Определение групп крови

В настоящее время для определения групп крови используется ме­тод определения групп крови с помощью диагностических Цоликло­нов анти-А и анти-В (антитела моноклональных анти-А и анти-В).

Техника определения групп крови системы АВО. Определение группы крови АВО проводится в нативной крови, стабилизированной с помощью консервантов (глюгицир, цитороглюкофосфат, гепарин и др.); в крови взятой из пальца; в крови, взятой без консерванта. Темпе­ратура в помещении при определении групп крови должна быть от +15 до +25^оС.

На планшет или пластинку наносят Цоликлоны анти-А и анти-В по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями - "анти-А", "анти-В". Ря­дом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной малень­кой капле (приблизительно в 10 раз меньше ка­пли антител - 0,01 мл).

При определении группы крови на пластинке антитела и кровь смешивают. Наблюдение за реакцией проводят при легком покачива­нии планшета в течение не менее 2,5 минут. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, бы­стро сливающихся и образующих красные хлопья. При отрицательной реакции капля антител остается равномерно окрашенной в красный цвет. Агглютинаты в капле не образуются.

Оценка результатов реакции агглютинации с Цоликлонами пред­ставлены в таблице 3.

Табл. 3.Определение групп крови

1. Агглютинации нет (-) ни с Цоликлоном анти-А, ни с Цоликлоном анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты не содержат антиге­нов А и В и кровь принадлежит к группе О (I). Это подтверждается наличием агглютининов a и b в исследуемой сыворотке (плазме) по результатам положительной реакции агглютинации со стандартными эритроцитами группы А (II) и В (III).

2.Агглютинация (+) наблюдается только с Цоликлоном анти-А. Сле­довательно, исследуемые эритроциты содержат только антиген А, и кровь принадлежит к группе А (II). Это подтверждается наличием агг­лютининов b в исследуемой сыворотке (плазме) по результатам поло­жительной реакции агглютинации со стандартными эритроцитами группы В (III)

3.Агглютинация (+) наблюдается только с Цоликлоном анти-В. Сле­довательно, исследуемые эритроциты содержат только антиген В, и кровь принадлежит к группе В (III). Это подтверждается наличием агг­лютининов a в исследуемой сыворотке (плазме) по результатам поло­жительной реакции агглютинации со стандартными эритроцитами группы А (II).

4. Агглютинация (+) наблюдается как с Цоликлоном анти-В, так и с Цоликлоном анти-А. Следовательно, исследуемые эритроциты содер­жат оба антигена (В и А), и кровь принадлежит к группе АВ (IU). Это подтверждается отсутствием агглютининов a и b в исследуемой сыво­ротке (плазме) по отрицательной реакции агглютинации со стандарт­ными эритроцитами групп А (II) и В (III).

Пробы на индивидуальную совместимость по группам крови системы АВОвыполняются с сывороткой крови реципиента, которую получают путем центрифугирования или отстоя. Полученную сыво­ротку, при условии хранения ее в холодильнике, можно использовать в течение 2-х дней.

Ход исследования. На белую пластинку наносят 2 капли сыворотки крови больного к которой добавляют в 5 раз меньшую каплю крови или эритроцитов донора. Кровь перемешивают с сывороткой больного и покачивают пластинку в течение 5 минут. Отсутствие агглютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по системе АВО. Появление агглютинации указывает на их несовместимость и недопустимость переливания данной крови.

Проба на совместимость по резус-фактору (Rho, D). На дно сухой пробирки вносят 2 капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания. Затем пробирку наклоняют до горизонтального положения и медленно поворачивают (в течение 5 минут) таким образом, чтобы ее содержимое растекалось по стенке пробирки. После этого добавляют 3-4 мл изотонического раствора хло­ристого натрия, перемешивают содержимое путем 2-3 кратного пере­ворачивания проборки (не взбалтывать!) и просматривают на свет не­вооруженным глазом.

Наличие агглютинатов в пробирке свидетельствует о том, что кровь донора и реципиента несовместима. Если содержимое пробирки оста­ется равномерно окрашенным (без признаков агглютинации), то кровь донора и реципиента по резус-фактору совместимы. Вместо пробы с 33% раствором полиглюкина можно использовать пробу с 10% раство­ром желатиноля.

Биологическая проба. Струйно или капельно переливают 10-15 мл крови (эритроцитарной массы) затем в течение 3-х минут наблюдают за со­стоянием больного. Проба проводится три раза. При отсутствии учащения пульса и дыхания, появ­ления затрудненного дыхания, гипе­ремии лица, болей в спине трансфу­зию продолжают. При наличии пе­речисленных признаков переливание крови немедленно прекращают.