ПРАВИЛА ПОЛЬЗОВАНИЯ ФАРМАКОПЕЙНЫМИ СТАТЬЯМИ 65 страница

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9.

Удельное вращение. От -41 до -54 град. в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции).

рН. От 4,8 до 5,8 (1% раствор).

Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе "Количественное определение".

Испытуемый раствор. 0,05 г субстанции растворяют в 50 мл ПФ.

Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания основного пика. Примеси гуанозина и гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора идентифицируют по хроматограмме раствора для проверки пригодности системы.

Сумма площадей пиков гуанозина и гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,5%), сумма площадей пиков неидентифицированных примесей должна быть не более половины площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Потеря в массе при высушивании. Около 1 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 1,0%.

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).

Железо. Сульфатная зола из 2 г субстанции должна выдерживать испытание на железо (не более 0,0015% в субстанции).

Медь. 1,5 г субстанции прокаливают в фарфоровом тигле, остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты, разбавляют водой до 15 мл и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл 10% раствора аммиака и фильтруют; фильтрат не должен окрашиваться в голубой цвет.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 20 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 60 раз.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Фосфатный буферный раствор с рН 5,5-5,6. 2,72 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 700 мл воды, доводят рН раствора раствором калия гидроксида до 5,5-5,6, доводят объем раствора водой до 1000 мл, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Испытуемый раствор. Около 0,05 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в подвижной фазе (ПФ), доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. Около 0,05 г (точная навеска) ГСО рибоксина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФ, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,002 г гипоксантина и 0,002 г гуанозина растворяют в 10 мл стандартного раствора.

Хроматографические условия

Колонка - 15 х 0,39 см с октадецилсилил силикагелем (C18),

5 мкм;

ПФ - фосфатный буферный раствор с рН 5,5-5,6;

Температура колонки - 50 град. С;

Скорость потока - 0,6 мл/мин.;

Детектор - спектрофотометрический, 254 нм;

Объем пробы - 10 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Порядок элюирования компонентов: гипоксантин, рибоксин, гуанозин. Разрешение (R) между соседними пиками должно быть не менее 1,25; эффективность колонки (N), рассчитанная для пика рибоксина, должна быть не менее 3400 теоретических тарелок; хвостовой фактор (Т) пика рибоксина должен быть не более 1,1.

Шесть раз хроматографируют стандартный раствор. Относительное стандартное отклонение для площади пика рибоксина должно быть не более 2%.

Хроматографируют испытуемый и стандартный растворы.

Содержание C10H12N4O5 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) рассчитывают по формуле:

S x а x P x 100

1 0

X = --------------------,

S x a x (100 - W)

0 1

где: S - площадь пика рибоксина на хроматограмме испытуемого раствора;

S - площадь пика рибоксина на хроматограмме стандартного раствора;

a - навеска субстанции, в граммах;

а - навеска ГСО рибоксина, в граммах;

Р - содержание основного вещества в ГСО рибоксина, в процентах;

W - потеря в массе при высушивании субстанции, в процентах.

Хранение. В сухом, защищенном от света месте.

СИМВАСТАТИН (ФС 42-0276-07)

[(1S,3R,7S,8S,8аR)-8-[2-[(2R,4R)-4-Гидрокси-6-оксотетрагидро-2Н-пиран-2-ил]этил]-3,7-диметил-1,2,3,7,8,8а-гексагидро-1-нафтил]-2,2-диметилбутаноат

C25H38O5 М.м. 418,6

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% C25H38O5 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96%, очень легко растворим в метиленхлориде.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать спектру стандартного образца симвастатина.

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г в 20 мл метанола должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном BY7.

Удельное вращение. От +285 до +300 град. в пересчете на сухое вещество (0,5% раствор субстанции в ацетонитриле).

Посторонние примеси. Испытание проводят методом ВЭЖХ по методике, описанной в разделе "Количественное определение".

Хроматографируют испытуемый раствор А и раствор сравнения и определяют площади пиков. Примеси идентифицируют по относительным временам удерживания:

На хроматограмме испытуемого раствора А площадь пика ловастатина и эпиловастатина не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

На хроматограмме испытуемого раствора А площадь пика любой идентифицированной или неидентифицированной примеси, кроме пика ловастатина и эпиловастатина, должна быть не более 0,8 площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4%).

