Качественная реакция на амилазу слюны

Цель занятия:Изучить ферментный состав слюны и проделать качественную реакцию на амилазу слюны.

Теория вопроса:

Среди ферментов слюны преобладает α-амилаза (КФ 3.2.1.1.). она составляет более 15% от всех ферментов слюны. Слюнная амилаза близка по строению к панкреатической, но кодируется другим геномом. α-амилаза состоит из одной полипептидной цепи, активизируется ионами хлора и стабилизируется кальцием. Оптимум действия амилазы слюны при рН 6,8 - 7.0. Фермент α-амилаза относится к эндоамилазам. действует на 1,4 – гликозидные связи крахмала.

Определение активности амилазы в крови и моче имеет диагностическое значение в первую очередь при остром панкреатите или закупорке выводящего протока поджелудочной железы, что приводит к повышению активности фермента амилазы в крови.

Метод определения активности амилазы слюны основан на способности фермента гидролизовать крахмал до мальтозы и глюкозы.

Ход работы:

В пробирку с воронкой собирают слюну. В одну пробирку добавляют 1 0 капель слюны, во вторую - столько же капель воды. Обе пробирки помещают в водяную баню при температуре 37 ⁰С на 10 минут. Затем добавляют в обе пробирки по 10 капель 0,1% раствора крахмала. Через 5 минут добавляют в обе пробирки по 5 капель реактива Люголя. В первой пробирке жидкость окрашивается в желтый цвет, во второй пробирке, где слюна отсутствует – содержимое пробирки окрашивается в синий цвет.

Контрольные вопросы:

1 .Характеристика ферментов слюны;

2. Написать реакцию гидролиза крахмала под действием амилазы слюны;

3. Принцип метода определения амилазы.

Тесты: 11,20,89,99

Литература: 9,10,22,34