Основные методы лабораторной диагностики воспалительных заболеваний
Помимо общепринятых клинических методов диагностики (клинический анилиз крови и др.), для лабораторной диагностики воспалительного процесса используется широкий спектр разнообразных методов: бактериоскопический, бактериологический, реакция иммунофлуоресценции (РИФ), молекулярно-биологические методы (полимеразная цепная реакция — ПЦР), иммунофер-ментный анализ (ИФА).
Следует помнить, что методы бывают скрининговыми и диагностическими. Скрининговые методы позволяют только предположить наличие инфекционного процесса, но для установления окончательного диагноза необходимо проведение диагностического теста. К скриниговым методам относятся: ИФА, определяющий концентрацию специфических антител или ИЛ воспаления, и в некоторых случаях (хламидийная или вирусная инфекция) — бактериоскопический метод. К диагностическим методам относятся: бактериологический метод и в некоторых случаях — бактериоскопический (для определения острой гонореи, кандидоза, трихомоноза, БВ), РИФ, ПЦР (для определения хлами-диоза, гонореи, вирусной инфекции), ИФА, позволяющий выявить непосредственно антиген возбудителя.
1.5.1.1. Бактериоскопическое исследование
Характер гинекологического мазка остается и в настоящее время основным критерием здоровья женщины. Очень часто врачи, увлекаясь современными высокотехнологическими методами диагностики, пренебрегают этим старым надежным методом исследования, что приводит к искажениям и даже ошибкам диагноза. Бактериоскопия мазка позволяет быстро и без больших материальных затрат выявить у пациентки:
• воспалительную или аллергическую реакцию;
• оценить общую обсемененность влагалища;
• диагностировать такие заболевания, как острая гонорея, трихомоноз, кандидоз, БВ;
• является скринингом для выявления хламидийной и вирусной инфекций.
Следует помнить, что для разных микроорганизмов характерен синергизм с определенным типом эпителия. Например, Chlamidia trachomatis или Neisseria gonorrhea адгезируются преимущественно на цилиндрическом эпителии, a Gar-dnerella vaginalis — на многослойном плоском, поэтому материал для бактерио-скопического исследования необходимо брать из трех анатомических областей: влагалища, цервикального канала и уретры. Учитывая тесную зависимость показателей микробиоценоза от состояния женщины, в направлении на исследование следует указывать диагноз, возраст пациентки и ее физиологическое
66 Глава I
Таблица 1.14 Возможности лабораторной диагностики при исследовании различных анатомических отделов мочеполовой системы женщины при различных методах окраски
Метиленовый синий | По Граму | По Романовскому— Гимзе | ||
Задний свод влагалища | вагиноз | + | + | + |
кандидоз | + | + | + | |
трихомоноз | + | + | + | |
неспецифический вагинит | - | + | - | |
аллергическая реакция | - | - | + | |
Цервикс | трихомоноз | + | + | + |
неспецифический цервицит | - | + | - | |
косвенные признаки хламидийной и/или вирусной инфекций | - | - | + | |
Эндоцервикс | острая гонорея | + | + | + |
косвенные признаки хламидийной и/или вирусной инфекций | - | - | + | |
воспалительная атипия | - | - | + | |
Уретра | воспалительный процесс | + | + | + |
острая гонорея | + | + | + | |
косвенные признаки хламидийной и/или вирусной инфекций | - | - | + |
Примечание: «+» — возможна диагностика, «—» — невозможна диагностика.
состояние (беременность, день менструального цикла, наличие гормональных нарушений), прохождение антибактериальной или гормональной терапии к моменту забора материала. Мазок высушивают на воздухе, фиксируют 96% спиртом (10 мин), смесью Никифорова (спирт и эфир в соотношении 1:1) или ацетоном. В лаборатории мазок окрашивают и исследуют под микроскопом. Возможности и правильность лабораторного исследования во многом зависят от выбора окраски препарата (табл. 1.14).
