ПРАВИЛА ПОЛЬЗОВАНИЯ ФАРМАКОПЕЙНЫМИ СТАТЬЯМИ 9 страница

2. При наличии в растворе высокомолекулярного вещества за его молярную массу берется средняя молекулярная масса фракции.

3. Гидрокарбонаты при расчете осмолярности учитываются как соли одноосновной кислоты.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСМОЛЯРНОСТИ ВОДНЫХ РАСТВОРОВ

(ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОСМОЛЯРНОСТЬ)

Для практического определения осмолярности могут быть использованы три метода: криоскопический, мембранная и паровая осмометрия.

1 осмоль на килограмм воды понижает точку замерзания на 1,86 град. C и понижает давление пара на 0,3 мм рт. ст. при температуре 25 град. C. Измерение этих изменений лежит в основе криоскопического метода и метода паровой осмометрии.

1. Криоскопический метод

Метод основан на понижении точки замерзания растворов по сравнению с точкой замерзания чистого растворителя. Данный метод нашел самое широкое практическое применение как достаточно универсальный и точный.

1. Определение осмолярности с использованием термометра Бекмана. Определение температуры замерзания проводят на установке, изображенной на рис. 13.1. (не приводится). Установка состоит из сосуда А диаметром 30-35 мм и длиной около 200 мм, куда помещается испытуемый раствор (или растворитель); верхняя часть сосуда расширена и закрывается пробкой с двумя отверстиями для погружения термометра Б и мешалки В; сосуд А вставлен в более широкую емкость (Г) так, что не касается ее стенок или дна; термометр также не должен касаться стенок или дна сосуда А; уровень охлаждающей смеси в емкости Г должен быть не ниже уровня испытуемого раствора в сосуде А. При проведении эксперимента раствор (или растворитель) должен прикрывать основной ртутный резервуар термометра. Температура охлаждающей смеси должна быть на 3-5 град. C ниже температуры замерзания растворителя (для бидистиллированной воды: от минус 3 до минус 5 град. C); контроль минусовой температуры осуществляется минусовым термометром Д с ценой деления 0,5 град. C. Состав охладительной смеси: лед + натрия хлорид кристаллический. Установку термометра Бекмана на криометрические исследования производят путем подбора количества ртути в основном резервуаре так, чтобы при замерзании чистого растворителя (бидистиллированной воды) мениск ртути в капилляре находился у верхней части шкалы измерения. При этом возможна регистрация ожидаемого понижения температуры замерзания водного раствора.

Рис. 13.1. Устройство прибора Бекмана

Рисунок не приводится.

Методика. Для определения температуры замерзания чистого растворителя пользуются следующим приемом: дают жидкости переохладиться (охлаждают без перемешивания), и когда термометр показывает температуру на 0,2-0,3 град. C ниже ожидаемой точки замерзания, перемешиванием вызывают выпадение кристаллов растворителя; при этом жидкость нагревается до точки замерзания. Максимальную температуру (средний результат трех измерений, отличающихся не более чем на 0,01 град. C), которую показывает термометр после начала выпадения кристаллов, регистрируют как температуру замерзания растворителя (T1).

В высушенный сосуд А наливают достаточное количество испытуемого водного раствора; определение точки замерзания проводят, как описано выше для чистого растворителя; средний результат трех опытов регистрируют как температуру замерзания испытуемого раствора лекарственного вещества (T2).

Осмолярность раствора рассчитывают по формуле:

(T2 - T1)

C = --------- x 1000 (мОсм/кг), (4)

осм. K

где: T2 - температура замерзания чистого растворителя, градусы Цельсия;

T1 - температура замерзания испытуемого раствора, градусы Цельсия (град. C);

K - криометрическая постоянная растворителя (для воды: 1,86).

2. Определение осмолярности растворов с использованием автоматического криоскопического осмометра. Данный вариант предусматривает применение автоматических осмометров, например, МТ-2, МТ-4 (производитель НПП "Буревестник", Санкт-Петербург). Испытуемый раствор (обычно 0,2 мл) помещают в стеклянный сосуд, погруженный в ванну с контролируемой температурой. Термопару и вибратор помещают под испытуемым раствором; температуру в ванной снижают до переохлаждения раствора. Включают вибратор и вызывают кристаллизацию воды в испытуемом растворе; выделившееся тепло поднимает температуру раствора до точки замерзания. По зафиксированной точке замерзания раствора рассчитывают осмолярность. Прибор калибруют с помощью стандартных растворов натрия или калия хлорида, которые перекрывают определяемый диапазон осмолярности (табл. 13.1).

