Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны.

Цель занятия: изучить ингибиторы и активаторы ферментов.

Опытным путем установить влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны.

Теория вопроса. Амилаза слюны относится к классу гидролаз, расщепляет α-1,4-гликозидные связи в молекулах крахмала и гликогена. Продуктами расщеп­ления названных полисахаридов являются декстрины и небольшое количество мальтозы, глюкозы. Исследование химической структуры амилазы слюны показало её идентичность структуре амилазы панкреатического происхождения. Хлориды, йодиды, цианиды повышают активность амилазы слюны, при этом наибольшим активирующим эффектом обладают ионы хлора. Ингибиторами могут быть неорганические соли, различные метаболиты. Изучение влияния на активность ферментов различных веществ имеет большое практическое значение, а также очень важно для понимания механизма действия ферментов.

Ход работы: 1. В одну пробирку вносят 10 капель дистиллированной воды, во вторую - 8 капель воды и 2 капли 1% раствора хлорида натрия, а в третью - 8 капель воды и 2 капли раствора сульфата меди (II).

2. В каждую пробирку добавляют по 20 капель разведенной (1:10) слюны, содержимое пробирки перемешивают, добавляют по 5 капель раствора крахмала и оставляют стоять при комнатной температуре 5 минут.

3. Тем временем, готовят три пробирки с водой (по 1 мл в каждой), подкрашенной каплей раствора йода, и добавляют в них по 2-3 капли содержимого опытных проб. Наблюдают окрашивание в зависимости от степени расщепления крахмала амилазой. В первой пробирке появляется фиолетовая или красно-бурая окраска, во второй пробирке, где ионы хлора играют роль активатора, появляется желтая окраска, а в третьей пробирке, где ионы меди тормозят действие амилазы, окраска синяя.

Контрольные вопросы:

1. К какому классу ферментов относится амилаза?

2. Назвать типы ингибирования, привести примеры.

Тесты: 11,15,20,88,89

Литература: 1,3,5,9,13.

IV. Тема: Ферменты слюны.

1. Влияние физических нагрузок на активную реакцию слюны.

Цель занятия: опытным путем установить влияние рН на активность амилазы слюны в норме и при выполнении физических нагрузок.

Теория вопроса. Одним из главных естественных регуляторов биохимических процессов в полости рта является рН среды. При выполнении физических нагрузок, заболеваниях, сопровождающихся недостаточным обеспечением организма кислородом, интенсивно протекают процессы гликолиза. Нагрузки высокой интенсивности способствуют активации гликолиза, а следовательно, и резкому повышению уровня молочной кислоты в крови, что приводит к уменьшению щелочного резерва крови. Однако в связи с тем, что буферность крови достаточно велика, существенных изменений рН крови обычно не происходит; ацидоз остается компенсированным. Иное наблюдается в биологических жидкостях (моча, слюна), обладающих меньшей буферностью, чем кровь: величина рН в них несколько уменьшается. Таким образом, изменение кислотности мочи и слюны может также характеризировать реакцию организма на физические нагрузки, отражая в известной степени процессы, происходящие в работающих мышцах и в крови. Считается, что снижение рН слюны является также прогностическим симптомом кариеса зубов.

Ход работы.

Двум или четырем испытуемым предлагают тщательно прополоскать рот. Каждому из них дают 20 мл дистиллированной воды, (надо тщательно размешать ее языком в течение трех минут). Полученные пробы выливают в стаканчик с цифрой № 1 (покой). Второй группе, из двух или четырех испытуемых, предлагают бежать на месте максимально возможным темпом в течение 1 минуты. По окончанию бега собрать пробы слюны в стаканчик с цифрой №2.

В обеих пробах определяют рН слюны с помощью универсального индикатора. Для этого смачивают полоску индикаторной бумаги испытуемой слюной. Сравнивают эту полоску со стандартом. На предлагаемой индикаторной шкале определяем рН с точностью до 0,5 рН.

Контрольные вопросы:

1.Ферменты слюны, биологическая функция.

2.Ферментные препараты в стоматологии.

3. Повторить ранее изученный учебный материал по превращения глюкозы до молочной кислоты в анаэробных условиях.

Тесты: 15,25,59,66,73,75,81.

Литература: 17,31,32,36.

V. Тема: Органические компоненты слюны.