ПРАВИЛА ПОЛЬЗОВАНИЯ ФАРМАКОПЕЙНЫМИ СТАТЬЯМИ 63 страница

Сульфаты. К 0,5 г субстанции прибавляют 9 мл воды и 1 мл кислоты хлористоводородной разведенной, перемешивают до растворения и прибавляют 1 мл 5% раствора бария хлорида. Раствор должен выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в субстанции).

Нитраты. К 0,01 г субстанции прибавляют 2 мл раствора дифениламина и перемешивают; не должно появляться голубое окрашивание.

Потеря в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1,0 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

Пирогенность. Тест-доза 5 мг субстанции в 0,5 мл воды для инъекций на 1 кг массы животного.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Около 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в 25 мл свежепрокипяченной горячей воды, охлаждают и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания (индикатор - 0,1 мл 1% раствора фенолфталеина), не исчезающего в течение 2 мин.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,31 мг C6H5NO2.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

НИТРАЗЕПАМ (ФС 42-0264-07)

7-Нитро-5-фенил-2,3-Дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-2-он

C15H11N3O3 М.м. 281,27

Содержит не менее 99,0% C15H11N3O3 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Светло-желтый или светло-желтый с зеленоватым оттенком кристаллический порошок без запаха.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96% и эфире, умеренно растворим в хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать рисунку спектра нитразепама (Приложение 1).

0,01 г субстанции растворяют в смеси метанол - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (9:1) и разбавляют той же смесью до 100 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют смесью метанол - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (9:1) до 20 мл. Регистрируют спектр поглощения полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм в области от 230 до 350 нм. В спектре должен наблюдаться максимум при 280 нм, минимум при 240 нм и плечо в интервале от 343 до 347 нм.

К 0,02 г субстанции прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 10 мл воды. Нагревают на водяной бане в течение 15 мин., охлаждают и фильтруют. К фильтрату прибавляют 1 мл 0,1% раствора натрия нитрита и оставляют на 10 мин. Прибавляют 1 мл 0,1% раствора нафтилэтилендиамина дигидрохлорида; появляется ярко-розовое окрашивание.

Температура плавления. От 226 до 230 град. С.

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл хлороформа должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Посторонние примеси. Испытание проводят методом ТСХ.

Испытуемый раствор. 0,1 г субстанции растворяют в хлороформе и разбавляют хлороформом до 5 мл.

Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора разбавляют хлороформом до 50 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют хлороформом до 20 мл.

На линию пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 10 мкл (200 мкг) испытуемого раствора, 20 мкл (0,4 мкг), 10 мкл (0,2 мкг) и 5 мкл (0,1 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью бензол-метилэтилкетон (2:1) и хроматографируют восходящим методом. Смесь растворителей используют однократно. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора сравнения (0,1 мкг) четко видно пятно.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Около 0,25 г (точная навеска) субстанции растворяют в 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до желтого окрашивания (индикатор - 0,1 мл 0,1% раствор кристаллического фиолетового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,13 мг C15H11N3O3.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

НОВОКАИНА ГИДРОХЛОРИД (ФС 42-0265-07)

[2-(Диэтиламино)этил]-4-аминобензоата гидрохлорид

C13H20N2O2 x HCl М.м. 272,78

Содержит не менее 99,5% и не более 101,0% C13H20N2O2 x HCl в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%, мало растворим в хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать рисунку спектра новокаина гидрохлорида (Приложение

1).

0,05 г субстанции растворяют в 2 мл воды. Раствор дает характерную реакцию на первичные ароматические амины с образованием оранжево-красного окрашивания, переходящего в вишнево-красное.

0,05 г субстанции растворяют в 2 мл воды, прибавляют 0,15 мл серной кислоты разведенной 16% и 1 мл 0,1 М раствора калия перманганата; фиолетовое окрашивание сразу исчезает.

Субстанция дает характерную реакцию на хлориды.

Температура плавления. От 154 до 158 град. С.

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9.

рН. От 6,0 до 7,5 (1% раствор).

Посторонние примеси. Определение проводят методом ТСХ.

Испытуемый раствор. 0,2 г субстанции растворяют в 0,6 мл воды и разбавляют спиртом 96% до 10 мл.

Раствор сравнения. 0,01 г 4-аминобензойной кислоты и 0,01 г анестезина растворяют в 100 мл спирта 96%. 1 мл полученного раствора разбавляют спиртом 96% до 10 мл.