Таблица 13.1

Стандартные справочные значения понижения

температуры замерзания и эффективности осмотической

концентрации водных растворов хлоридов натрия и калия

┌───────────────────────┬───────────────────────┬─────────────────────────┐

│ Аналитическая │ Понижение температуры │ Эффективная │

│ концентрация соли │ замерзания │ (осмотическая) │

│ ро, г/кг H2O │ дельта T , K │ концентрация m , │

│ │ зам │ эф │

│ │ │ ммоль/кг H2O │

├───────────────────────┴───────────────────────┴─────────────────────────┤

│ Растворы натрия хлорида │

├───────────────────────┬───────────────────────┬─────────────────────────┤

│ 5,649 │ 0,3348 │ 180 │

├───────────────────────┼───────────────────────┼─────────────────────────┤

│ 6,290 │ 0,3720 │ 200 │

│ 9,188 │ 0,5394 │ 290 │

│ 9,511 │ 0,5580 │ 300 │

│ 11,13 │ 0,6510 │ 350 │

│ 12,75 │ 0,7440 │ 400 │

│ 16,00 │ 0,930 │ 500 │

│ Растворы калия хлорида │

│ 7,253 │ 0,3348 │ 180 │

│ 8,081 │ 0,3720 │ 200 │

│ 11,83 │ 0,5394 │ 290 │

│ 12,25 │ 0,5580 │ 300 │

│ 14,78 │ 0,6696 │ 360 │

│ 20,71 │ 0,930 │ 500 │

└───────────────────────┴───────────────────────┴─────────────────────────┘

2. Метод мембранной осмометрии

Метод основан на использовании свойств полупроницаемых мембран избирательно пропускать молекулы веществ.

Движущей силой процесса является процесс осмоса. Растворитель проникает в испытуемый раствор до установления равновесия; возникающее при этом дополнительное гидростатическое давление приближенно равно осмотическому давлению и может быть рассчитано по формуле:

Пи ~= P = ро x g x дельта h, (5)

осм. гидр.

где:

пи - осмотическое давление;

осм.

P - гидростатическое давление;

гидр.

ро - плотность жидкости;

g - ускорение свободного падения;

дельта h - высота столба жидкости.

Осмолярность может быть рассчитана по формуле:

C = пи /R x T, (6)

осм. осм.

где: R - универсальная газовая постоянная (8,314 Дж/мольK);

T - абсолютная температура, Кельвин.

Примечание. Данный метод применим только для растворов

4 6

высокомолекулярных веществ (10 - 10 г/моль). При анализе растворов,

содержащих электролиты и другие низкомолекулярные вещества, будет

определяться только осмотическое давление, создаваемое высокомолекулярными

компонентами раствора.

Методика. Испытуемый раствор с помощью шприца (рис. 13.2 - не приводится) с длинной иглой вносят в специальное отверстие измерительной ячейки. Калибровку проводят с помощью устройства, находящегося в приборе. Проводят не менее трех измерений. Для получения воспроизводимых результатов необходима проба объемом не менее 1,2 мл.

Рис. 13.2. Устройство мембранного осмометра

Рисунок не приводится.

3. Метод паровой осмометрии

Метод основан на измерении разности температур термисторами (чувствительными к температуре сопротивлениями) вследствие различия между давлением пара над раствором вещества и чистым растворителем. При нанесении на оба термистора капли растворителя разность температур равна нулю. Если одну из капель заменяют каплей испытуемого раствора, то на поверхности этого термистора происходит конденсация паров растворителя, так как давление пара растворителя над этой поверхностью меньше. При этом температура капли раствора повышается за счет экзотермического процесса конденсации до тех пор, пока давление пара над каплей раствора и давление чистого растворителя в ячейке не сравняются. Наблюдаемая разница температур измеряется. Разность температур практически пропорциональна моляльной концентрации раствора.

Методика. В предварительно термостатированную при температуре не ниже 25 град. C и насыщенную парами растворителя (воды) ячейку на оба термистора наносят по капле воды (рис. 13.3 - не приводится).

Рис. 13.3. Устройство парового осмометра

Рисунок не приводится.

Полученные показания прибора фиксируют. Далее проводят калибровку прибора по эталонным растворам нескольких концентраций. Перед каждым измерением один из термисторов промывают чистым растворителем и наносят каплю раствора. Объемы наносимых капель раствора и чистого растворителя должны быть одинаковы; объемы капель калибровочных растворов также должны быть равны.