На хроматограмме испытуемого раствора А суммарная площадь пиков любых идентифицированных или неидентифицированных примесей, кроме пика ловастатина и эпиловастатина, не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).

Потеря в массе при высушивании. Около 1 г субстанции (точная навеска) сушат при температуре 60 град. С при остаточном давлении не более 670 Ра до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Растворитель. Раствор калия фосфата однозамещенного с концентрацией 1,4 г/л доводят до рН 4,0 фосфорной кислотой концентрированной. Смешивают 40 объемов полученного раствора и 60 объемов ацетонитрила.

Испытуемый раствор А. 0,075 г субстанции растворяют в растворителе и разбавляют растворителем до 50 мл.

Испытуемый раствор Б. Около 0,04 мг (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. Около 0,04 г (точная навеска) стандартного образца симвастатина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. 0,5 мл испытуемого раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. 1 мг стандартного образца симвастатина и 1 мг стандартного образца ловастатина растворяют в растворителе и разбавляют растворителем до 50 мл.

Хроматографические условия

Колонка - 33 х 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18),

3 мкм;

Температура - комнатная;

колонки

ПФ - А: ацетонитрил - 0,1% раствор фосфорной

кислоты (1:1);

- В: 0,1% раствор фосфорной кислоты

в ацетонитриле;

Градиентный режим ┌────────────────┬────────────────┬───────────────┐

│ Время (мин.) │ ПФ А (%) │ ПФ В (%) │

├────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│0-4,5 │100 │0 │

├────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│4,5-4,6 │100 => 95 │0 => 5 │

├────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│4,6-8,0 │95 => 25 │5 => 75 │

├────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│8,0-11,5 │25 │75 │

├────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│11,5-11,6 │25 => 100 │75 => 0 │

├────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│11,6-13 │100 │0 │

└────────────────┴────────────────┴───────────────┘

Скорость потока - 3,0 мл/мин.;

Детектор - спектрофотометрический, 238 нм;

Объем пробы - 5 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Разрешение между пиком ловастатина и эпиловастатина и пиком симвастатина должно быть не менее 5,0.

Пять раз хроматографируют стандартный раствор.

Относительное стандартное отклонение для площади пика симвастатина должно быть не более 2,0%.

Хроматографируют испытуемый раствор Б и стандартный раствор.

Содержание симвастатина в процентах (X) вычисляют по формуле:

S x а x P x 100

1 0

X = --------------------,

S x a x (100 - W)

0 1

где: S - площадь пика симвастатина на хроматограмме испытуемого

раствора Б;

S - площадь пика симвастатина на хроматограмме стандартного раствора;

a - навеска субстанции, в граммах;

a - навеска стандартного образца симвастатина, в граммах;

W - потеря в массе при высушивании, в процентах;

Р - содержание основного вещества в стандартном образце симвастатина, в

процентах.

Хранение. В сухом, защищенном от света месте.

СПИРОНОЛАКТОН (ФС 42-0277-07)

7альфа-(Ацетилтио)-3-оксопрегн-4-ен-21,17 бета-карболактон

C24H32O4S М.м. 416,6

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% C24H32O4S в пересчете на сухое вещество.

Описание. От белого до желтовато-белого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%, мало растворим в эфире.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать спектру стандартного образца спиронолактона.

Ультрафиолетовый спектр поглощения раствора субстанции, приготовленного для количественного определения, в области от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 238 нм.

К 0,01 г субстанции прибавляют 2 мл 50% раствора серной кислоты и встряхивают. Образуется оранжевый раствор с интенсивной желтовато-зеленой флуоресценцией. Осторожно нагревают раствор; цвет становится интенсивно красным и выделяется сероводород, вызывающий почернение бумаги, пропитанной свинца ацетатом. Прибавляют 10 мл воды, образуется зелено-желтое окрашивание с флуоресценцией или выпадает осадок.

Температура плавления. От 198 до 207 град. С.

Удельное вращение. От -33 до -37 град. в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции в хлороформе).

Меркаптосоединения. 2 г субстанции встряхивают в течение 1 мин. с 20 мл воды и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,05 мл 0,01 М раствора йода и 0,1 мл раствора крахмала и перемешивают; появляется голубое окрашивание.

