Микробиологическая диагностика. Постмортальная диагностика включает обнаружение телец Бабеша—Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга (чаще из гиппокампа
Постмортальная диагностика включает обнаружение телец Бабеша—Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга (чаще из гиппокампа, пирамидальных клеток коры большого мозга и клеток Пуркинье мозжечка), а также выделение вируса из мозга и подчелюстных слюнных желез. Тельца Бабеша—Негри выявляют методами окраски по Романовскому—Гимзе, Манну, Туревичу, Муромцеву и др. Вирусные антигены в клетках обнаруживают с помощью РИФ.
Выделяют вирус из патологического материала путем биопробы на белых мышах: мышей-сосунков заражают интрацеребрально. Срок наблюдения до 28 дней. Обычно зараженные животные погибают через неделю. Идентификацию вирусов проводят с помощью ИФА, а также в РН на мышах, используя
для нейтрализации вируса антирабический иммуноглобулин.
Прижизненная диагностика основана на исследовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ; выделении вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребрального инфицирования мышей-сосунков. Возможно определение антител у больных с помощью РСК, ИФА.
Лечение.Симптоматическое; эффективное лечение отсутствует. Прогноз при развитии заболевания всегда неблагоприятный.
Профилактика.Профилактические мероприятия по борьбе с бешенством направлены на выявление, изоляцию или уничтожение животных — возможных источников инфекции: бродячих собак, кошек и др. Важно соблюдение правил содержания домашних животных. Проводятся карантинные мероприятия при импорте животных. Большое значение имеет иммунизация антирабической вакциной служебных и домашних собак. Животное, покусавшее людей или животных, необходимо наблюдать в течение 10 дней. Пострадавшему промывают рану водой с мылом, обрабатывают спиртом или препаратами йода. Края раны иссекают и в первые 3 дня не зашивают. Специфическую профилактику проводят антирабической вакциной и антирабической сывороткой или иммуноглобулином.
Первую вакцину против бешенства приготовил Л. Пастер из фиксированного вируса бешенства. Последовательно пассируя уличный вирус бешенства через мозг кролика, ему удалось (на 133 пассаже — заражения от кролика к кролику) первоначальный инкубационный период с 15—20 дней снизить до 7 дней. В последующем инкубационный период не изменялся. Полученный вирус с постоянным инкубационным периодом Л. Пастер назвал фиксированным в отличие от уличного. Фиксированный вирус утратил вирулентность для других видов животных. Для большего снижения вирулентности фиксированного вируса Л. Пастер высушивал инфицированный мозг над едким калием. Первая вакцинация была проведена в 1885 г. мальчику, укушенному бешеной собакой.
В настоящее время для специфической профилактики применяют инактивированную УФ- или гамма-лучами культуральную вакцину. Разрабатывается генно-инженерная вакцина, содержащая гликопротеин G возбудителя.
Иммунизации вакциной подлежат люди, связанные с риском заражения (собаколовы, ветеринары и др.). С лечебно-профилактической целью иммунизируют людей, укушенных подозрительными на бешенство животными. При этом активный иммунитет формируется уже во время инкубационного периода.
При множественных укусах для ускоренной защиты создают пассивный иммунитет введением антирабического иммуноглобулина.
17.1.8.2. Вирус везикулярного стоматита
Везикулярный стоматит— вирусная инфекционная болезнь животных (домашний скот и др.), иногда поражающая человека в виде гриппоподобной инфекции. Характеризуется везикулярными высыпаниями на слизистой оболочке рта, гортани, языка, кожи. Вызывается вирусом везикулярного стоматита, относящегося к семейству Rhabdoviride роду Vesiculovirus. Вирус индуцирует интенсивное образование интерферона и высокочувствителен к нему. Растет на культуре клеток, вызывая ЦПД и образование бляшек. Относится к арбовирусам, переносится различными комарами. Возбудитель выделяют из везикул
на культуре клеток и курином эмбрионе. Идентификация вируса везикулярного стоматита проводится с помощью РИФ,РСК, ИФА. Специфическая профилактика не разработана. Лечение симптоматическое.
17.1.9. Филовирусы (семейство Filoviridae)
Филовирусы (лат. filum — нить) — семейство нитевидных РНК-содержащих вирусов. Содержит род «Марбургподобных вирусов» и род «Эболаподобных вирусов», включающие вирусы Марбург и Эбола— возбудителей африканских геморрагических лихорадок.
Структура и репродукция.Вирусы имеют вид длинных филаментов (80—1000 нм) с оболочкой и однонитевой минус-РНК, заключенной в капсид. Содержат полимеразу. Симметрия капсида спиральная. На оболочке имеются шипы (спикулы). Репликация и сборка — в цитоплазме. Выход из клетки — почкованием через клеточную мембрану. При электронной микроскопии негативно контрастированных препаратов вируса Эбола (рис. 17.8) видны нитевидные, иногда ветвящиеся вирионы, имеющие форму цифры или кольца. Они имеют из липопротеиновую оболочку (с поверхностными выступами — шипами), окружающую спиральный нуклеокапсид.