Для проведения бактериоскопического исследования материал необходимо брать на 2 предметных стекла: одно для окраски по Романовскому—Гимзе, что позволит оценить состояние эпителиальных клеток, провести дифференциальную оценку нейтрофилов, эозинофилов, лимфоцитов и макрофагов; второе
Генитальные инфекции и факторы противоинфекционной защиты в генезе
воспалительных заболеваний женских половых органов 67
окрашивают по Граму для исследования микробного пейзажа. Широкое распространение окраски 0,01% раствором метиленового синего не оправдывает себя, так как не является достаточно информативным.
Среди микроскопических методов можно выделить исследование натив-ных мазков. Этот метод успешно применяется при диагностики трихомоноза, БВ и кандидоза. Исследование проводится в висячей или раздавленной капле. Наличие в ней подвижных трихомонад, клеток плоского эпителия с адгезиро-ванными на них многочисленными микроорганизмами или спор и мицелия дрожжевых грибов дает возможность определить этиологический агент заболевания. Такие исследования лучше проводить с помощью фазово-контрастной или темнопольной микроскопии. Пользуясь темным полем, можно выявить и Treponema pallidum.
Однако возможности диагностики при бактериоскопическом методе для ряда инфекций ограничены. Невозможно на уровне препарата определить вид инфекционного агента. Несмотря на то что при хламидийной или вирусной инфекции появляется ряд характерных цитологических изменений, которые опытный микроскопист может отметить, эти наблюдения являются только скриниговыми и требуют дальнейшего исследования другими методами. Микоплазменная инфекция вообще не приводит к каким-либо видимым под микроскопом изменениям и не может быть диагностирована на уровне бактериоскопии.
1.5.1.2. Бактериологические методы
Бактериологический метод по-прежнему является «золотым стандартом» в диагностике. С этим методом сравнивают специфичность и чувствительность всех других методов лабораторной диагностики. Он основан на способности микроорганизмов размножаться на искусственных средах и позволяет не только выявить возбудитель, определить его концентрацию, но и выяснить чувствительность данного штамма к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антибиотикам определяется методом диффузионных дисков. Для этого предполагаемый инфекционный агент, выделенный в чистую культуру, засевают газоном на чашку с питательной средой и накладывают поверх посева диски, пропитанные соответствующими антибиотиками. Антибиотик диффундирует в агар, препятствуя росту микроорганизма. Чем выше чувствительность возбудителя к данному препарату, тем больше свободная от роста микроорганизма зона вокруг диска. В настоящее время стал очень популярен метод серийных разведений для определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Несмотря на его относительную сложность, его популярность объясняется выпуском коммерческих наборов, которые упрощают процесс постановки и стандартизируют результаты. Для каждого штамма при этом методе берутся две концентрации антибиотика, адсорбированные на специальной плате. Приготовленная на солевом растворе суспензия возбудителя, выделенного в чистую культуру, разносится по плате и инкубируется несколько часов. После инкубации отмечается, какие дозы препарата задерживают рост культуры. Благодаря работе с микродозами возбудителя и малыми объемами результаты можно получить быстрее, чем при помощи диффузионного метода.
При получении результатов посева можно столкнуться с рядом трудностей. Поскольку влагалище является открытым органом, в материал могут попасть случайные микроорганизмы с поверхности кожи промежности. Кроме того, влагалище и цервикс даже при нормальном биоценозе населяют много различных микроорганизмов, из которых очень трудно выбрать реаль-
68 Глава I
ный возбудитель, поэтому бактериологическое исследование необходимо проводить под контролем бактериоскопии мазка, окрашенного по Граму. Наличие больших количеств определенных по морфотипу и грамзависимости микроорганизмов, образующих на эпителии ложноключевые или ключевые клетки, незавершенный фагоцитоз этих возбудителей помогут с выбором конкретного агента.
