Лабораторная работа. Свойства ферментов.

Цель: определение активности амилазы слюны.

Принцип метода: Определение активности амилазы основано на нахождении максимального разведения слюны, при котором происходит полное расщепление крахмала (желтое окрашивание с йодом). За единицу активности амилазы принимают количество крахмала, расщепленного 1мл слюны.

Исследуемый материал: слюна неразбавленная

Оборудование: термостат, водяная баня, дозатор.

Реактивы: 1% раствор йода, 1% раствор крахмала.

Ход работы: в штативе установить 10 пробирок и пронумеровать. Во все пробирки налить по 1 мл дистиллированной воды. Затем в первую пробирку добавить 1 мл неразбавленной слюны и тщательно перемешать. Приготовить растворы серийного разбавления: из первой пробирки отобрать дозатором 1 мл смеси и перенести во вторую. Перемешать содержимое второй пробирки, отобрать дозатором 1 мл смеси и перенести в третью пробирку. Повторить эту процедуру до десятой пробирки, из которой 1 мл смеси вылить. Таким образом получают следующие разведения: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, 1:256, 1:512 (светло-синий), 1:1024 (синий). Во все пробирки внести по 1 мл раствора крахмала и поставить в термостат на 15 минут при 40ºС. Затем пробирки охладить и добавить в каждую 1 каплю раствора йода. Отметить пробирку, в которой произошло полное расщепление крахмала и сделать вывод.