Микробиологическая диагностика.Для определения компонентов вирусов и антител применяют ПЦР, РИФ, ИФА, РН, РСК.
17.1.9.1. Вирусы Марбург и Эбола
Вирус Марбургвызывает геморрагическую лихорадку Марбург — тяжелое заболевание с геморрагическим синдромом и высокой летальностью. Заболевание впервые описано в г. Марбурге (ФРГ) среди лабораторных работников, проводивших исследования на африканских зеленых мартышках. Размножается в культуре клеток, иногда не вызывая цитопати-ческого эффекта. Резервуаром вируса являются африканские зеленые мартышки. Человек высоковосприимчив к вирусу. Заражение человека происходит при контакте с кровью больных и обезьян, а также воздушно-капельным путем. Описаны отдельные вспышки болезни, а также случаи внутрилабораторных заражений. Инкубационный период 2—19 дней. Начало острое, с высокой температурой, нарушением самочувствия, симптомами со стороны дыха-
тельной системы, ЖКТ, а на 5—7-е сутки появляется геморрагическая сыпь на фоне кровавой рвоты, кровавого поноса, которые могут привести к летальному исходу (50 % случаев).
Клинический диагноз подтверждается вирусологическими и серологическими данными (постановка ИФА, РИФ).
Лечение — плазмой рековалесцентов, ин-терферонотерапия. Специфическая профилактика не разработана. Больные подлежат строгой изоляции с соблюдением мер профилактики внутрибольничных и внутрилабора-торных заражений.
ВирусЭбола вызывает геморрагическую лихорадку Эбола, характеризующуюся высокой температурой, интоксикацией, диареей и геморрагическим синдромом. Различают 3 серотипа вируса. Вирус плохо культивируется в культурах клеток.
Естественный резервуар вируса не установлен. Источником инфекции является человек. Заражение происходит контактным и алиментарным путями, а также парентерально через кровь больного человека. Инкубационный период 7—14 дней. Начало острое, с высокой температурой, головными болями, болями в грудной клетке, в области живота, рвотой, диареей. Развивается геморрагический синдром (коре-подобная сыпь). Летальность достигает 90 %.
Диагностика основана на клинико-эпиде-миологических данных и подтверждается вирусологическими и серологическими данными (ИФА, ПЦР и др.).
Лечение — плазмой реконвалесцентов. или специфическим гаммаглобулином. Специфическая профилактика не разработана. Больные подлежат изоляции, устанавливается строгий режим как при карантинных инфекциях.
17.1.10. Коронавирусы (семейство Coronaviridae)
Таксономия.Семейство Coronaviridae включает в себя один род Coronavirus, объединяющий более 10 видов, вызывающих заболевания у человека и животных. На поверхности вирусной частицы обнаруживаются выступы — шипики в виде короны. Коронавирусы широко распространены в природе, вызывают поражения респираторных органов, (в том числе SARS) ЖКТ, нервной системы человека, а также жи-
вотных. Вирус впервые был выделен в 1965 г. D. Tyrrellatas от больного острым ринитом.
Морфология.Вирионы среднего размера (80—220 нм), округлой формы (рис. 17.9). Сердцевина вириона представлена спиральным нуклеокапсидом, содержащим однонитевую плюс-РНК. Нуклеокапсид, имеющий вид спирали, окружен липидной оболочкой, покрытой снаружи булавовидными выступами — пепло-мерами, которые при прикреплении к вириону образуют узкий «перешеек». Пепломеры придают вирусной частице вид солнечной короны. В оболочку вириона встроены гликопротеины Е1 и Е2, которые отвечают за адсорбцию вируса на клетке и проникновение в клетку хозяина.
Антигены.Коронавирусы имеют сложный антигенный состав, выделяют 3 антигенно отличных субъединицы. Антигенные детерминанты располагаются на пепломерах. При попадании в организм коронавирусы вызывают образование вируснейтрализующих, агглютинирующих, пре-ципитирующих и других антител. У некоторых штаммов обнаружен гемагглютинин. Выявлены общие антигены у коронавирусов, выделенных от человека, и изолированных от животных. По антигенной структуре коронавирусы, выделяемые от человека, разделены на 4 группы.
Резистентность.Вирусы чувствительны к воздействию жирорастворителей, кислот и щелочей, УФ-лучам; при нагревании до 56 °С погибают через 10—15 мин. При комнатной температуре сохраняются в течение несколь-
Таблица 17.3. Характеристика ретровирусов(семейство Retroviridae) | |
Род | Типовойвид и некоторые представители рода |
Alpharetrovirus | Вирусы лейкоза, саркомы тип, саркомы Рауса кур |
Betaretrovirus | Вирус рака молочных желез мышей, эндогенный ретровирус человека, вирус обезьян Мезон—Пфайзера |
Gammaretrovirus | Вирусы саркомы и лейкемии мышей, кошек, приматов |
Deltaretrovirus | Вирус лейкемии крупного рогатого скота, лимфотропные вирусы Т-клеток человека (HTLV-1,-2) |
Epsilonretrovinis | Вирус саркомы кожи |
Lentivinis | Вирус иммунодефицита человека, вирус Мэди/Висна |
Spumavirus | Пенящие вирусы человека, обезьян, бычий синцитиальный вирус |
ких дней. Устойчивы при низких температурах, хорошо переносят лиофилизацию.
