Маркерный спектр вирусных гепатитов

Острый гепатит А (ОГА). Основное значение для подтверждения диагноза вирусного гепатита А имеет определение в крови анти-HAV класса М методом ИФА (иммуноферментного анализа). Анти-HAV класса М выявляются в крови еще в фазе инкуба­ции, за 3-5 дней до появления первых симптомов, и продолжают выяв­ляться на всем про­тяжении клинического периода болезни, и затем еще в течение 4-6 ме­сяцев. Спустя 1 год после выздоровления анти-HAV класса М в крови не определяются. В сочетании с клиническим симптомокомплексом и соответствующими данными эпиданамнеза обнаружение анти-HAV класса М является надежным подтверждением диагноза вирусного гепатита А.

Анти-HAV IgG могут появляться в сыворотке крови уже в начале заболевания. После выздоровления анти-HAV IgG обнаруживаются в крови пожизненно, свидетельствуют о перенесенном заболевании и рассматриваются как показатель иммунной защиты против вируса.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) позволяет установить присут­ствие HAV-РНК в крови. Суть метода состоит в воспроизведении реп­ликации вируса in vitro. В субстрат - кровь, ткани вводят так называе­мый праймер - небольшую цепочку нуклеотидов искомого вируса. При его наличии в субстрате вирусная ДНК-полимераза с двух сторон “дошнуровывает” цепочку до полного размера. Такой метод амплифи­кации (умножения) позволяет получить неограниченное количество копий вируса (до 100 млн. за один день). Благодаря этому, с помощью ПЦР удается уловить присутствие минимального количества вируса, вплоть до одной молекулы. Метод ПЦР рассматривается как арбит­ражный метод референс-диагностики, дополняющий первичную скри­нинговую ИФА-диагностику. ПЦР позволяет оценить репликативную активность, оценивать эффективность лечения гепатита. Вирусемия при ОГА непостоянная и выявляется не у всех больных и только в на­чальном периоде заболевания.

Острый вирусный гепатит В (ОГВ). Для диагностики ОГВ ис­пользуют определение комплекса маркеров HBV. Наибольшее практи­ческое значение имеет определение в крови HBsAg, анти-HBs-антител, HBeAg, анти-HBe, анти-HBc-антител.

HBsAg (поверхностный антиген или австралийский антиген) явля­ется наиболее ранним маркером ОГВ, он появляется в крови в послед­ние 1-2 недели инкубации и продолжает обнаруживаться первые 4-6 недель клинического периода. В более поздние сроки заболевания HBsAg связывается с анти-НВs антителами и в свободном виде не об­наруживается. Длительная циркуляция HBsAg свидетельствует о высо­кой исходной концентрации вирусных антигенов и/или о тяжести тече­ния болезни. Обнаружение HBsAg через 6 месяцев после начала забо­левания может указывать на начало хронизации процесса.

У больных с ОГВ анти-HBs антитела начинают выявлять через 3-4 месяца после исчезновения HBsAg, реже они обнаруживаются через год. У 15% переболевших, несмотря на клиническое выздоровление анти-HBs не определяются, что связано с генетически обусловленными особенностями связывания анти-HBs в иммунные комплексы. Выявле­ние анти-HBs-антител является критерием перенесенного ОГВ и свиде­тельствует о наличии иммунитета к вирусу гепатита В. Через 5-6 лет после ОГВ анти-HBs-антитела начинают исчезать из крови.

Исследование анти-HBs проводят для оценки эффективности вак­цинации против вирусного гепатита В. При этом уровень этих антител в 10 mlu/мл и выше свидетельствует об адекватном ответе на вакцина­цию.

Антитела к сердцевидному антигену (анти-НВс IgM) принадлежит особая диагностическая роль. Эти антитела обнаруживаются уже в инку­бационном периоде, в начале острой фазы болезни, еще до пика по­вышение АлАт, до появления желтухи. Выявление этих антител сви­де­тельствует о репликации вируса и является подтверждением ОГВ. Через год после выздоровления анти-НВс IgM не обнаруживаются.

Определение анти-НВс IgM особенно важно в следующих случаях: 1) при поздней диагностике ОГВ (когда HBsAg в крови может уже от­сутствовать и анти-НВс IgM становится единственным маркером ОГВ); 2) при появлении признаков острого гепатита у больных с хрониче­ским гепатитом В. Если такой гепатит связан с суперинфицированием другими гепатропными вирусами анти-НВс IgM отсутствуют или их содержание незначительно.

