В. органних КУЛЬТУРИ

Одношарові і суспензійн культури складаються з недиференційованих клітин і тому рідко зберігають спектр 'Чутливості до вірусів, характерний для того органу, з якого вони' отримані. Органні культури являють собою шматочки органів ембріона або дорослої тварини, підтримувані in vitro без проліферації клітин і зберігають тому той спектр чутливості до вірусів, який даний орган має in vivo. , З цієї причини органні культури виявляються дуже корисними системами для вивчення in vitro взаємодії між вірусом і чутливими клітинами господаря.

Найбільш великі дослідження з 'використанням різних органних. Культур, отриманих від одного і того ж виду тварин (тхір), описані в повідомленнях Basarab і Smith (1969, 1970), Gould і співавт. (1972), Toms і зі авт. (1974). Органні-культури носових раковин, сечового міхура, матки, трахеї, легенів, кон'юнктиви, яйцевода та стравоходу володіли спадної в цьому порядку чутливістю до вірусу грипу A (H2N2), вирощеному m курячих ембріонах. Тканини травного тракту були нечутливі, за винятком стравоходу і глотки, які могли бути заражені при використанні високої дози зараження. Нечутливими опинилися також м'язова, 'ретикулоендотеліальна тканину, кровоносні судини і нирка. У дослідах, поставлених in vivo, при інтраназальному зараженні вдавалося інфікувати тільки носові раковини, легкі, трахею і стравохід, причому більша частина виявляється вірус містилася в носових раковинах. Сечовий міхур і матка не були інфіковані, хоча, як було показано раніше, органні культури цих тканин чутливі до вірусу в такій же мірі, <як і 'респіраторні тканини. Обидва цих органи можуть-бути інфіковані при прямій урогенітальної інокуляції вірусу (Basarab, Smith, 1970). Зараження урогенітальних тканин вірусом грипу можливо не тільки у тхора. Rostoczy я співавт. (1973) виявили, що вірус грипу типу А здатний розмножуватися і в органної культурі ембріонального ендометрію людини.

Оскільки тканини респіраторного тракту є головним 'місцем розмноження вірусу in vivo, органні культури, отримані з цих тканин, привертали найбільшу увагу дослідників. Фрагменти слизової з війчастим епітелієм, отримані з трахеї і носової порожнини ряду тварин, виявилися здатними підтримувати досить активну реплікацію вірусу грипу; до фрагментів легеневої тканини це стосується меншою мірою. Обговорення використання органних культур для розмноження вірусу і перерахування використаних культур можна знайти в огляді Ноогп і Tyrrell (1969). Методи приготування органних культур описані там же, а також Cherry і Taylor-Robinson (1970).

Дані з оцінки 'ефективності клітин миготливого епітелію для виділення вірусів грипу дуже нечисленні. У тих обмежених дослідженнях, які проводилися в цьому напрямку, не виявлено помітних переваг органної культури трахеї ембріона людини перед первинної культурою нирок макак резусів для виділення вірусів грипу A (Roome et al., 1971) або В (Votava, Tyrrell, 1970). Крім того, культуру трахеї людини важче отримувати і вона менш зручна в обігу, ніж звичайні культури клітин.

Було проведено порівняння органних культур трахеї курячого ембріона з первинною культурою клітин нирки зеленої мавпи для виділення вірусу грипу A (Blascovic et al., 1972b). Приблизно однакова кількість штамів було виділено в кожній системі, так само як в обох системах. Автори запропонували використовувати обидві системи для виділення максимальної кількості штамів. Використання органної культури трахеї курячого ембріона не порівнювати із звичайним зараженням курячих ембріонів, яке незрівнянно простіше.

Оскільки чутливість тканин до вірусів в органних культурах подібна до такої в интактном організмі, по-

лагают, що і дія противірусних речовин повинно бути схожим. Якщо це так, то органні культури повинні виявитися корисними для оцінки дії противірусних препаратів. Тут, однак, є як позитивні, так і негативні сторони. 'З одного боку, фрагмент органу, віддалений з організму, не береться під нормальної фізіологічної регуляції, що може відбитися на ефективності препарату. З іншого боку, концентрація препарату та тривалість контакту можуть краще контролюватися в органних культурах. Tyrrell і співавт. (1965) першими використовували Війчастий епітелій людини в органної культурі для оцінки in vitro дії протигрипозного препарату (амантадин). Herbst-Laier (1970) досліджував широке коло органних культур, включаючи експлантати трахеї мишей, хом'яків, тхорів, щурів, собак, мавп, свиней «телят, а також носових раковин собак і тхорів. З них найбільш придатними для оцінки розмноження (і його придушення) прототипну штамів вірусів типів А і В виявилися органні культури трахеї собак і тхорів. У культурі трахеї собак виявлялися специфічні гістологічні зміни, які автор розглядає як більш надійний критерій оцінки, ніж титр вірусу як такої. Характерні і постійні цитопатична зміни були також виявлені Blascovic і співавт. (1972а) в органних культурах трахеї курячого ембріона, заражених вірусом грипу А (Гонконг/68); це дозволяє вважати, що і дана культура може виявитися корисною.

Використання органних культур миготливого епітелію було запропоновано для визначення спектру господарів знову виділених штамів вірусу грипу A. Schmidt і співавт. (1974) повідомили, що при зараженні таких культур, отриманих з органів курей, коней, тхорів і свиней, вірусами, виділеними 'у. людей, свиней коней і птахів, чутливість культур корелювала з пассированием штаму в тому чи іншому хазяїні в природних умовах.

Органні культури можуть бути використані і для відбору штамів-кандидатів для отримання живих вакцин. Mos-tow і Tyrrell (1973) описали певну кореляцію між-'ду здатністю вірусу знижувати рухливість війок епітелію і пошкоджувати клетмі в органної культурі трахеї ембріона людини і його здатністю викликати захворювання у людей. Ця кореляція, однак, не спостерігалася з органними культурами тхорів і не поширювалася на всі штами вірусів грипу (Нага et al., 1974). Віруси грипу типу В знайшли однакову патогенність для органних культур трахеї людини при різній вірулентності для людей. Тому видається очевидним, що, хоча органні культури мають багато достоїнств для вірусологічних

дослідженні, не можна вважати, що орган, розрізаний на кусачки і підтримуваний поза організмом в штучному середовищі, реагує на інфекцію точно так само, як в интактном організмі.