Хром. Раствор сравнения. К 1 мл 14% раствора серной кислоты прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного раствора калия бихромата (концентрация 28,3 мг/л), разбавляют водой до 20 мл и прибавляют 0,5 мл раствора дифенилкарбазида.

Раствор дифенилкарбазида. 0,200 мг дифенилкарбазида растворяют в 10 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют 90 мл этанола.

0,2 г субстанции помещают в платиновый тигель, прибавляют 1 г калия карбоната и 0,3 г калия нитрата. Осторожно нагревают до появления дыма и сжигают при температуре от 600 до 650 град. С до удаления углерода. Охлаждают, осадок растворяют при осторожном нагревании в 10 мл воды, фильтруют и разбавляют водой до 20 мл. К 10 мл полученного раствора прибавляют 0,5 г мочевины и затем 14% раствор серной кислоты до получения кислого раствора. После прекращения газовыделения прибавляют еще 1 мл 14% раствора серной кислоты, разбавляют водой до 20 мл и прибавляют 0,5 мл раствора дифенилкарбазида. Раствор должен быть не более интенсивно окрашен, чем раствор сравнения.

Посторонние примеси. Подвижная фаза (ПФ). Смесь ацетонитрил - тетрагидрофуран - вода (4:9:37).

Испытуемый раствор. 0,0625 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 2,5 мл тетрагидрофурана и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения А. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. Растворяют 0,025 г стандартного образца канренона (стандарт ВР или аналогичного качества), помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 1 мл тетрагидрофурана и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения С. 1 мл раствора сравнения Б помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности системы 1. Смешивают 1 мл испытуемого раствора и 1 мл раствора сравнения Б и разбавляют ПФ до 100 мл.

Раствор для проверки пригодности системы 2. 1 мл раствора сравнения А разбавляют ПФ до 10 мл.

Хроматографические условия

Колонка - 15 х 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18),

5 мкм;

Скорость потока - 1,8 мл/мин.;

Детектор - спектрофотометрический, 254 и 283 нм;

Объем пробы - 20 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы 1. Разрешение (R) между пиками канренона и спиронолактона должно быть не менее 1,4.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы 2. Отношение сигнал/шум должно быть не менее 6.

Хроматографируют раствор сравнения А не менее 5 раз. Относительное стандартное отклонение площади пика спиронолактона не должно превышать 5%.

Хроматографируют раствор сравнения А и испытуемый раствор (детектирование при 254 нм). Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания основного пика.

Площадь пиков посторонних примесей, кроме пика канренона на хроматограмме испытуемого раствора, должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1%).

Хроматографируют раствор сравнения С и испытуемый раствор (детектирование при 283 нм).

Площадь пика канренона на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более площади пика канренона на хроматограмме раствора сравнения С (не более 1%).

Общее содержание канренона и других примесей, определенных при двух волнах детектирования, должно быть не более 1%.

Потеря в массе при высушивании. Около 1 г субстанции (точная навеска) сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.

Сульфатная зола. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,1%.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Около 0,05 г субстанции (точная навеска), помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в метаноле, доводят объем раствора метанолом до метки. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят метанолом до метки.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм в максимуме поглощения при 238 нм.

Содержание C24H32O4S (спиронолактона) вычисляют по формуле:

A x 5000

X = ----------------------,

1%

A x a x (100 - W)

1 см

где: А - оптическая плотность испытуемого раствора;

а - навеска субстанции, в граммах;

1%

A - удельный показатель поглощения спиронолактона, при 238 нм,

1 см

равный 470;

W - потеря в массе при высушивании, в процентах.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

СУЛЬФАДИМЕТОКСИН (ФС 42-0278-07)

4-Амино-N-(2,6-диметоксипиримидин-4-ил)бензолсульфонамид

C12H14N4O4S М.м. 310,33

Содержит не менее 99,0% C12H14N4O4S в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, очень мало растворим в хлороформе, мало растворим в спирте 96%, растворим в хлористоводородной кислоте разведенной 8,3%, легко растворим в растворах едких щелочей.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать спектру стандартного образца сульфадиметоксина.

