Классификация ферментов
Фермент (E) – белок, обладающий каталитическими свойствами в реакции преобразования субстрата (S) в продукт (P).
Согласно международной номенклатуре (табл.), все ферменты подразделяются на 6 классов в зависимости от типа катализируемых ими реакций.
Таблица – Классификация ферментов
№ п/п | Название класса ферментов | Типы катализируемых реакций |
Оксидоредуктазы | Окислительно-восстановительные | |
Трансферазы | Перенос атомных групп и молекулярных остатков | |
Гидролазы | Гидролиз | |
Лиазы | Негидролитическое расщепление С–С, С–О, С–N, С–S, P–О связей, а также отщепление различных групп с замыканием двойной связи | |
Изомеразы | Изомеризация | |
Лигазы | Соединение 2 молекул с использованием высокоэнергетических соединений |
Особенности измерения активности ферментов, описываемые в фармакопейных статьях, определяется их принадлежностью к тому или иному классу.
Принцип, положенный в основу всех методов определения активности фермента (Е), заключается в регистрации скорости убыли субстрата (S) (то есть вещества, на которое действует фермент) или скорости образования продукта реакции (P).
E + S ES E + P, |
kкат |
(1)
где: Е – фермент;
S – субстрат;
P – продукты реакции;
kкат – каталитическая константа.
Начальная скорость (υo) катализируемой ферментом реакции, при которой расходом субстрата можно пренебречь, описывается уравнением Михаэлиса–Ментен (2):
υo = | kкат [E]0 [S]0 | = | Vмакс [S]0 | ,(2) |
Kм + [S]0 | Kм + [S]0 |
где: Vмакс = – максимальная скорость реакции;
[E]0 – начальная концентрация фермента;
Kм – константа Михаэлиса.
Для аллостерических ферментов начальная скорость ферментативной реакции не подчиняется уравнению Михаэлиса–Ментен.
Для определения скорости ферментативной реакции через определенные промежутки времени отбирают пробы из реакционной смеси и проводят количественное определение методами, основанными чаще всего на спектральных свойствах субстрата или продукта реакции.
Дата добавления: 2016-01-30; просмотров: 677;