Различные анатомические зоны мочеполовой системы женщин отличаются как по видовому, так по количественному составу микрофлоры. Наибольшее число аэробных микроорганизмов встречается в преддверии влагащища, а по мере продвижения к цервикальному каналу растет число облигатных анаэробных форм. Полость матки в норме стерильна. В связи с этим необходимо указывать, из какого анатомического отдела взят материал для бактериологического исследования. Результаты посева во многом зависят от качества взятия материала. Перед взятием посева необходимо провести санацию наружных кожных покровов. Забор материала в настоящее время осуществляется в специальные коллекторы, снабженные стерильным тампоном для забора материала и транспортной средой. Для того чтобы избежать попадания в пробу тран-зиторных микроорганизмов, необходимо на бактериологический посев брать пристеночный материал, очистив предварительно влагалище или цервикаль-ный канал от слизистых, гнойных или кровяных выделений. Обычно для* исследований микробиоценоза влагалища берут материал из заднего верхнего свода. При взятии материала из цервикального канала зонд вводят на глубину 1—1,5 см и несколько раз проворачивают вокруг оси так, чтобы обязательно захватить клетки по периметру цервикального канала. При исследовании содержимого полости матки при послеродовых эндометритах или острых саль-пингоофоритах (ОСО) материал берут аспиратором, защищенным дополнительной облочкой, для предотвращения неизбежной контаминации влагалищной и цервикальной флорой. При исследовании поражений мочевой системы делается посев мочи, которую получают путем катетеризации, или используют вторую порцию утренней мочи. В последнем случае необходима предварительная санация наружных половых органов.
Материал, взятый для бактериологического исследования, должен быть как можно скорее доставлен в специализированную бактериологическую лабораторию. Однако в настоящее время появились некоторые «ручные тесты», которые вполне допустимо использовать в обычных клинико-диагностических лабораториях. К таким тестам относятся наборы «Micoplasma DOU» фирмы «BioRad», позволяющие проводить качественное и количественное определение М. hominis и U. urealyticum уже через 48 ч. При необходимости при помощи набора «SIR micoplasma» можно поставить дополнительно чувствительность к 8 антибиотикам методом серийных разведений. Другим примером является набор «Vagicult» (фирма «Pribori Oil»), который позволяет выявить дрожжевые грибы и трихомонадную инфекцию. Работа с этими наборами не требует навыков бактериолога и специального оборудования, поэтому они могут быть использованы в обычных диагностических лабораториях.
Бактериологический метод является незаменимым при инфекциях, вызванных УПМ (урогенитальными микоплазмами, дрожжевыми грибами, Entrobacteriaceae, Streptococcus spp., Staphylococcus spp. и др.), так как только с помощью бактериологического метода можно оценить количество возбудителя. Следует помнить, что все УПМ могут встречаться и у здоровых женщин и проявляют свои патогенные свойства только при значительной концентрации.
гинитальные инфекции и факторы противоинфекционной защиты в генезе
воспалительных заболеваний женских половых органов 69
1.5.1.3. Реакция иммунофлюоресценции
РИФ нашла широкое применение для выявления хламидий и вируса простого герпеса. Однако этот метод пригоден только для обнаружения активных форм вируса и острого хламидиоза. При персистирующем хроническом хлами-диозе или при неактивном вирусе анализ, сделанный этим методом, не информативен. Существуют два типа РИФ - прямая (ПИФ) и непрямая (НИФ) иммунолюминесценция. В первом случае индикаторная метка, которой служит чаще всего изотиоционат флюоресцеина (ФИТЦ), пришивается к антителам против антигена клеточной стенки (липополисахарида — ЛИС или белка) возбудителя, во втором реакция идет «сэндвич-методом». При использовании НИФ на исследуемый материал наслаивают антитела против возбудителя, полученные в основном путем иммунизации животных, а затем обрабатывают антителами, меченными ФИТЦ, против соответствующего вида животных. После проведения реакции антиген—антитело инфекционный агент выявляется с помощью люминесцентной микроскопии. ФИТЦ обеспечивает инфекционному агенту яркое яблочно-зеленое свечение под микроскопом. Для контрастирования в набор входит синька Эванса или родамин, окрашивающий эпителиальные клетки и лейкоциты в красный цвет.