Культивирование. Коронавирусы репродуцируются в клетках их естественных хозяев. Так, возможно использование в качестве биологических моделей клеток эмбриона человека, а также первичных клеток эпителия человека. Оптимальная температура культивирования 33—35 "С. Возбудители заболеваний птиц размножаются в куриных эмбрионах. Внутриклеточные включения не образуются.
Репродукция.Коронавирусы проникают в клетку путем эндоцитоза, репродукция происходит в цитоплазме. Сборка вириона осуществляется на мембране эндоплазматической сети. Вирусные частицы отпочковываются внутри эндоплазматического ретикулума или аппарата Гольджи. Выход вируса из инфицированных клеток осуществляется путем экзоцитоза.
Эпидемиология и патогенез.Коронавирусы вызывают у человека острые респираторные заболевания, в том числе бронхиты и пневмонию, SARS преимущественно в осенне-зимний период. Источник инфекции — больной человек, основной путь заражения — воздушно-капельный. Так как входными воротами инфекции в большинстве случаев являются верхние дыхательные пути, то болезнь протекает по типу ОРЗ. При попадании вируса через рот возможно развитие гастроэнтеритов.
Клиника.Инкубационный период 3—4 дня. В клетках слизистой оболочки верхних дыхательных путей происходит первичная репродукция вируса, при этом развивается профуз-ный насморк, как правило, без повышения температуры. Продолжительность болезни
5—7 дней. Возможно развитие симптомов острого гастроэнтерита. Коронавирусная инфекция может сочетаться с другими заболеваниями вирусной или бактериальной этиологии.
Иммунитет.После перенесенного заболевания формируется гуморальный иммунитет.
Микробиологическая диагностика.Материал для исследования — отделяемое носоглотки. В качестве экспресс-диагностики используют РИФ — обнаружение антигена в клетках эпителия верхних дыхательных путей. Выделение вируса затруднено, поэтому основной метод диагностики — серологический. Исследуют парные сыворотки, применяя РТГА, РСК, РН.
Лечение.Симптоматическое.
Специфическая профилактика.Не разработана.
17.1.11. Ретровирусы (семейство Retroviridae)
Ретровирусы— семейство Retroviridae, объединяющее около 150 видов однонитевых РНК-содержащих, обратнотранскрибирую-щихся вирусов.
Ретровирусы имеют сферическую форму, размер 80—130 нм. Вирион имеет оболочку и нуклеокапсидную сердцевину. Капсид ико-саэдрический. Типичным является наличие обратной транскриптазы (РНК-зависимой ДНК-полимеразы), связанной с геномом — однонитевой плюс-РНК в виде комплекса из двух идентичных субъединиц. Вирусы содержат протеины: группового антигена (gag), по-лимеразный протеин (pol) и белки оболочки (env). Известно около 30 онкоантигенов.
Семейство ретровирусов включает 7 родов, приведенных в табл. 17.3.
В патологии человека значение имеют 4 вида: ВИЧ-1, ВИЧ-2 и вирусы Т-клеточных лейкозов (HTLV-1 и HTLV-2).
17.1.11.1. Вирус иммунодефицита человека
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ,или H1V— от англ. Human Immunodeficiency Virus) вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчивающуюся развитием синдрома приобретенного иммунного дефицита (СПИД, или от англ. AIDS —Acquired Immunodeficiency Syndrome). СПИД характеризуется преимущественным поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфностью клинических проявлений, высокой летальностью, передачей в естественных условиях от больного человека здоровому (главным образом, при половых контактах или парентерально с инфицированными ВИЧ-материалами, от больной матери плоду, при грудном вскармливании) и склонностью к быстрому эпидемическому распространению. Типичный антропоноз.
Возбудитель ВИЧ-инфекции — лимфотроп-ный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus. Вирус открыт в 1983 г. одновременно французским вирусологом Л. Монтанье и американским ученым Р. Галло.
История возникновения и эпидемиология ВИЧ-инфекции.Впервые СПИД описан в 1981 г. в «Еженедельном вестнике заболеваемости и смертности», издаваемом в США (Атланта). Врачи госпиталя Нью-Йоркского университета, а затем Лос-Анджелеса в течение 1980/81 г. зарегистрировали групповое появление у гомосексуалистов необычных форм саркомы Капоши и злокачественной пнев-моцистной пневмонии. Когда таких больных было зарегистрировано больше сотни, врачи заподозрили, что имеют дело с каким-то новым заболеванием, назвав его «чумой беспутных», так как оно было связано с гомосексуализмом и возникло в период разгула в США «сексуальной революции», ростом проституции, венерических заболеваний, порнографией. Впоследствии обнаружилось, что такое же заболевание встречается и среди людей, страдающих гемофилией, которым многократно переливают плазму крови. Затем было
установлено, что заболевание передается при половых контактах, особенно в извращенных формах.
