Проведите микроскопическое исследование и определение уреазной активности биоптатов СОЖ с целью диагностики хеликобактерной инфекции.

Для исследования используют мазки-отпечатки биоптатов антрального отдела СОЖ, взятые при гастроскопии. Биоптат берется из мест с максимально выраженной гиперемией и отеком. Мазки окрашиваются по Граму. Бактерии располагаются в слизи, имеют характерную морфологию – спиралевидную или S-образную форму, напоминающую «крылья чайки».

Выделяют 3 степени обсемененности H. pylori:

- слабую (+) – до 20 микробных тел в поле зрения;

- среднюю (++) – до 50 микробных тел в поле зрения;

- высокую (+++) – более 50 микробных тел в поле зрения.

Уреазный тест основан на способности H. pylori продуцировать уреазу в условиях желудка в таких количествах, что она накапливается в его слизистой оболочке. Набор для определения уреазы содержит: мочевину, бактериостатический агент и индикатор рН фенол-рот, меняющий цвет с желтого на малиновый при сдвиге рН в щелочную сторону. Биоптат СОЖ помещают в среду и учитывают результаты через 1-2-3 часа и окончательно через 24 часа по изменению цвета индикатора. Время появления малинового цвета косвенно указывает на количество микроорганизмов:

- + - незначительная инфицированность (малиновое окрашивание к концу суток);

- ++ - умеренная инфицированность (малиновое окрашивание в течение 2-х часов);

- +++ - значительная инфицированность (малиновое окрашивание в течение 1-го часа);

- - отрицательный результат (малинового окрашивания нет).

Положительные результаты микроскопического исследования биоптатов и определения уреазной активности позволяют сделать заключение о наличии хеликобактерной инфекции.

Хеликобактер является микроаэрофилом и капнофилом, требовательным к питательным средам, культивирование которых осуществляется на специальных средах (кровяном агаре на основе колумбийского агара, шоколадном агаре, Pylori-агаре и др.) в атмосфере, содержащей 80-85% N₂, 5-6% O₂, 8-10% CO₂ при влажности 95%. Для получения газовой смеси указанного состава используются газогенераторные пакеты.

Время инкубации: первичное обследование – 7 дней, при контроле лечения – 14 дней. При получении характерных колоний для идентификации H. pylori используют:

- мазок, окрашенный по Граму (H. pylori – грамотрицательные извитые палочки);

- фазово-контрастную микроскопию (H. pylori активно подвижен);

- биохимические тесты: уреазный, оксидазный, каталазный (все 3 теста положительные).

Для идентификации полученных культур с учетом биохимических свойств используются АРI-системы (bio Merieux, Франция).

Условиями эффективности бактериологического метода диагностики являются:

- соблюдение правил забора исследуемого материала;

- соблюдение правил транспортировки исследуемого материала;

- соблюдение правил культивирования H. pylori.

Бактериологический метод в силу своей высокой стоимости не используется сегодня в большинстве лечебных учреждений.