Картирование по градиенту переноса маркеров

Метод основан на вероятности спонтанного разрыва хромосомы донора во время ее переноса в реципиентную клетку. Отсюда возникает наибольшая вероятность переноса и наследования проксимального маркера (поступающего в реципиент первым), чем дистального. Эта разница в вероятности (градиент) часто используется на практике для определения примерного положения маркеров на хромосоме.

Смесь скрещиваемых бактерий выдерживается длительное время перед высевом на селективную среду (90-100 мин). Селектором при этом методе картирования также должен служить проксимальный маркер, а антиселектором – дистальный. Конъюгационную смесь высевают на селективную среду, а затем исследуют присутствие неселектируемых маркеров в выделенных рекомбинантах. Количество генетических маркеров в клонах рекомбинантов находится в прямой зависимости от точки начала переноса хромосомы.

Пример: скрещивание Hfr Thr+Leu+Azi^sTon^sLac+Gal+Str^s

F- Thr-Leu-Azi^rTon^rLac-Gal-Str^r

селекторы: Thr+Leu+, антиселектор: Str^r

Получены следующие результаты (Жакоб, Вольман, 1962):

Из полученных результатов видно, что порядок генов по отношению к селектируемым thr и leu: azi-ton-lac-gal. Таким же образом можно определить положение на хромосомной карте неизвестного маркера, если в опыте одновременно исследуется градиент переноса ряда маркеров с известной локализацией.