Для этого метода также очень важен правильный забор материала. Материал для исследования берут только из цервикального канала или уретры. Материал из влагалища в диагностике хламидийной инфекции использовать нельзя. При взятии материала из цервикального канала предварительно удаляют слизистую пробку и обрабатывают шейку матки стерильным физиологическим раствором. Для забора материала используют специальные зонды, изготовленные из материалов с повышенными сорбционными свойствами (дакроновые зонды) или снабженные специальными ворсинками (например, зонды «Med-scan», Швейцария). Зонд вводят на глубину 0,5—1,5 см и берут пристеночный материал. При извлечении зонда из цервикального канала необходимо полностью исключить его касание со стенками влагалища. При наличии эктопии шейки матки материал берут зондом с границы здоровой и измененной ткани. При наличии вирусных папул материал лучше брать со дна папулы. Для этого ее осторожно вскрывают. При взятии материала из уретры пациентка должна избегать мочеиспускания в течение 1,5—2 ч для предотвращения смыва пораженных клеток. Для диагностики можно использовать биопсийный материал (эндометрий) и материалы, полученные при лапароскопии или лапаротомии. Следует помнить, что кровь, большое количество слизи, гнойные выделения мешают установлению правильного диагноза, приводя как к ложноположи-тельным, так и к ложноотрицательным результатам.
Полученный материал помещают на предметное стекло в виде мазка-отпечатка (следует особо обратить внимание на то, что при нанесении материала тампон или щеточка должны прокатываться по стеклу). Препарат должен быть Доставлен в лабораторию в день взятия материала или после высушивания зафиксирован. Фиксацию проводят 96% спиртом в течение 10 мин или холодным ацетоном — 1—2 мин. Зафиксированные препараты можно хранить в бытовом холодильнике в течение 3 дней.
Чувствительность РИФ для диагностики Chlamidia trachomatis и вируса простого герпеса (ВПГ) составляет 90—100%, специфичность при исследовании препаратов из урогенитального тракта — от 65 до 97% в зависимости от качества используемого набора. Большое преимущество этого метода состоит в том, что кроме люминесцентного микроскопа он не требует никакого оборудования, что делает его очень удобным для небольших лабораторий.
70 Глава I
Следует особо обратить внимание на то, что этот метод не позволяет провести количественную оценку возбудителя, поэтому использовать его для выявления УПМ (например, урогенитальных микоплазм) не рекомендуется.
1.5.1.4. Молекулярно-биологические методы
Эти методы основаны на определении специфических для инфекционного агента последовательностей ДНК или РНК. Основной принцип метода заключается в многократном копировании (амплификации) искомых участков ДНК при участии термостабильной полимеразы. В результате этого получают большое количество гомологичных участков ДНК, специфических для данного возбудителя (амплификонов). Метод называется ПЦР. Учет конечных результатов при ПЦР оценивается с помощью электрофореза или ИФА. Этот метод так же, как и РИФ, пригоден только для выявления активных форм вируса и острого хламидиоза. Диагностировать с его помощью вирусоносительство или персистирующий хламидиоз нельзя, однако он незаменим при диагностике хронической гонореи, вызванной L-формой, когда N. gonorrhoeae окрашивается по Граму атипично (грамположительно), а иногда практически отсутствует в мазке.
Правила забора материала для анализа методом ПЦР не отличаются от таковых при РИФ. Материал может храниться в холодильнике в транспортной среде при 4—6°С не более 3 дней, а образцы мочи должны быть доставлены в лабораторию в течение 24 ч после их получения. При необходимости допустимо сохранять материал в течение 1 мес. при температуре — 20°С. Чувствительность этого метода составляет 80—100%.
