержат желтовато-коричневые гранулы, образующиеся из гемоглобина эритроцитов. Взрослый трофозоит превращается в многоядерный шизонт (рис. 19.6), из которого образуются 6—24 мерозоита, внедряющиеся затем в другие эритроциты. Этот процесс повторяется многократно. Продолжительность цикла развития в эритроцитах у P. vivax, P. ovale, P. falciparum составляет 48 ч, у P. malariae — 72 ч. В эритроцитах мерозоиты дают также начало образованию половых незрелых форм — мужских и женских гамет (гамонтов, гамето-цитов), которые способны инфицировать комаров при кровососании больного малярией.
Гаметы имеют овальную форму, кроме гамет P. falciparum, имеющих полулунную форму.
С началом эритроцитарной шизогонии размножение возбудителей в печени прекращается, кроме P. vivax и P. ovale, у которых часть спорозоитов (гипнозоитов, брадизоитов) остается в гепатоцитах на недели или месяцы, что обуславливает появление поздних, отдаленных рецидивов болезни. Ранние рецидивы связаны с сохранившимися формами паразита при эритроцитарной шизогонии.
При укусе комаром незрелые половые формы возбудителя попадают вместе с кровью больного человека в желудок самки комара. В комаре гамонты приступают к гаметогонии. Они дозревают и оплодотворяются, образуя зиготу, превращающуюся в удлиненную подвижную форму — оокинету. Оокинета проникает через стенку желудка и образует ооцисту, в которой завершается спорогония с образованием до 10 000 спорозоитов. Часть спорозоитов (2 %) затем попадает через гемолимфу в слюнные железы комара.
P. vivax — возбудитель трехдневной малярии, открыт в 1890 г. В. Грасси и Р. Фелетти. В эритроците, при окраске мазка из крови по Романовскому—Гимзе, трофозоит имеет форму кольца — крупная вакуоль в центре, окаймленная голубой цитоплазмой с рубиново-красным ядром (кольцевидный трофозоит). Иногда в одном эритроците встречаются 2—3 кольца. Полувзрослый трофозоит имеет в эритроците форму амебы с псевдоподиями, подвижен (vivax — живой). Пораженные эритроциты увеличены, в них выявляется многочисленная мелкая кирпично-красная зернистость (зерна Шюффнера). В стадии деления паразита образуется 12—24 мерозоита.
P. malariae — возбудитель четырехдневной малярии открыт в 1880 г. А. Лавераном. В эритроците выявляется один трофозоит в стадии кольца. Полувзрослый трофозоит внутри эритроцита, в отличие от других видов, имеет лентовидную форму. Паразит делится на 6—12 мерозоитов, располагающихся упорядоченно вокруг пигмента, обычно в виде розетки.
P. falciparum — возбудитель тропической малярии открыт в 1897 г. У. Уэлчем. Характерным для него является наличие юных форм паразита в виде мелких колец в эритроците, часто по 2—3 в одной клетке. В пораженных эритроцитах выявляются единичные крупные розово-фиолетовые пятна (Мауэра). В периферической крови кроме кольцевидных тро-фозоитов (другие формы трофозоитов находятся в эритроцитах капилляров) появляются гамонты в виде полулуний.
P. ovale — возбудитель трехдневной малярии открыт в 1922 г. Ж. Стивенсоном. Паразит в стадии кольца в эритроците имеет более крупное ядро, чем P. vivax. В эритроците выявляется крупная зернистость (зерна Джеймса). Инфицированные эритроциты увеличены, часть пораженных эритроцитов имеет овальную форму. Паразит делится на 6—12 мерозоитов.
Эпидемиология.Восприимчивость людей — высокая. Малярией болеют сотни миллионов людей, живущих в странах тропического и субтропического климата: в тропиках основной возбудитель — P. falciparum; спорадически — P. ovale; в регионах умеренного климата малярию чаще вызывает P. vivax, реже
— P. malariae. Поэтому острой является проблема завоза малярии в нашу страну. Очаги малярии имеются в южных регионах России.
Источник возбудителя — человек (больной или паразитоноситель). Основной механизм заражения — трансмиссивный, через укус самки комара рода Anopheles (около 30 видов). Возможен парентеральный путь передачи при гемотрансфузии.