На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 20 мкл (400 мкг) испытуемого раствора и 20 мкл (0,2 мкг 4-аминобензойной кислоты и 0,2 мкг анестезина) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью бензол-ацетон (4:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пятна посторонних примесей на хроматограмме испытуемого раствора, находящиеся на уровне пятен 4-аминобензойной кислоты и анестезина, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должны превышать соответствующие пятна на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05% каждой примеси).

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,14 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 100 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 400 раз.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления стерильных лекарственных форм.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Около 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3%. Полученный раствор титруют нитритометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 27,28 мг C13H20N2O2 x HCl.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

ОНДАНСЕТРОНА ГИДРОХЛОРИД (ФС 42-0266-07)

9-Метил-3-[(2-метил-1Н-мидазол-1-ил)метил]-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-карбазол-4-она гидрохлорид, дигидрат

C18H19N3O x HCl x 2H2O М.м. 365,86

Содержит не менее 97,5% и не более 102,0% C18H19N3O x HCl в пересчете на безводное вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде и в спирте 96%, мало растворим в метиленхлориде, очень мало растворим в ацетоне и хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать спектру стандартного образца ондансетрона

гидрохлорида.

0,01 г субстанции растворяют в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты и разбавляют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до 100 мл. 5 мл полученного раствора разбавляют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до 50 мл. Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в области от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 248 нм, 266 нм и 309 нм и минимумы при 231 нм, 257 нм и 282 нм.

Субстанция дает характерную реакцию на хлориды.

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании на Прозрачность раствора, измеренная на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм при 390 нм, должна быть не более 0,1.

рН. От 4,0 до 5,5 (1% раствор).

Посторонние примеси. Определение примеси D (1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-метилен-4Н-карбазол-4-он) проводят методом ВЭЖХ.

Подвижная фаза (ПФ). 2,74 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 5,4 +/- 0,1 1 М раствором натрия гидроксида. 800 мл полученного раствора смешивают с 200 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. Около 0,055 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, объем раствора доводят ПФ до метки.

Раствор сравнения. Около 0,004 г стандартного образца примеси D (1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-метилен-4Н-карбазол-4-он; стандарт USP или аналогичного качества) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, объем раствора доводят ПФ до метки. 1 мг полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, объем раствора доводят ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,001 г стандартного образца примеси С (1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-4Н-карбазол-4-он; стандарт USP или аналогичного качества) растворяют в ПФ и разбавляют ПФ до 10 мл. 1 мл полученного раствора смешивают с 1,5 мл раствора сравнения и разбавляют ПФ до 100 мл.

Хроматографические условия

Колонка - 20 х 0,46 см, силикагель с нитрильными группами (CN),

4 мкм;

Скорость потока - 1,5 мл/мин.;

Детектор - спектрофотометрический, 328 нм;

Объем пробы - 25 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Время удерживания пика примеси С около 0,8 относительно времени удерживания пика примеси D. Разрешение (R) между пиками примесей С и D должно быть не менее 1,5.

Пять раз хроматографируют раствор сравнения. Относительное стандартное отклонение для площади пика примеси D должно быть не более 5,0%.

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор и определяют площади пиков примеси D.

Содержание примеси D в процентах (X) вычисляют по формуле:

S x a x P

1 0

X = -------------,

S x a

0 1

где: S - площадь пика примеси D на хроматограмме испытуемого раствора;

S - площадь пика примеси D на хроматограмме раствора сравнения;

a - навеска субстанции, в граммах;

а - навеска стандартного образца примеси D стандарта, в граммах;

Р - чистота стандартного образца примеси D, в процентах.

Содержание примеси D должно быть не более 0,1%.

Метод 1. Определение неидентифицированных примесей проводят методом ВЭЖХ одновременно с количественным определением.

Содержание любой примеси в процентах (X) определяют по формуле:

S x 100

Х = ------------,

SUM S x S

i 1

где: S - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого

раствора;

S - площадь пика ондансетрона на хроматограмме испытуемого раствора.

Содержание любой примеси должно быть не более 0,1%. Суммарное содержание примесей должно быть не более 0,5%.

Метод 2. Определение примесей проводят методом ТСХ.

Испытуемый раствор. 0,125 г субстанции растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл.

Раствор сравнения А. 1 мл испытуемого раствора разбавляют метанолом до 100 мл.

Раствор сравнения Б. 0,001 г стандартного образца примеси А (3-(диметила-минометиламино-1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-4Н-карбазол-4-он; стандарт USP или аналогичного качества) растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл.

Раствор сравнения В. 0,001 г стандартного образца примеси В (6,6'-метилен-бис-[(1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1Н-имидазол-1-ил)-метил]-4Н-карбазол-4-он; стандарт USP или аналогичного качества) растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл.