По поводу диагностической ценности ПЦР идут бесконечные споры. К безусловным достоинствам метода относятся облегчение работы врача (берется одна проба на все исследования), относительно быстрое получение результата (12—24 ч), относительно невысокая цена расходных материалов. Недостатками являются высокая стоимость оборудования, необходимость специальных помещений, большой риск загрязнений между образцами и продуктами амплификации. Следует особо отметить, что при интерпретации результатов ПЦР необходима определенная осторожность, так как этот метод выявляет только небольшую часть генома микроорганизма, что не является критерием жизнеспособности возбудителя. Например, хламидийная ДНК может продолжать выявляться в течение 1 мес. после окончания лечения антибиотиками. Кроме того, метод ПЦР позволяет провести только качественную оценку без определения количества возбудителя, поэтому результаты анализов на УПМ (дрожжевые грибы, гарднереллы, урогенитальные микоплазмы) носят характер скрининга и требуют дальнейшей проверки.
В настоящее время появилась система IQ5 («BioRad»), позволяющая в значительной степени преодолеть трудности, связанные с ПЦР. Отличие этой системы заключается прежде всего в том, что используемые в работе амплификоны имеют флюоресцентную метку. Амплификатор снабжен оптическим модулем, позволяющим считывать интенсивность свечения в процессе амплификации ДНК возбудителя. По мере накопления продуктов реакции происходит увеличение флюоресцентного сигнала. Динамика изменения интенсивности свечения зависит от начального количества ДНК-мишеней. Таким образом, появляется возможность не только выявить возбудитель, но и провести его полуколичественную оценку. Следовательно, эту систему можно использовать для выявления УПМ. Кроме того, 1Q5 позволяет проводить в одной пробирке одновременно несколько реакций с разными флюорофорами (люминесцентными красителями). Таким обра-
генитальные инфекции и факторы противоинфекционной защиты в генезе
воспалительных заболеваний женских половых органов 71
зом, не только снижается риск контаминации образцов при их обработке, экономится время проведения исследования, но и сокращаются производственные плошади, необходимые обычно для проведения ПЦР. К единственному недостатку этой системы можно отнести ее относительно высокую стоимость.
1.5.1.5. Иммуноферментный анализ
ИФА основан на взаимодействии специфического антигена с антителом с последующим выявлением образовавшихся в результате этой реакции комплексов с помощью цветной биохимической реакции. В качестве выявляющей метки используют пероксидазу хрена или З-З'-диаминобензидинтетрагидро-хлорид. Для учета результатов лаборатория должна быть оснащена специальным прибором — ридером.
ИФА может быть диагностическим (с выявлением антигена) или скринин-говым (определение специфических антител). Диагностические ИФА разработаны только для выявления Chlamydia trachomatis. Выявление специфических антител проводится при вирусных и хламидийной инфекциях.
Выявление антигена хламидий проводят чаще методом твердофазного ИФА. Материал для этого исследования забирают тампоном в специальные транспортные пробирки, которые поставляются производителями наборов, и доставляют в лабораторию. При взятии материала имеют значение все правила и ограничения, принятые для ПИФ или ПЦР. Хранят материал при температуре 4—6°С не более 48 ч. Такие наборы, как «Chlamydiasyme Diagnostic Kit», производит фирма «Abbott Lab», «Syva Microtrak EIA» — «Syva», «Chlamydia Ag EIA» — «Labsystems» и др. Результаты анализа во многом зависят от качества забора материала и от состояния больной. У женщин с выраженной клинической картиной чувствительность метода составляет 88—100%, однако при бессимптомных заболеваниях чувствительность не превышает 40%.
Определение специфических антител проводится в сыворотке крови. Этот метод очень удобен, так как позволяет провести объективную оценку результатов. Однако постановка диагноза на основании этого метода возможна только в случае выявления антител класса IgM. Они отображают начальную фазу заболевания. В случае обнаружения других классов анител (IgA и IgG) диагноз желательно подтвердить любым другим диагностическим тестом (ПИФ, ПЦР и др). Наиболее корректно использовать определение антител в динамике, так как это позволяет оценить ход течения заболевания и эффективность проводимой терапии. Чувствительность и специфичность метода во многом зависят от фирмы-изготовителя. Для того чтобы избежать получения ложноположитель-ных и ложноотрицательных результатов необходимо при исследовании использовать парные сыворотки.