Анти-НВс IgG появляются через 1,5-2 месяца с начала периода раз­гара заболевания и могут циркулировать пожизненно, являясь единст­венным маркером перенесенного гепатита В. При этом значимость анти-НВс IgG как маркера перенесенной инфекции выше, чем анти-HBs, поскольку:

1) анти-HBs могут появляться в результате вакцинации;

2) анти-HBc IgG присутствуют в фазу "серонегативного окна", ко­гда HBs Ag уже отсутствует, а анти-HBs еще не появились;

3) анти-HBs не развивается у 15% реконвалесцентов;

4) в течение 6 лет анти-HBs исчезает у 20% переболевших.

HBe Ag обнаруживается в крови уже при первых клиниче­ских про­явлениях заболевания и является маркером "инфекционности" крови. Высокая концентрация НВе Ag указывает на активную репликацию вируса и свидетельствует о тяжести состояния больного и его макси­мальной опасности для окружающих.

При благоприятном течении ОГВ НВе Ag исчезает из крови через 1,5-2 месяца после начала заболевания. Длительное сохранение НВе Ag свидетельствует о продолжающейся вирусной репликации и опасности развития хронического гепатита В.

При ОГВ с циклическим течением анти-Нве антитела выявляются на 2-3 неделе желтушного периода. Сероконверсия НВе Ag в анти-НВе антитела указывает на резкое снижение активности инфекционного процесса и переход его в стадию реконвалесценции. Анти-НВе анти­тела обнаруживаются в крови от нескольких месяцев до нескольких лет.

Т.О., различное сочетание маркеров вируса гепатита В позволяет судить о фазе заболевания, стадиях инфекционного процесса, делать прогноз заболевания. Точность диагностики повышается, если в крови, лимфоцитах или биоптате печени исследовать ДНК вируса гепатита В (HBV-ДНК) методом ПЦР или молекулярной гибридизации.

При первичном обследовании больных с начальными проявле­ниями ОГВ ( таб. 55) в крови выявляются: HBsAg, анти-HВc IgM, и непостоянно HBV-ДНК и HВe Ag в зависимости от сроков обследо­вания и тяжести течения процесса. При повторных исследованиях спустя 10-15 дней в крови продолжает циркулировать свободный HBs Ag. Показатели HBe Ag и анти-HBe-антител зависят от тяжести тече­ния заболевания. У тяжелых больных сохраняется НВе Ag, у легких - появляются анти-НВе или отсутствуют оба маркера. При исследовании антител к сердцевидному антигену выявляются как анти-HBc IgM, так и анти-HBc IgG. При прогредиентном течении инфекции в крови по­стоянно определяются HBV-ДНК, HBe Ag, HBs Ag.

Табл.55. Серологические маркеры при остром гепатите В

Табл.56. Серологические маркеры при злокачественном гепатите В

Табл. 57. Серологические маркеры при HDV-суперинфекции у носи­теля HBsAg

*- снижение концентрации HBsAg

Хронический гепатит В (ХГВ). Диагноз ХГВ репликативного типа подтверждается стабильным выявлением HBeAg, обнаружением HBV-ДНК в высокой концентрации (более 50 пг/50 мкл), выявлением в крови анти-HBc класса не только G, но и М, в относительно меньшей кон­центрации. Сохраняющаяся циркуляция анти-НВс IgM, особенно в высокой концентрации, в определенной степени соответствует индексу высокой активности патоморфологических изменений в печени.

Из дополнительных серологических тестов для ХГВ, протекающего с высокой активностью репликации, характерно также обнаружение антител к HBV-полимеразе и повышение уровня циркулирующих им­мунных комплексов HBeAg-анти-HBe.

ХГВ интегративного типа протекает с персистирующей HBs-анти­генемией разной концентрации при отсутствии HBeAg. В этом случае HBV-ДНК если и выявляется, то в низкой концентрации (менее 50пг/мкл). Закономерно выявляют анти-HBc, большей частью в ста­бильно низких титрах, без тенденции к их нарастанию. Анти-НВс об­наруживают в основном класса G, анти-HBc IgM чаще отсутствуют или выявляются в небольших количествах.