На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F наносят 20 мкл (250 мкг) испытуемого раствора, 20 мкл (2,5 мкг) и 4 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Рядом на ту же пластинку наносят 2 мкл (25 мкг) испытуемого раствора и в ту же точку по 10 мкл (1 мкг) растворов сравнения Б и В. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью хлороформ - этилацетат - метанол - раствор аммиака концентрированный 25% (90:50:40:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме смешанного раствора из общей точки нанесения четко видны три пятна.

Вода. Не менее 9,0% и не более 10,5%. Определение проводят методом К. Фишера из точной навески около 0,25 г субстанции.

Сульфаты. 0,15 г субстанции растворяют в воде и разводят водой до 10 мл. Раствор должен выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,015% в субстанции).

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Подвижная фаза (ПФ). 2,74 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 5,4 +/- 0,1 1 М раствором натрия гидроксида. 500 мл полученного раствора смешивают с 500 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. Около 0,09 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, объем раствора доводят ПФ до метки. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят ПФ до метки.

Стандартный раствор. Около 0,09 г (точная навеска) стандартного образца ондансетрона гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, объем раствора доводят ПФ до метки. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,001 г стандартного образца примеси А растворяют в стандартном растворе и разбавляют стандартным раствором до 10 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют стандартным раствором до 10 мл.

Хроматографические условия

Колонка - 20 х 0,46 см, силикагель с нитрильными группами (CN),

4 мкм;

Скорость потока - 1,5 мл/мин.;

Детектор - спектрофотометрический, 216 нм;

Объем пробы - 10 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Время удерживания пика примеси А около 1,1 относительно времени удерживания пика ондансетрона. Разрешение (R) между пиками примеси А и ондансетрона должно быть не менее 1,5.

Пять раз хроматографируют стандартный раствор. Относительное стандартное отклонение для площади пика ондансетрона должно быть не более 2,0%.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы и определяют площади пиков. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания основного пика.

Содержание C18H19N3O x HCl в процентах (X) вычисляют по формуле:

S x a x P x 100

1 0

Х = ---------------------,

S x a x (100 - W)

0 1

где: S - площадь пика ондансетрона на хроматограмме испытуемого

раствора Б;

S - площадь пика ондансетрона на хроматограмме стандартного раствора

А;

а - навеска субстанции, в граммах;

а - навеска стандартного образца ондансетрона гидрохлорида, в граммах;

W - содержание воды, в процентах;

Р - содержание основного вещества в стандартном образце ондансетрона

гидрохлорида, в процентах.

Хранение. В сухом, защищенном от света месте.

ПАПАВЕРИНА ГИДРОХЛОРИД (ФС 42-0267-07)

6,7-Диметокси-1-(3,4-диметоксибензил)изохинолина гидрохлорид

C20H21NO4 x HCl М.м. 375,84

Содержит не менее 99,0% C20H21NO4 x HCl в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белые или почти белые кристаллы или белый или почти белый кристаллический порошок без запаха.

Растворимость. Растворим в хлороформе, умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения

должен соответствовать рисунку спектра папаверина гидрохлорида (Приложение

1).

Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,0005% раствора субстанции в 0,01 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 230 до 270 нм должен иметь максимум при 251 нм.

Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,0025% раствора субстанции в 0,01 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 270 до 350 нм должен иметь максимумы при 285 нм и 309 нм.

К 0,1 г субстанции прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают; появляется фиолетовое окрашивание.

Субстанция дает характерную реакцию на хлориды.

Прозрачность раствора. 0,5 г растертой субстанции растворяют в 25 мл воды при нагревании до 50 град. С. Раствор после охлаждения должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном BY6.

рН. От 3,0 до 4,5 (2% раствор).

Легко карбонизируемые примеси. К 0,05 г субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают раствор в течение 15 мин. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном R4 или Y4.

Посторонние примеси. Испытуемый раствор. 0,25 г субстанции растворяют в 5 мл хлороформа.

Раствор сравнения. 0,5 мл испытуемого раствора разбавляют хлороформом до 100 мл.

На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 10 мкл (500 мкг) испытуемого раствора, 10 мкл (2,5 мкг) и 2 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью толуол - этилацетат - диэтиламин (7:2:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 20 мин. и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пятно любой посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) (не более 0,1%). Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности поглощения их пятен на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с пятном на хроматограмме раствора сравнения (2,5 мкг), не должно превышать 0,5%. Пятно на старте в расчет не принимают.

Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) четко видно пятно.

Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.

Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).

Железо. Сульфатная зола из 1 г субстанции должна выдерживать испытание на железо (не более 0,003% в субстанции).

