Реакции обнаружении синильной кислоты

Первые порции дистиллята собирают в раствор щелочи для связывания летучей кислоты синильной и образования натрия цианида.

HCN + NaOH → NaCN + Н₂О

1. Реакция с пиридинбензидиновым реактивом

Рис.2. Прибор для микродиффузии: 1 – толстостенный сосуд; 2 – внутренний сосуд; 3 – внутренняя круглая камера; 4 – наружная камера; 5 - крышка

В наружную камеру (4) прибора для микродиффузии вносят 2-4 мл крови или мочи, 1 г гомогената ткани. Затем в ту же камеру вносят 3-4 капли 10% раствора кислоты серной. Во внутреннюю камеру (3) прибора вносят 3,3 мл 0,1 М раствора натра едкого. Прибор плотно закрывают крышкой (5) и оставляют на 3-4 ч при комнатной температуре. Затем из внутренней камеры прибора берут 1 мл жидкости, к которой прибавляют 1 мл 0,1 М раствора натра едкого, 2 мл 1 М раствора натрия фосфата двузамещенного и 1 мл 0,25% раствора хлорамина Т. Жидкость взбалтывают и через 2-3 мин прибавляют 3 мл реактива, содержащего кислоту барбитуровую и пиридина. Смесь перемешивают и остав­ляют на 10 мин. Появление красной окраски указывает на наличие цианидов в исследуемой жидкости.

2. Образование берлинской лазури

К 1 мл дистиллята прибавляют 1-4 капли разбавленного раствора железа сульфата (II) и такой же объем разбавленного раствора железа хлорида (III). Смесь хорошо перемешивают и нагревают на пламени газовой горелки почти до кипе­ния, а затем охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 10% раствор кислоты хлористоводородной до слабокислой реакции на лакмус. Появление си­него осадка или синего окрашивания указывает на наличие кислоты синильной (цианидов) в дистилляте. При малых количествах кислоты синильной в растворах синяя окраска появляется только через 24-48 ч. При длительном отсут­ствии синего осадка к смеси прибавляют 5% раствор бария хлорида. При этом выпадает осадок бария сульфата и происходит соосаждение берлинской лазури.

2NaCN + FeSO₄ → Fe(CN)₂ + Na₂SO₄

4NaCN + Fe(CN)₂ → Na₄[Fe(CN)₆]₃ ^. 3 NaCl

Na₄[Fe (CN )₆] + FeCl₃ → NaFe[Fe(CN)₆]₃ ×3 NaCl

Количественное определение: для количественного определения изоли­рование кислоты синильной проводят из отдельной навески биологического ма­териала, как описано выше.

Объемный метод определения применяют при исследовании свежего биологического материала, а также для других объектов. Дистиллят собирают в

несколько приемников, содержащих определенное количество 0,1 М (0,01 М при малых количествах кислоты синильной) титрованного раствора серебра нитрата. Избыток серебра нитрата оттитровывают 0,1 М (или 0,01М) раствором аммония тиоцианата в присутствии индикатора железоаммонийные квасцы.

Весовой метод кислоты синильной применяют количественного определения в случае исследования несвежего биологического материала. Сероводород, образующийся в объекте исследования в результате процессов гниения, будет реагировать с серебра нитратом, образовывать серебра сульфид, искажая результаты. Дистиллят собирают в несколько приемников, содержащих опреде­ленное количество 0,2% раствора серебра нитрата. Дистиллят подкисляют кис­лотой азотной до кислой реакции среды. Выделившейся осадок серебра циани­да с возможной примесью серебра сульфида отфильтровывают и прямо на фильтре обрабатывают 5-6 мл 25% раствора аммония гидроксида для растворения серебра цианида. Фильтрат подкисляют избыточным количеством 6 М раствора кислоты азотной, и выделившийся осадок серебра цианида вновь отфильтровывают, промывают водой очищенной и сушат вместе с фильтром. Фильтр затем сжигают и осадок прокаливают во взвешенном фарфоровом тигле до постоянного веса. Остаток металлического серебра взвешивают и пересчи­тывают на кислоту синильную.