Анализаторы для иммунологических исследований

При прохождении белого света с интенсивностью I через прозрач­ный стеклянный сосуд, заполненный раствором, происходит ослабле­ние этого света. Выходящий свет будет иметь меньшую интенсивность I. Ослабление светового потока связано с поглощением световой энергии раствором, отражением света от границ раздела воздух-стекло, стек­ло-раствор, рассеянием света мельчайшими взвешенными частицами.

Интенсивность прошедшего света можно выразить следующим уравнением:

В практике аналитической химии и биохи­мии не определяют абсолютные фотометри­ческие величины I исследуемого раствора, а измеряют их по отношению к фотометрическим величинам другого раствора сравнения (стандарта, холостой про­бы) с известными параметрами и налитого в точно такой же сосуд, как и исследуемый раствор.

Интенсивность окраски в колориметрии выражают величиной оп­тической плотности D.

Связь между интенсивностями падающего светового потока и светового потока , прошедшего через окрашенный раствор, устанав­ливается законом Бугера-Ламберта.

Согласно этому закону однородные слои одного и того же вещества одинаковой толщины поглощают одну и ту же долю падающей на них световой энергии. Оптическая плотность вещества прямо пропор­циональна толщине поглощающего слоя.

При прохождении света че­рез газы и растворы степень поглощения вещества зависит от числа частиц в единице объема, то есть оптическая плотность зависит от концентрации вещества:

,

где k — показатель поглощения — постоянная величина, характер­ная для растворов вещества (для света определенной длины волны); l— толщина слоя; С— концентрация вещества.

Окраска раствора обусловлена неодинаковым поглощением моле­кулами растворенного вещества оптических колебаний разных длин волн. Цвет раствора определяется длиной вол­ны , соответствующей максимуму светопоглощения. Интенсив­ность окраски определяется степенью поглощения, а «чистота» — шириной «пика» спектральной кривой поглощения.