По результатам калибровки строится график зависимости разницы температур от осмоляльности. Нулевая точка - показания прибора по чистому растворителю. Далее проводят анализ испытуемых растворов. Осмоляльность находят по калибровочному графику.

14. ИОНОМЕТРИЯ (ОФС 42-0048-07)

Метод ионометрии основан на определении активности (концентрации) определяемых ионов с помощью ионоселективных электродов (ИСЭ). Ионоселективный электрод обладает избирательной чувствительностью к определенным ионам, от содержания которых зависит его потенциал. В основу определения положен принцип потенциометрического анализа, заключающийся в измерении разности потенциалов (электродвижущей силы - ЭДС) измерительного (ионоселективного) электрода и электрода сравнения, потенциал которого постоянен.

Зависимость электродвижущей силы электродной системы от активности потенциалопределяющего иона описывается уравнением Нернста:

R x T

E = E + 2,303 ------- lg a, (1)

0 Z x F

где:

E - разность потенциалов между измерительным и вспомогательным

электродами (ЭДС), мВ;

E - значение ЭДС электродной системы в начальной точке диапазона

измерений (стандартное значение ЭДС), мВ;

R - газовая постоянная;

T - абсолютная температура;

F - число Фарадея;

z - заряд определяемого иона;

a - активность или эффективная концентрация свободных ионов в растворе,

связанная с концентрацией соотношением:

a = f x C, (2)

где: C - молярная концентрация;

f - коэффициент активности.

Для очень разбавленных растворов коэффициент активности близок к единице и активность ионов равна концентрации.

Если коэффициент активности поддерживается постоянным, уравнение Нернста принимает вид:

E = E + --- x lg f x C, (3)

0 z

R x T

где k = ------- - температурный коэффициент.

Температурный коэффициент k при любой температуре может быть рассчитан по формуле:

k = 0,05916 + 0,000198 x (t - 25 град. C) (4)

и приведен в табл. 14.1.

Таблица 14.1

Значения k при различных температурах

Температура, град. C	k
	0,0572
	0,0582
	0,0592
	0,0601
	0,0611

Коэффициент активности (f) считается постоянным, если при измерениях во всех анализируемых и калибровочных растворах поддерживается одинаковая ионная сила. Для создания высокой ионной силы к раствору добавляют раствор индифферентного электролита (фоновый раствор) с тем, чтобы различные количества анализируемого иона не влияли на ионную силу раствора и коэффициент активности определяемого иона оставался постоянным.

k k

Если E = E + -- x lg f = E ' и S = ---,

0 Z 0 z

где S - крутизна электродной функции, то

E = E ' + S lgC = E '- S x pC, (5)

0 0

где pC = -lgC.

Таким образом, при постоянной ионной силе раствора и постоянной температуре наблюдается линейная зависимость ЭДС электродной системы от концентрации определяемого иона.

ИЗМЕРЕНИЕ АКТИВНОСТИ И КОНЦЕНТРАЦИИ ИОНОВ

Ионометрические измерения осуществляют с использованием иономера (высокоомного потенциометра с входным сопротивлением, по крайней мере, в 100 раз большим, чем сопротивление используемых электродов), который включает в себя электродную систему и измерительный преобразователь.

В качестве ионселективных электродов могут использоваться электроды с кристаллической или некристаллической мембраной или с твердой матрицей (например, стеклянные электроды), электроды с заряженными (положительно или отрицательно) или незаряженными подвижными носителями, сенсибилизированные электроды (электроды с ферментативной подложкой, газ-индикаторные электроды). Электродом сравнения служит, главным образом, хлорсеребряный электрод или каломельный электрод с соответствующими индифферентными соединительными жидкостями.

Прибор градуирован в милливольтах или в единицах pX. Подготовка иономера к работе и проведение измерений производятся согласно инструкциям, прилагаемым к прибору. Измерения выполняют при постоянной температуре +/- 0,5 град. C и постоянной ионной силе раствора. Помещают электроды в испытуемый раствор и снимают установившееся показание при медленном и постоянном перемешивании.

При частых измерениях периодически проверяют стабильность отклика и линейность калибровочной кривой в диапазоне концентраций испытуемого раствора. В противном случае проверку проводят перед каждыми измерениями.

