Лабораторная работа. Ферменты. Изучение свойств ферментов.

Исследуемый материал: слюна разведенная в 5 раз.

Оборудование: термостат, штатив с пробирками.

Опыт №1. Специфичность действия ферментов.

Принцип реакции. Каждый фермент действует только на одно вещество или на группу сходных субстратов, то есть специфичность основана на строгом соответствии структуры субстрата и активного центра фермента. Так амилаза действует только на крахмал, сахараза — только на сахарозу.

Реактивы: 1% раствор крахмала, 2% раствор сахарозы, 5% раствор сульфата меди, 10% раствор гидроксида натрия.

Ход работы: в штативе установить две пробирки и пронумеровать. Затем внести в первую пробирку 10 капель раствора крахмала, во вторую пробирку — 10 капель раствора сахарозы. После чего в каждую пробирку добавить по 4 капли слюны. Содержимое пробирок перемешать и поставить в термостат на 15 минут при температуре 37ºС. Затем содержимое пробирок разделить пополам и провести с одной половиной реакцию с йодом, а с другой половиной — реакцию Троммера. Результаты проведенных опытов занести в таблицу.

Сделать вывод: т. е. укажите субстрат для фермента амилазы слюны.

Опыт №2. Влияние температуры на активность ферментов.

Принцип реакции. Ферменты чувствительны к температуре и проявляют свою активность при температуре 35-45ºС. При температуре 50ºС их активность снижается, а при 70-80ºС действие прекращается, что связано с нарушением структуры активного центра фермента и не происходит соединение фермента с субстратом.

Реактивы: 1% раствор крахмала, 1% раствор йода, 5% раствор сульфата меди, 10% раствор гидроксида натрия.

Ход работы: в две пробирки прилить по 10 капель раствора крахмала, а затем добавить по пять капель: в первую пробирку раствора слюны, во вторую — предварительно прокипяченной слюны. Содержимое пробирок перемешать и поставить в термостат на 15 минут при 37ºС. Затем содержимое пробирок разделить пополам и провести с одной половиной реакцию с йодом, а с другой половиной — реакцию Троммера. Результаты проведенных опытов занести в таблицу.

Сделать вывод.

Опыт №3. Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов.

Принцип реакции: различные вещества могут повышать активность ферментов (активаторы) или тормозить его активность (ингибироты). Так для амилазы слюны активатором служат ионы хлора, для липазы поджелудочной железы — желчные кислоты, а в качестве ингибитора амилазы выступают ионы меди.

Реактивы: 1% раствор крахмала, 1% раствор йода, 1% раствор хлорида натрия, 1% раствор сульфата меди.

Ход работы: в штативе установить 3 пробирки и пронумеровать. Затем внести по 1 капле: в первую пробирку — раствор хлорида натрия, во вторую пробирку — раствор сульфата меди, в третью пробирку — дистиллированную воду. После этого во все пробирки внести по одной капле раствора йода. Наблюдайте за окраской растворов в пробирках. Результаты занести в таблицу.

Сделать вывод, указать активатор и ингибитор.