При хламидийной инфекции IgM выявляются уже на 5-й день после заражения, пик их концентрации наблюдается через 1—2 нед. Через 2—3 мес. после инфицирования, даже без проведения какого-либо лечения, они перестают вырабатываться и выявить их в крови уже невозможно. Однако в этот период мало кто из больных обращается за врачебной помощью. Более того, при реин-фекции хламидиями не наблюдается повышения концентрации IgM, поэтому выявление Ig этого класса имеет очень ограниченное применение при диагностике хламидийной инфекции.
IgA в сыворотке появляются через 10—14 дней после заражения. Уровень их в случае успешного лечения обычно снижается через 2—4 мес. Если в результате терапии концентрация IgA не снижается, то это указывает на хронизацию процесса. При реинфекции концентрация IgA нарастает вновь. Именно они
72 Глава I
Таблица 1.15 Интерпретация результатов (ИФА) выявления специфических антител к хламидийному антигену(Лобзин Ю.В. и др., 2004)
Классы антител | Интерпретация результатов исследования | |
IgG | IgA | |
- | - | Отрицательный результат. Возможно, анализ взят слишком рано после инфицирования. В подозрительных случаях повторить исследование через 2—3 нед. |
+ | + | Свидетельствует о перенесенной или протекающей латентно инфекции |
+ | - | Состояние иммунитета. Свидетельствует о перенесенной инфекции |
+ | + | Повторить анализ через 14—21 день, в случае аналогичного повторного результата его расценивают как отрицательный |
+ | + | Указывает на острую форму заболевания или обострение хронической инфекции |
- | + | Свидетельствует о наличии острой или подострой инфекции |
являются основным маркером как острой, так и хронической и персистирую-щей форм хламидиоза.
IgG появляются параллельно или с небольшой задержкой по сравнению с IgM и IgA. Их титр обычно выявляется на 15—20-й день после начала заболевания и остается относительно высоким довольно долгое время. Хламидийные IgG выявляются в организме в течение более 1 года после излечения, поэтому большой ошибкой является оценка состояния больного на основании концентрации в крови Ig только этого класса. При реинфекции обычно наблюдается увеличение уровня IgG в 4 и более раз при обязательном повышении уровня IgA. Интерпретация результатов определения специфических антител при хла-мидийной инфекции приведена в таблице 1.15.
Несколько иное значение имеют Ig разных классов при TORCH-инфекции. TORCH-инфекции (или трансплацентарные) — это комплекс возбудителей, которые способны проникать через плаценту, вызывая у новорожденных сходные по клинической картине поражения. К этим инфекциям относятся токсо-плазмоз (ТО), краснуха (rubella — R), цитомегаловирус (С) и вирус простого герпеса (Н). При TORCH-инфекции так же, как и при хламидийной, происходит повышение концентрации специфических IgM. Через некоторое время нарастает уровень IgG. Так, при вирусном инфицировании увеличение IgG наблюдается только через 1—3 мес. Выявление IgA в диагностике вирусных инфекций обычно не используется, так как оно малоинформативно. Обнаружение только IgM при отсутствии IgG свидетельствует об острой первичной инфекции, повышенное содержание Ig обоих типов — об обострении инфекции. Выявление только одного IgG при отсутствии IgM характеризует состояние иммунитета и доказывает, что у пациентки был контакт с данным антигеном. Постановка диагноза на основании только IgG ведет к многочисленным ошибкам. В таблице 1.16 приведена интерпретация результатов, полученных методом ИФА, для различных возбудителей TORCH-инфекции (Айлама-зянЭ.К. идр.,2004).