Все это дало основание предположить, что человечество имеет дело с каким-то новым инфекционным заболеванием. Начались поиски возбудителя, которые увенчалось успехом в 1983 г. — из организма больного был выделен новый, ранее неизвестный вирус, названный впоследствии ВИЧ.
Между тем, новое заболевание — ВИЧ-инфекция — за 20 с лишним лет охватило все страны и все без исключения континенты. По состоянию на 2003 г. всего на земном шаре зафиксировано более 40 млн ВИЧ-инфицированных, и более 16 млн из них погибло от СПИДа. Например, в ряде стран Африки до 15-20 % взрослого населения поражено ВИЧ, в США — более 0,5 % населения, в некоторых странах Европы (Испания, Франция, Швейцария и др.) — 0,3-0,5 % населения. В России зарегистрировано около 300 тыс. ВИЧ-инфицированных. По прогнозам специалистов, пандемия ВИЧ-инфекция будет продолжаться.
Причиной быстрого распространения ВИЧ-инфекции являются всеобщая восприимчивость людей к ВИЧ, многообразие естественных путей передачи, высокая ин-фекционность вируса, длительный период заразности инфицированного, отсутствие до настоящего времени эффективных средств лечения и профилактики.
Морфологические и культуральные свойства. Антигены ВИЧ.ВИЧ — РНК-содержа-щий вирус (рис. 17.10) Вирусная частица имеет сферическую форму, диаметр 100 нм. Оболочка вируса состоит из двойного слоя липидов, пронизанного («утыканного») гли-копротеинами. Липидная оболочка происходит из плазматической мембраны клетки хозяина, в которой репродуцируется вирус. Гликопротеиновая молекула (gp 160), имеющая молекулярную массу 160 кДа, состоит из 2 субъединиц: gp 120 (молекулярная масса 120 кДа), находящейся на поверхности ви-риона, и gp 41 (молекулярная масса 41 кДа), пронизывающей его липидную оболочку.
Сердцевина вируса имеет конусовидную форму и состоит из капсидных белков р24 и
р25 (молекулярная масса соответственно 24 и 25 кДа), ряда матриксных белков (рб, р7) и белков протеазы (plO, pi 1). Геном образует две нити РНК (состоит из 7900-9800 п.н.), для осуществления процесса репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу, или ревертазу
Геном вируса состоит из 3 основных структурных генов (gag, pol, env) и 7 регуляторных и функциональных генов (tat, rev, nef, vif, vpr, vpu, vpx). Ген gag (от англ. group antigen — групповой антиген) кодирует матриксные, капсидные, нуклеокапсидные белки и белки протеазы. Ген pol (от англ. polymerase — полимераза) кодирует обратную транскриптазу (р61/р51, р15-РНКазу р32-интегразу); Ген env (от англ. envelope — оболочка) кодирует поверхностный белок gp 120 и трансмембранный gp 41. Функциональные гены выполняют регуляторные функции (reg, tat, nef) и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе (vif, vpu, vpr, vpx).
Жизненный цикл ВИЧ (см. рис. 3.10) состоит из 4 стадий:
1) адсорбция и проникновение вируса путем эндоцитоза в клетку;
2) высвобождение вирусной РНК, синтез ДНК-провируса и интеграция провируса с геномом клетки хозяина;
3) синтез РНК вируса, трансляция и формирование вирусных белков;
4) сборка, созревание и высвобождение путем почкования вновь образованных вирионов.
Полный жизненный цикл вируса реализуется всего за 1—2 суток, причем в сутки формируется до одного миллиарда вирусных частиц.
Вирус поражает в основном Т- и В-лим-фоциты, а также некоторые клетки моноци-тарного ряда (макрофаги, лейкоциты, клетки Лангерганса, дендритные клетки), клетки нервной ткани и другие клетки в связи с тем, что все эти клетки содержат на поверхности рецепторы CD4, с которыми специфически взаимодействует оболочечный белок gp 120 ВИЧ. Не исключено также рН-независимое слияние оболочки вируса с клеточной мембраной и проникновением вируса в клетку. Таким образом вирус может поражать также эпителиальные, эндотелиальные и другие клетки, не содержащие рецептора CD4.
Высокая скорость и многоэтапность процесса репродукции ВИЧ в различных клетках-мишенях сопровождаются генетическими ошибками, которые, суммируясь, обуславливают уникальную чрезвычайную изменчивость вируса. Этому способствует наличие в поверхностном белке gp 120 гипервариабельного участка (V-3), состоящего из 5 аминокислотных остатков, который определяет основную нейтрализующую доминанту вируса.
Изменчивость ВИЧ в сотни и тысячи раз превосходит изменчивость гриппа. Это затрудняет диагностику и специфическую профилактику ВИЧ-инфекции.
Выделяют 2 типа вируса — ВИЧ-1 и ВИЧ-2, которые различаются по структурным и антигенным характеристикам. В частности, геном ВИЧ-2 отличается от генома ВИЧ-1 структурой гена env и заменой гена vpu на vpx. Так, ВИЧ-2 (вместо белков gp 120, gp 41, gp 160, gp24 у ВИЧ-1) содержит белки gp 140, gp 105, gp 36. Это обусловливает различия в течении заболеваний, вызываемых инфекциями ВИЧ-1 и ВИЧ-2.