Патогенез и клиника.Инкубационный период при различных формах малярии колеблется от недели до года (при трехдневной малярии — до 14 мес.) и заканчивается с момента появления паразитов в крови. Клинические проявления обусловлены эритроцитарной шизогонией. Малярии свойственно приступообразное течение: озноб с сильной головной болью сменяется подъемом температуры до 39—40 "С и выше, после чего происходит быстрое снижение температуры с обильным потоотделением и выраженной слабостью. Малярийный приступ вызван выбросом пи-рогенных веществ из разрушенных эритроцитов, мерозоитов и продуктов их метаболизма. Приступы могут быть ежедневными или повторяться через 1—2 дня и приводить при длительном течении к поражению печени, селезенки и почек.
Наиболее тяжело протекает тропическая малярия. Плазмодии P. falciparum размножаются в эритроцитах (любого возраста) мелких сосудов внутренних органов, вызывая внутри-сосудистый гемолиз, закупорку капилляров, гемоглобинурийную лихорадку. Этот процесс усиливается в результате иммунопатологического гемолиза неинфицированных эритроцитов. Нарушение микроциркуляции крови и гемолиз приводят к поражению мозга (малярийная кома), развитию острой почечной недостаточности. Летальность— около 1%.
Иммунитет.При заболевании формируется нестойкий видоспецифический, стади-оспецифический, нестерильный иммунитет. Возможны повторные заболевания. Антитела способствуют фагоцитозу пораженных эритроцитов и мерозоитов. Повышенный уровень противомалярийных антител класса G месяцами и годами сохраняется после заболевания.
Естественную резистентность отмечают у лиц, в эритроцитах которых нет антигенов
группы Duffy, а также у людей с врожденным дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидроге-назы, с гемоглобинопатиями (например, при серповидно-клеточной анемии).
Микробиологическая диагностика.
Диагностика основана на микроскопическом исследовании препаратов крови: «толстой капли» и мазков из крови, окрашенных по Романовскому—Гимзе или по Райту, и обнаружении различных форм возбудителя (красное ядро, голубая цитоплазма). Препарат «толстая капля» окрашивают не фиксируя, поэтому эритроциты и плазмодии деформируются; возможность обнаружения возбудителя значительно повышается. Если паразиты не обнаружены в крови, взятой на высоте лихорадки, то повторяют исследования мазков крови— через 12 часов и т. д.
В препаратах крови с неосложненной тропической малярией плазмодии P. falciparum не обнаруживаются, кроме кольцевидных тро-фозоитов и гамонтов полулунной формы.
Для обнаружения ДНК паразита в крови используют ДНК-гибридизацию и ПЦР. В серологическом методе применяют РИФ,РПГА, ИФА.
Лечение.Противомалярийные препараты оказывают различное действие на бесполые и половые стадии плазмодиев. Различают препараты шизонтоцидного (гисто- и гематоши-зонтотропного), гамонтотропного и спорозо-итотропного действия. К основным противомалярийным препаратам относят: хинин, мефлохин, хлорохин (хингамин), акрихин, примахин, бигумаль, пириметамин и др.
Профилактика.Профилактические мероприятия направлены на источник возбудителя (лечение больных малярией и паразито-носителей) и на уничтожение переносчиков возбудителя — комаров. Разрабатываются вакцины на основе антигенов, полученных генно-инженерным методом (антиспорозоит-ная антимерозоитная, антигамонтная).
19.3.2.Токсоплазмы (род Toxoplasma)
Токсоплазмоз — болезнь (инвазия), вызванная простейшими рода Toxoplasma, сопровождающаяся паразитемисй и поражением различных органов. У человека клинические проявления полиморфны, заболевание протекает хронически, част бессимптомно.
Таксономия.Возбудитель — Toxoplasma gondii, относится к типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Eucoccidiida (собственно кокцидии); выделен в 1908 г. Ш. Николем и Л. Мансо в Тунисе от грызунов гонди.
Характеристика возбудителя.Toxoplasma gondii — облигатный внутриклеточный паразит. В жизненном цикле токсоплазм различают несколько морфологических форм (рис 19.7): ооцисты, псевдоцисты, цисты, тахизоиты.