Бактериальные эндотоксины. Не более 2,9 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация - 10 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 100 раз.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Около 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в 1 мл муравьиной кислоты, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления ярко-желтого окрашивания (индикатор - 0,15 мл 0,1% раствора кристаллического фиолетового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,58 мг C20H21NO4 x HCl.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

ПАРАЦЕТАМОЛ (ФС 42-0268-07)

N-(4-Гидроксифенил)ацетамид

C8H9NO2 М.м. 151,17

Содержит не менее 99,9% и не более 101,0% C8H9NO2 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96%, растворим в ацетоне и растворах едких щелочей, умеренно растворим в воде.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия

-1

бромидом, в области от 4000 до 400 см должен соответствовать по положению

полос поглощения рисунку спектра парацетамола (Приложение 1).

0,05 г субстанции растворяют в 100 мл спирта 96%. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и разбавляют спиртом 96% до 100 мл. Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в области от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 249 нм.

0,1 г субстанции встряхивают с 10 мл воды и прибавляют 0,5 мл 3% раствора железа(III) хлорида; появляется сине-фиолетовое окрашивание.

Температура плавления. От 168 до 172 град. С (в пределах 3 град. С).

рН. От 5,4 до 6,6 (0,5 г субстанции встряхивают в течение 2 мин. с 10 мл воды).

Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.

0,05 М раствор натрия фосфата двузамещенного. 17,9 г натрия фосфата двузамещенного растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 мл.

0,05 М раствор натрия фосфата однозамещенного. 7,8 г натрия фосфата однозамещенного растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 мл.

Раствор тетрабутиламмония гидроксида. 4,6 г 40% раствора тетрабутиламмония гидроксида (или 1,84 г тетрабутиламмония гидроксида 30-водного) растворяют в метаноле и доводят объем раствора спиртом метиловым до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). 0,05 М раствор натрия фосфата двузамещенного - 0,05 М раствор натрия фосфата однозамещенного - раствор тетрабутиламмония гидроксида (37,5:37,5:25).

Испытуемый раствор. Около 0,2 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 2,5 мл раствора тетрабутиламмония гидроксида в метаноле, доводят объем раствора смесью 0,05 М раствор натрия фосфата двузамещенного - 0,05 М раствор натрия фосфата однозамещенного (1:1) до метки и перемешивают. Испытуемый раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор сравнения А. Около 0,05 г (точная навеска) 4-аминофенола, около 0,05 г (точная навеска) 4-хлорацетанилида и 0,05 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, растворяют в метаноле, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора подвижной фазой (ПФ) до метки и перемешивают.

Раствор сравнения Б. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор сравнения В. 1 мл раствора сравнения Б помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Хроматогоафические условия

Колонка - 25 х 0,46 см с октилсилил силикагелем (С8), 5 мкм;

Скорость потока - 1,5 мл/мин.;

Детектор - спектрофотометрический, 245 нм;

Объем пробы - 20 мкл.

Хроматографируют раствор сравнения А. Относительные времена удерживания компонентов: 4-аминофенол - около 0,8; парацетамол - 1,0 (около 4 мин.); 4-хлорацетанилид - около 11. Разрешение (R) между пиками 4-аминофенола и парацетамола должно быть не менее 4,0. Отношение сигнал/шум для пика 4-хлорацетанилида должно быть не менее 50.

Хроматографируют растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 12 раз превышать время удерживания основного пика.

Содержание примесей 4-аминофенола и 4-хлорацетанилида в субстанции в процентах (X) рассчитывают по формуле:

S x a

1 0

X = -------------,

S x a х 50

0 1

где: S - площадь пика 4-аминофенола (или 4-хлорацетанилида) на

хроматограмме испытуемого раствора;

S - площадь пика 4-аминофенола (или 4-хлорацетанилида) на

хроматограмме раствора сравнения А;

a - навеска субстанции, в граммах;

a - навеска 4-аминофенола (или 4-хлорацетанилида), в граммах.

Содержание любой неидентифицированной примеси в субстанции в процентах (X) рассчитывают по формуле:

X = --------,

S x 10

где: S - площадь пика неидентифицированной примеси на хроматограмме

испытуемого раствора;

S - площадь пика парацетамола на хроматограмме раствора сравнения Б.

Содержание 4-аминофенола должно быть не более 0,005%, 4-хлорацетанилида - не более 0,001%, любой неидентифицированной примеси - не более 0,05%, суммарное содержание неидентифицированных примесей - не более 0,1% (пики, площадь которых менее площади пика на хроматограмме раствора сравнения В, не учитывают).

<53 545556 57 58 59 >

Дата добавления: 2016-07-09; просмотров: 683;