ВИЧ-1, как наиболее распространенный, в силу своей изменчивости имеет не менее 10 генотипов (субтипов): А, В, С, D, E, F и т. д., отличающихся между собой на 25—30 % по аминокислотному составу белков. Внутри субтипа уровень такой вариабельности составляет 5—20 %.
В настоящее время ВИЧ-1 делят на 3 группы: М, N, О. Большинство изолятов относит-
ся к группе М, в которой выделяют 10 подтипов: А, В, С, D, F-1, F-2, G, Н, I, К. При этом около 10 % ВИЧ-1 имеют мозаичную структуру, т. е. являются рекомбинантами. Субтипы распространены по регионам неравномерно. В России на 2003 г. доминирует подтип А, встречаются подтип В и рекомбинантный подтип АВ.
Культивируется ВИЧ на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека, но для этого требуется присутствия ИЛ-2. К вирусу нечувствительны все виды животных, кроме шимпанзе, хотя клиническое проявление у последних отличается от такового у человека. Известны самостоятельные вирусы иммунодефицита, поражающие кошек (ВИК), лошадей, обезьян, овец. Они видоспецифичны и не поражают другие виды животных и человека.
Устойчивость ВИЧ.Вирус чувствителен к физическим и химическим факторам, гибнет в течение 30 мин при нагревании выше 56 "С, гибнет в течение короткого времени (через 5—10 мин) при действии дезинфектантов (например, после обработки спиртом, эфиром); для него губительны солнечная радиация, искусственное УФ-излучение, ионизирующая радиация. Имеются данные, что ВИЧ теряет активность при воздействии ферментов слюны и пота.
Однако вирус может длительно (до 2 недель) сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови, а в донорской крови может сохраняться годами. Вирус длительно сохраняется также в кровососущих насекомых, однако это не имеет эпидемиологического значения, так как ВИЧ при укусах насекомых (комары, вши, блохи, клопы, клещи) не передается.
Факторы патогенности, патогенеза ВИЧ-инфекции.Вирус обладает лимфотропностью благодаря тому, что на лимфоцитах Т-хелпе-рах и других клетках (см. выше) существуют в норме рецепторы CD4 (до 300 тыс. на одном лимфоците), имеющие сродство к белку gp 120 ВИЧ.
Это обусловливает прикрепление вируса к лимфоциту, проникновению вируса в клетку и его репродукцию в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние разрушаются или теряют свои функциональные
свойства (могут образовываться синцитии). Однако вирус поражает не только Т-хелперы, но и другие клетки (В-лимфоциты, макрофаги, лейкоциты, клетки Лангерганса, дендритные, нервные и другие клетки), которые имеют рецепторы CD4 как у Т-лимфоцитов.
В результате размножения вируса в различных клетках происходит накопление его в органах и тканях, и он обнаруживается в крови, лимфе, слюне, сперме, слезах, моче, поте, каловых массах, содержимом урогени-тального тракта, грудном молоке, в гное при воспалительных процессах.
При ВИЧ-инфекции снижается число Т-4-лимфоцитов, а также отношение Т-4/Т-8, нарушается функция В-лимфоцитов, подавляется функция естественных киллеров и ответ на антигены и митогены, снижается и нарушается продукция комплемента, лимфокинов и других факторов, регулирующих иммунные функции (ИЛ, ИФН и др.), в результате чего наступает дисфункция иммунной системы и расстройство всей ее деятельности.
Поражение иммунных и других клеток, нарушение синтеза важных иммунореагентов приводит к снижению защитных функций иммунной системы, развитию иммунодефи-цитов и проявлению вторичных заболеваний инфекционной и неинфекционной природы, в первую очередь гнойно-воспалительных заболеваний, вызываемых условно-патогенной флорой, а также злокачественных опухолей.
Клиника.При ВИЧ-инфекции поражается дыхательная система (пневмоцистная пневмония, бронхиты, плевриты); ЦНС (абсцессы, менингиты, энцефалиты, деменция и др.); ЖКТ (упорные диареи, энтериты, снижение массы тела и др.); возникают злокачественные новообразования (саркома Капоши, опухоли внутренних органов).
ВИЧ-инфекция, по В. И. Покровскому, протекает в несколько стадий: 1) инкубационный период, составляющий в среднем 2—4 недели; 2) стадия первичных проявлений, характеризующаяся вначале острой лихорадкой, лимфаденопатией, диареей и другими малозначительными симптомами; завершается стадия бессимптомной фазой и персистен-цией вируса, восстановлением самочувствия, однако в крови определяются ВИЧ-антитела.
Эта стадия может длиться годами и затем перейти в 3-ю стадию вторичных заболеваний, проявляющихся поражением или дыхательной, или нервной системы, желудочно-кишечного тракта, возникновением злокачественных опухолей в различных сочетаниях. Завешается ВИЧ-инфекция последней, 4-й терминальной стадией, собственно СПИДом, характеризующимся кахексией, упорной диареей, адинамией, анемией, деменцией, снижением всех иммунных показателей с летальным исходом.