1. Метод градуировочного графика

Метод градуировочного графика заключается в построении графика зависимости ЭДС электродной системы от концентрации стандартных растворов с известной концентрацией и последующем нахождении концентрации испытуемого раствора по измеренному в нем значению ЭДС электродной системы. Градуировочный (калибровочный) график строится микропроцессором измерительного преобразователя автоматически на основе введенных в него значений ЭДС электродной системы и соответствующих им значений pX при калибровке иономера в стандартных растворах (двух и более). Подбор концентраций стандартных растворов должен соответствовать диапазону концентраций испытуемых растворов: крайние значения концентраций испытуемых растворов должны находиться внутри линейной области калибровочного графика. Значение pX в испытуемом растворе находится автоматически с использованием градуировочного графика по измеренному значению ЭДС электродной системы (E) - рис. 14.1. (не приводится).

Рис. 14.1. Градуировочный график зависимости ЭДС

электродной системы от концентрации

потенциалопределяющего иона

Рисунок не приводится.

Поскольку в разбавленных растворах pX = -lgC, значение молярной концентрации (моль/л) вычисляют по уравнению:

-pX

C = 10 . (6)

Значение массовой концентрации иона (г/л) рассчитывают, исходя из уравнения:

-pX

C = M x 10 , (7)

где M - молярная масса иона, г/моль.

При наличии влияния других компонентов испытуемого раствора на потенциал ионоселективного электрода используют метод стандартных добавок.

2. Метод стандартных добавок

Метод применим в линейных областях калибровочной кривой.

2.1. Метод многократных добавок

В испытуемый раствор, приготовленный, как указано в частной

фармакопейной статье, вводят несколько (по крайней мере три) порций

объемом V раствора с известной концентрацией определяемого иона,

ст.

соблюдая условие неизменной ионной силы в растворе. Измеряют потенциал до

и после каждой добавки и вычисляют разность дельта Е между измеренным

потенциалом и потенциалом испытуемого раствора. Полученная величина связана

с концентрацией определяемого иона уравнением:

C x V

ст. ст.

дельта E = S x lg (l + -------------), (8)

C x V

или

дельта E

------- C x V

S ст. ст.

10 = 1 + -------------, (9)

C x V

где:

V - объем испытуемого раствора;

C - молярная концентрация определяемого иона в испытуемом растворе;

V - добавленный объем стандартного раствора;

ст.

C - концентрация определяемого иона в стандартном растворе;

ст.

S - крутизна электродной функции, определяемая экспериментально при

постоянной температуре измерением разности потенциалов двух стандартных

растворов, концентрации которых отличаются в 10 раз и соответствуют

линейной области калибровочной кривой.

дельта E

--------

Строят график зависимости 10 от объема добавки V и

ст.

экстраполируют полученную прямую до пересечения с осью X. В точке

пересечения концентрация испытуемого раствора определяемого иона выражается

уравнением:

C x V

ст. ст. (10)

C = ------------,

2.2. Метод однократной добавки

К объему V испытуемого раствора, приготовленного, как описано в частной

фармакопейной статье, прибавляют объем V стандартного раствора известной

ст.

концентрации C Готовят холостой раствор в тех же условиях. Измеряют

ст.

потенциалы испытуемого раствора и холостого раствора до и после добавления

стандартного раствора. Вычисляют концентрацию C анализируемого иона,

используя следующее уравнение и делая необходимые поправки на холостой

раствор:

C x V

ст. ст.

C = ---------------------------, (11)

дельта E

--------

10 x (V + V ) - V

ст.

где:

V - объем испытуемого или холостого раствора;

C - концентрация определяемого иона в испытуемом растворе;

V - добавленный объем стандартного раствора;

ст.

C - концентрация определяемого иона в стандартном растворе;

ст.

дельта E - разность потенциалов, измеренных до и после добавки;

S - крутизна электродной функции, определяемая экспериментально

при постоянной температуре измерением разности потенциалов двух

стандартных растворов, концентрации которых отличаются в 10 раз и

соответствуют линейной области калибровочной кривой.

3. Потенциометрическое определение pH

Водородным показателем pH, характеризующим концентрацию ионов водорода в водных растворах, называется отрицательный десятичный логарифм активности ионов водорода

pH = -lg a + (12)

Потенциометрическое определение pH заключается в измерении ЭДС электродной системы, где в качестве ионоселективного электрода используют чувствительный к ионам водорода электрод (обычно стеклянный), в качестве электрода сравнения - стандартный электрод с известной величиной потенциала (насыщенный каломельный или хлорсеребряный электроды). На практике для измерения pH применяют метод градуировочного графика. pH испытуемого раствора связан с pH стандартного раствора следующим уравнением:

<5 6 789 10 11 >

Дата добавления: 2016-07-09; просмотров: 355;