Ооцисты формируются в результате полового размножения паразита в клетках слизистой оболочки кишечника кошки и представителей семейства кошачьих — окончательных хозяев токсоплазм: разнополые гаметоциты сливаются с образованием ооцисты овальной формы (диаметр 10—12мкм). Ооцисты содержат по 2 спо-роцисты, в которых заключено по 4 споро-зоита. Ооцисты выделяются с фекалиями кошки и через 3 дня созревают в окружающей среде. Попав в кишечник человека (например, с немытыми овощами и фруктами), они освобождают спорозоиты, которые распространяются по лимфатическим сосудам, размножаются внутриклеточно бесполым путем (шизогония). Размножившиеся паразиты (тахизоиты) внедряются затем в другие клетки. Они обнаруживаются при острой стадии инфекции.
Тахизоиты (трофозоиты) имеют характерную форму апельсиновой дольки или полумесяца (размером 3x7 мкм). При окраске по Романовскому—Гимзе цитоплазма голубого цвета, а ядро — рубиново-красного.
Псевдоцисты не имеют оболочки; они образуются в пораженных клетках, макрофагах и содержат скопления трофозоитов (эндозои-тов). Обнаруживаются, как и тахизоиты, при острой инфекции.
Цисты (размер 10—1000 мкм) также образуются внутри клеток хозяина. Они имеют плотную оболочку и содержат более сотни паразитов (цистозоиты, или брадизоиты). Цисты сохраняются десятилетиями (хроническая инфекция).
Культивирование.Токсоплазмы культивируют в куриных эмбрионах и на культурах тканей, а также путем заражения белых мышей и других животных.
Резистентность.Ооцисты могут в течение года сохранять жизнеспособность в окружающей среде. Токсоплазмы быстро погибают при температуре 55 °С, высокочувствительны к 50% спирту, 5% раствору NH4OH.
Эпидемиология.Токсоплазмы распространены повсеместно. Источниками инвазии служат многие виды домашних и диких млекопитающих, а также птицы. Заражение человека происходит алиментарным путем в результате употребления в пищу термически слабо обработанных продуктов (мясо, молоко, яйца), содержащих в псевдоцистах и цистах трофозоиты (эндозоиты и цистозоиты) паразита. Животные и человек также могут инфицироваться ооцистами, выделяемыми кошками.
Реже токсоплазмы попадают контактным (через поврежденную кожу и слизистые оболочки) или воздушно-пылевым путями. При врожденном токсоплазмозе возбудитель проникает в плод через плаценту. Иногда заражение происходит в результате гемотрансфузии, трансплантации органов.
Патогенез и клиника.Токсоплазмы, проникшие в организм, достигают с током лимфы регионарных лимфоузлов, размножаются в них (тахизоиты), проникают в кровь, разносятся по организму, попадая в клетки ретику-лоэндотелиальной системы практически всех внутренних органов, где образуют псевдоцисты и цисты. Токсоплазмы поражают нервные клетки, печень, почки, легкие, сердце, мышцы, глаза. При острой инфекции наблюда-
ются паразитемия и скопления токсоплазм в тканях в виде псевдоцист. Хроническая инфекция характеризуется образованием тканевых цист.
Инкубационный период — около 2 недель. Клиническая картина разнообразна: от умеренной лимфоаденопатии до лихорадки, сыпи, гепатоспленомегалии, фарингита, менингоэн-цефалита, пневмонии и др. Она зависит от локализации возбудителя и поражаемого органа. При врожденном токсоплазмозе (инфицирование чаще происходит в I триместре беременности) возможны гибель плода, самопроизвольный выкидыш или мертворождение, рождение детей с дефектами развития. Поражаются печень, селезенка, лимфоузлы, ЦНС на фоне выраженной интоксикации и лихорадки.
Иммунитет.При заболевании развивается клеточный и гуморальный иммунитет. Развивается ГЗТ. При врожденном токсоплазмозе в крови матери и ребенка выявляется высокий уровень специфических антител.
Дата добавления: 2016-02-04; просмотров: 1664;