В настоящее время среднюю продолжительность жизни инфицированного человека оценивают примерно в 12 лет; средние сроки от сероконверсии до развития СПИДа — в 7— 15 лет, однако эти сроки варьируют как в ту, так и в другую сторону.
Микробиологическая диагностика.Основана на установлении факта зараженности ВИЧ и определении стадии заболевания. Для этого применяют комплекс эпидемиологических, клинических, иммунологических и лабораторных данных.
Вирусологические и серологические исследования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ. Для этого используют ИФА, ИБ и ПЦР. Сыворотки больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержат антитела ко всем вирусным белкам. Однако для подтверждения диагноза определяют антитела к белкам gp41, gpl20, gpl60, p24 у ВИЧ-1 и антитела к белкам gp36, gpl05, gpl40 у ВИЧ-2. ВИЧ-антитела появляются через 2—4 недели после инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ-инфекции и при СПИДе. В более ранние сроки выявляются антигены ВИЧ. Метод выявления вируса в крови, лимфоцитах превосходит по информативности другие тесты, однако он трудоемок и дорог. Для определения ВИЧ-антител разработано множество тест-систем, позволяющих выявлять до 99,9 % всех положительных проб. Однако при любой положительной пробе для подтверждения результатов ставится реакция ИБ. Применяют также ПЦР, способную выявлять ВИЧ-инфекцию в инкубационном и раннем клиническом периоде, однако ее чувствительность несколько ниже, чем у ИФА.
Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими исследованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.
Лечение.Все испытанные противовирусные химиотерапевтические методы лечения не дают эффекта, и они могут лишь облегчить течение ВИЧ-инфекции. Наиболее действенным оказалось применение ингибиторов обратной транскриптазы, действующих в активированных клетках. Такими препаратами являются производные тимидина — азидотимидин и фосфазид. Фосфазид — отечественный препарат, более эффективен и менее токсичен, чем азидотимидин. Однако полного излечения эти препараты не дают.
Профилактика.Специфическая профилактика не разработана. За рубежом и в России ведутся интенсивные работы по созданию профилактической вакцины. Некоторые образцы вакцин уже проходят клинические испытания.
В настоящее время профилактика ВИЧ-инфекции сводится к социальным и противоэпидемическим мероприятиям, а именно: к механической защите от инфицирования с помощью презервативов, к пользованию одноразовыми шприцами, иглами, медицинскими инструментами, системами для переливания крови, к обеззараживанию материалов и медицинских препаратов из крови и т. д. Важное значение имеет своевременное обследование и выявление ВИЧ-инфицированных, в первую очередь в организованных коллективах, борьба с проституцией, наркоманией, гомосексуализмом, безнравственностью, к правильному половому воспитанию, просветительской работе среди населения. В России действует закон, предусматривающий уголовное наказание за заведомую постановку другого лица в опасность заражения ВИЧ или умышленное заражение ВИЧ.
Вирусы Т-клеточного лейкоза.Вирусы Т-клеточного лейкоза (Human T-lymphotropic virus, HTLV) вызывают Т-клеточный лейкоз взрослых (HTLV-1) и волосато-клеточный лейкоз взрослых (HTLV-2). Эти вирусы объединяет одно свойство — они лимфотропны, в связи с чем вызывают преимущественное поражение иммунной системы. Отсюда ха-
рактер заболеваний, вызываемых вирусами Т-клеточного лейкоза, во многом сходен с ВИЧ-инфекцией. Т-клеточные лейкозы, так же как и ВИЧ-инфекция, характеризуются полиморфностью клинических проявлений, тяжестью течения (доходящей до 100% летальности), разнообразием путей инфицирования, схожестью эпидемического процесса. Однако, если ВИЧ-инфекция хорошо изучена (известны структура и биологические свойства вируса, патогенез заболеваний, разработаны методы диагностики, ведется интенсивный поиск средств лечения и специфической профилактики, тщательно изучена эпидемиология ВИЧ-инфекции), то такого нельзя сказать в отношении вирусов Т-клеточного лейкоза и заболеваний, вызываемых этими вирусами.
Болезни, вызываемые вирусами Т-кле-точных лейкозов, зафиксированы в странах Северной и Южной Америки, в том числе в США, а также в Японии, Израиле, в европейских странах (Великобритания, Голландия и др.), в странах Африки, т. е. практически на всех континентах. Зарегистрировано (по серологическим данным) распространение вирусов и среди населения России, особенно в Сибири и на Дальнем Востоке.