0,075 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и доводят объем раствора водой до метки. 5 мл полученного раствора разбавляют водой до 250 мл. По 20 мл полученного раствора помещают в две конические колбы, в первую прибавляют 0,4 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида, а во вторую - 0,4 мл хлористоводородной кислоты концентрированной.

Ультрафиолетовый спектр поглощения щелочного раствора, снятый относительно кислого раствора, в области от 240 до 280 нм должен иметь максимумы при 253 нм и 268 нм и минимум при 260 нм.

Ультрафиолетовый спектр поглощения кислого раствора, снятый относительно щелочного раствора, в области от 285 до 300 нм должен иметь максимум при 288 нм.

Раствор 0,05 г субстанции в 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной дает характерную реакцию на первичные ароматические амины.

Температура плавления. От 198 до 204 град. С.

Прозрачность раствора. Раствор 0,4 г субстанции в 10 мл 1 М раствора натрия гидроксида должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9.

Кислотность. 1 г субстанции нагревают при температуре 70 град. С с 50 мл воды, свободной от углекислого газа, в течение 5 мин., быстро охлаждают и фильтруют. На титрование 25 мл фильтрата должно пойти не более 0,1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида (индикатор 0,1 мл 0,04% раствора бромтимолового синего).

Посторонние примеси. Испытание проводят методом ТСХ.

Испытуемый раствор. 0,1 г субстанции растворяют в смеси спирт 96% - раствор аммиака концентрированный 25% (9:1) и разбавляют той же смесью до 10 мл.

Раствор сравнения. 0,005 г сульфаниламида растворяют в смеси спирт 96% - раствор аммиака концентрированный 25% (9:1) и разбавляют той же смесью до 100 мл.

Раствор для опрыскивания. 0,02 г диметиламинобензальдегида растворяют в 20 мл спирта 96% и прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной.

На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F наносят 10 мкл (100 мкг) испытуемого раствора и 10 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью хлороформ - метанол - диметилформамид (20:2:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат при температуре 100-105 град. С в течение 10 мин. и опрыскивают раствором диметиламинобензальдегида.

На хроматограмме испытуемого раствора пятно, находящееся на уровне пятна сульфаниламида, по совокупности величины и интенсивности окраски не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Потеря в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.

Хлориды. 0,5 г субстанции встряхивают в течение 3 мин. со смесью 0,5 мл азотной кислоты разведенной 16% и 9,5 мл воды и фильтруют. 4 мл фильтрата, разведенные водой до 10 мл, должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01% в субстанции).

Сульфаты. 1 г субстанции встряхивают в течение 3 мин. со смесью 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и 19,5 мл воды и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в субстанции).

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1,0 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции растворяют в смеси 75 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и титруют нитритометрически. Конец титрования устанавливают по йодкрахмальной бумаге.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 31,03 мг C12H14N4O4S.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

ТЕОФИЛЛИН (ФС 42-0279-07)

1,3-Диметил-1Н-пурин-2,6(3Н,7Н)дион, моногидрат или безводный

C7H8N4O2 x H2O М.м. 198,18

C7H8N4O2 М.м. 180,17 (безводный)

Содержит не менее 99,0% C7H8N4O2 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок без запаха.

Растворимость. Мало растворим в воде, спирте 96% и хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать рисунку спектра теофиллина (Приложение 1).

К 0,1 г субстанции прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 0,1 мл раствора аммиака; появляется пурпурно-красное окрашивание.

0,1 г субстанции встряхивают с 2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида в течение 3 мин. и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл 2% раствора кобальта хлорида и перемешивают; образуется белый с розоватым оттенком осадок.

Температура плавления. От 270 до 274 град. С.

Прозрачность раствора. 0,5 г субстанции растворяют в горячей воде, охлаждают и разбавляют водой до 75 мл. Раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9.

Кислотность. 0,5 г субстанции растворяют в 75 мл свежепрокипяченной воды и прибавляют 0,05 мл раствора метилового красного; появившееся красное окрашивание должно переходить в желтое от прибавления не более 0,4 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Посторонние примеси. Испытуемый раствор. 0,04 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в подвижной фазе (ПФ), доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,01 г стандартного образца теобромина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, прибавляют 5 мл испытуемого раствора, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.