В настоящее время большинство коммерческих наборов, используемых в практике, позволяют выявлять только вирусспецифические антитела класса IgG. Более того, в основном наборы, выявляющие специфические антитела к герпетической инфекции, являются только видоспецифическими, т.е. определяют суммарно антитела к ВПГ I и ВПГ II. Поскольку ВПГ I инфицировано 90% населения Земли, то естественно, что антитела часто могут присутство-
Генитальные инфекции и факторы противоинфекционной защиты в генезе
воспалительных заболеваний женских половых органов 73
Таблица 1.16 Интерпретация результатов (ИФА) выявления специфических антител к TORCH-инфекции(Айламазян Э.К. и др., 2004)
Классы | антител | Интерпретация результатов исследования |
IgG | IgA | |
- | Группа риска. Нет иммунитета. Опасность возникновения инфекции | |
+ | - | Состояние иммунитета |
+ | + | Острая инфекция, обострение хронической болезни или заболевание в развитии |
- | + | Ранняя фаза острой инфекции |
Таблица 1.17 Индекс авидности IgG при TORCH-инфекции у беременных женщин
(Айламазян Э.К. и др., 2004)
Инфекция | Острая, первичная инфекция | Стадия реконвалесценции | Носительство или инфекция в прошлом |
Цитомегалия | 35% и ниже | 36-41% Повторное исследование через 7—10 дней | 42% и выше |
Герпес | 35% и ниже | 36-40% Повторное исследование через 7—10 дней | 41% и выше |
Токсоплазмоз, краснуха | 30% и ниже | 31-39% Повторное исследование через 7—10 дней | 40% и выше |
вать в крови здоровых женщин. С другой стороны, достаточно часто встречаются бессимптомные вирусоносители, у которых активация вируса происходит только в период беременности, поэтому при отсутствии соответствующих диагностикумов, позволяющих выявить специфические антитела IgM, необходимо провести женщинам группы риска как минимум 2 повторных теста с 2—3-недельным промежутком с учетом нарастания титра IgG. Увеличение концентрации этих Ig в 4 и более раз — характерный признак первичной инфекции (Макацария А.Д., Долгушина Н.В., 2002). В этой ситуации особенно важно подтвердить диагноз любым диагностическим тестом (например, ПЦР или ПИФ).
Другим способом установления первичности заболевания является определение авидности IgG. Авидностью называется сродство антигена к антителу и прочность образующегося комплекса. По мере увеличения срока инфицирования степень авидности возрастает. Оценка степени авидности различных возбудителей TORCH-инфекции приведена в таблице 1.17.
Из сказанного становится очевидным, что «идеальной», «абсолютной» диагностики не существует. Каждый метод обладает определенными возможностями и имеет определенные ограничения. Возможны ошибки при любом избранном методе исследования, поэтому оптимальным вариантом является единовременное использование нескольких методов, один из которых может быть скрининговым, а другой — диагностическим. Например, при хламидийной или вирусных инфекциях лучше сочетать метод ПЦР (или ПИФ) с ИФА, позволяющим выявить специфические антитела.
74 Глава I
Необходимо особо подчеркнуть, что при диагностике УПМ применение бактериоскопического или культурального исследования дает наиболее адекватные результаты. Столь широко распрастраненное в настоящее время применение ПЦР при определении УПМ неизбежно ведет к гипердиагностике. Этот метод в данной ситуации можно расценивать только как скрининговый. Полученные результаты при этих инфекциях необходимо подтверждать бакте-риоскопическим или культуральным исследованиями.
Особое внимание следует обратить на то, что качество результатов находится в прямой зависимости от выбора фирмы-изготовителя расходных материалов при любом методе диагностики, поэтому не следует пользоваться непроверенными, нелицензированными наборами, несмотря на их безусловно привлекательную низкую цену.
Следует помнить, что результаты любого исследования зависят от качества получения материала. Тесная связь врача-клинициста с клинико-диагностической лабораторией, безусловно, приносит обоюдную пользу и помогает избежать многих ошибок.
Дата добавления: 2014-12-16; просмотров: 2524;