Новое заболевание, названное Т-клеточ-ным лейкозом (лимфомой взрослых), было впервые описано Такаууки с соавт. в конце 70-х годов прошлого века. Более чем 20-летний период изучения заболевания показал, что число инфицированных вирусами Т-клеточного лейкоза от числа обследованных колеблется, по разным регионам и у разных исследователей, от 4 до 100 %. В России систематическое направленное обследование населения на вирусы Т-клеточного лейкоза практически не проводится, что, кстати, относится и к большинству стран мира. Между тем, учитывая распространенность вирусов
среди населения планеты, многообразие естественных путей передачи, тяжесть и летальный исход заболевания, отсутствие эффективных средств лечения и профилактики Т-клеточных лейкозов, эта вирусная инфекция выдвигается в число актуальных, требующих концентрации сил и средств для планомерного ее изучения, разработки (заблаговременно до перерастания этой инфекции в пандемию) мер профилактики и лечения. В противном случае Т-клеточный лейкоз уже в ближайшее время может выйти на такой же уровень в инфекционной патологии, какой сейчас занимает ВИЧ-инфекция.
17.1.12. Аренавирусы (семейство Arenaviridae)
Аренавирусы — семейство РНК-содержа-щих безоболочечных вирусов. Свое название семейство Arenaviridae получило от греч. arenosa — песчаный (из-за рибосом в вирио-не, похожих на песчинки). Семейство включает вирус лимфоцитарного хориоменинги-та, а также вирусы Ласса, Хунин, Мачупо, Гуанарито, вызывающие тяжелые геморрагические лихорадки (табл. 17.4).
Структура и репродукция.Вирион, имеющий сферическую или овальную форму имеет диаметр около 120 нм. Снаружи он окружен оболочкой с булавовидными гликопротеиновыми шипами GP1 и GP2. (рис. 17.11). Под оболочкой расположены 12—15 клеточных рибосом, похожих на песчинки. Капсид спиральный. Геном представлен двумя сегментами (L, S) однони-тевой минус-РНК; кодируется 5 белков, в частности L-, Z-, N-, G-белки. Вирион содержит транскриптазу (L-белок, РНК-полимераза). Репродукция — в цитоплазме; после сборки и включения в вирион ри-босомоподобных частиц происходит его почкование через плазматическую мембрану клетки.
Резистентность.Аренавирусы чувствительны к действию детергентов, УФ-, гамма-излучению и к
Таблица 17.4. Характеристика семейства Arenaviridae | ||
Род | Представители | Свойства вирусов |
Arenavirus | Вирусы лимфоцитарного хориоменим-гита, Ласса. Вирусы комплекса Така-рибе. включая вирусы Хунин. Мачупо. Гуанарито, Сабиа | Вирусы полиморфные (50-300 им), имеют оболочку, однонитевую минус-РНК из 2 сегментов. Симметрия капсида спиральная. Содержат транскрип-тазу. Репродукция - в цитоплазме |
нагреванию. Не чувствительны к замораживанию и лиофилизации.
Культивирование.Аренавирусы культивируют в курином эмбрионе, в организме грызунов и на культуре клеток, например Vero-культуре клеток почек зеленых мартышек.
Эпидемиология, патогенез и клиника.Аренавирусы относятся к робовирусам,т. е. распространяются с выделениями (моча, кал, слюна) грызунов, загрязняющих продукты питаьия, воду и воздух. Люди заражаются алиментарным путем илиаэрогенным механизмом, реже контактным путем. Инкубационный период 1—2 недели. Вирусы обычно попадают через кишечный или респираторный тракты. Размножившись в регионарных лимфатических узлах, они распространяются в ретикуло-эндотелиальной системе, циркулируют в крови. В результате взаимодействия цитотоксических Т-лимфоцитов с вирусинфицированными клетками происходит разрушение ткани. При геморрагических лихорадках образуются иммунные комплексы антиген—антитело, откладывающиеся на базаль-ных мембранах клеток. Происходят некротические изменения печени и селезенки, развиваются гло-мерулонефрит, миокардит и сосудистые изменения. Заболевания (в зависимости от особенностей организма и возбудителя) протекают в виде грип-поподобных проявлений или более тяжело — с развитием лихорадки, сыпи, отеков, геморрагических изменений различной локализации, пневмонии, почечной недостаточности, поражений ЦНС.
Иммунитет.После перенесенного заболевания обычно формируется длительный иммунитет.
17.1.12.1. Вирусы лимфоцитарного хориоменингита, Ласса, Хунин, Мачупо и др.
Вирус лимфоцитарного хориоменингита вызывает лимфоцитарный хориоменингит, протекающий в виде гриппоподобного заболевания или тяжелых форм в виде серозного менингита или менингоэнцефалита с лейко-и тромбоцитопенией. Лимфоцитарный хориоменингит распространяется с выделениями домашних мышей, загрязняющих продукты питания, воду и воздух.
Вирус Ласса вызывает геморрагическую лихорадку Ласса, характеризующуюся интоксикацией, лихорадкой, геморрагическими высыпаниями, поражением ЦНС. Вирус передается от домашних многососковых крыс (Mastomys natalensis), или от человека к человеку (заболевания Либерии, США и др.). Заражение человека в природных очагах происходит респираторным, алиментарным, контактно-бытовым и парентеральным путями. Естественная восприимчивость людей высокая. Длительность постинфекционного иммунитета не установлена. Лихорадка Ласса — зооноз, имеет природно-очаговый характер. Распространена в странах Западной и Центральной Африки (в Нигерии, Сенегале, Гвинее, Заире и др.), где наблюдаются отдельные вспышки. Первая вспышка была выявлена в 1969 г. в т. Ласса (Нигерия), в связи с чем болезнь и получила свое название.
Болезнь протекает тяжело и характеризуется высокой летальностью, достигающей 50%. Инкубационный период составляет в среднем 7—8 дней. Болезнь начинается постепенно, с озноба, повышения температуры; появляются рвота, диарея, боли в животе, груди и кашель. Через неделю развивается макуло-папулезная и петехиальная сыпь на коже лица, туловища, конечностей; отмечаются кровохарканье и кишечные кровотечения.
Вирусы Хунин и Мачупо вызывают американские геморрагические лихорадки:
Вирус Хунин — возбудитель аргентинской геморрагической лихорадки; вирус Мачупо — возбудитель боливийской геморрагической лихорадки. Резервуаром этих вирусов в Южной Америке являются грызуны.
Вирус Гуанарито — новый член комплекса Такарибе, рода Arenavirus, выделенный в 1989 г. в Венесуэле. Вызывает венесуэльскую геморрагическую лихорадку, сопровождается токсикозом, гриппоподобными явлениями, диареей. Резервуар инфекции — дикие грызуны (хлопковые крысы и др.).
Вирус Сабиа — новый член комплекса Такарибе, рода Arenavirus, выделенный в 1993 г. в Бразилии. Вызывает бразильскую геморрагическую лихорадку.
Предполагают, что резервуаром инфекции являются грызуны.
Микробиологическая диагностика аренави-русных инфекций.При диагностике аренави-русных инфекций используют вирусологический и серологический методы. Вирусологический метод: вирус выделяют (из крови, отделяемого глотки, из плевральной, цереброспинальной жидкости, мочи) при заражении культуры клеток или мышей-сосунков, хомячков. Вирусы идентифицируют в РСК, РН, РИФ, ИФА; применяют ГЩР. Серологический метод: антитела в сыворотке крови выявляют в РСК, РИФ, ИФА.
Лечение и профилактика.Лечение симптоматическое. В начальном периоде возможно применение лечебных специфических иммунных сывороток или плазмы крови рекон-валесцентов. Для специфической профилактики разрабатываются живые вакцины.
17.1.13. Калицивирусы (семейство Caliciviridae)
Калицивирусы — семейство РНК-содержащих бе-зоболочечных вирусов с икосаэдрическим капсидом, имеющим чашеобразные углубления (лат. calix — чаша). Содержит вирусы гастроэнтерита группы Норволк и вирус везикулярной экзантемы свиней. В соответствии с решениями 7-го Международного Конгресса по таксономии вирусов с ] января 2002 г. вступила в силу новая классификация, по которой вирус гепатита Е переведен из семейства Caliciviridae в группу гепатит Е-подобных вирусов.
Структура. Вирион безоболочечный; имеет ико-саэдрический капсид с 32 чашеобразными углублениями (ямками). Форма — сферическая (диаметр 27—38 нм) с неровным профилем. На поверхности вириона различают 10 выступов, сформированных краями чашеобразных углублений. Вирионы имеют один главный полипептид и два минорных белка. Геном — линейная, однонитевая плюс-РНК. С РНК ковалентно связан небольшой полипептид (VPg).
Репродукция и сборка вирионов — в цитоплазме. Выход вирионов — при лизисе клеток.
Эпидемиология, патогенез и клиника.Механизм передачи фекально-оральный. Основной путь передачи — водный и пищевой. Инкубационный период 1—2 дня. Вирусы вызывают некротические поражения эпи-телиоцитов тонкой кишки, боли в животе и диарею.
Микробиологическая диагностика.Применяют метод иммунной электронной микроскопии для обнаружения калицивирусов в кале.
17.1.13.1. Вирус гепатита Е
Вирус гепатита Е (HEV) вызывает гепатит Е — антропонозную инфекцию с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя и преимущественным поражением печени.
НЕV ранееотносилсяксемейству Caliciviridae. Недавно он переведен из данного семейства в группу гепатит Е-подобных вирусов. Впервые описан М. С. Балаяном и соавт. в 1983 г.
Структура. Вирион безоболочечный, сферический; диаметр 27-34 нм. Геном — однонитевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-зависимую РНК-полимеразу папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспечивающий внедрение вируса в клетку.
Эпидемиология, клиника.Источник инфекции — больные люди. Основной путь передачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Заболевание сопровождается умеренным поражением печени, интоксикацией и, реже, желтухой. Прогноз благоприятный, кроме беременных, у которых заболевание может привести к летальному исходу
Иммунитет. После перенесенного заболевания стойкий.
Микробиологическая диагностика:1) серологический метод — в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — применяют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови больных в острой фазе инфекции.
Лечение.Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического иммуноглобулина.
Профилактика.Неспецифическая профилактика направлена на улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, разрабатываются рекомбинантные и живые вакцины.
Дата добавления: 2016-02-04; просмотров: 1567;