Робота 7 Підрахунок лейкоцитів

Лейкоцити, або білі кров’яні тільця, мають багато різновидів і виконують різні захисні високоспеціалізовані функції. З цих причин кількість лейкоцитів змінюється протягом короткого часу у здорових людей ( від 4 · 10⁹ /л до 9 х 10⁹ /л ).

Розведення крові для підрахунку лейкоцитів найкраще проводити за допомогою змішувача – меланжера.

Рисунок 31 -Змішувач для лейкоцитів

У клініці для розведення крові використовують й інші способи.Наприклад, у суху пробірку спочатку наливають 0,4 мл 3% розчину оцтової кислоти, що забарвлена метиленовим синім, а потім додають 0,02 мл крові. Набирати кров можна будь-якою піпеткою, але щоб на ній були відповідні поділки. При цьому важливо дотримуватися співвідношення 1:20. Оцтова кислота потрібна під час підрахунку лейкоцитів для того, щоб зумовити гемоліз еритроцитів, а метиленовий синій – для контрастування ядер лейкоцитів, тобто для зручності підрахунку.

Мета роботи - підрахувати кількість лейкоцитів у камері Горяєва.

Для роботи потрібні: мікроскоп, освітлювач, камера Горяєва, покривне скло, змішувач для лейкоцитів, штатив з пробіркою, 3% розчин оцтової кислоти, 96% спирт етиловий, вата, гумова груша.

Хід роботи

1 Приготувати для роботи камеру Горєва:

· знежирити спиртом і витерти насухо камеру і покривне скло;

· притерти покривне скло до камери;

· знайти під малим збільшенням мікроскопа сітку.

2 Приготувати для роботи кров:

· на верхній отвір змішувача надіти гумову грушу;

· до позначки 0,5 набрати кров, ватним тампоном зняти надлишок крові з носика капіляра;

· не випускаючи кров із капіляра, до позначки 11 набрати 3% розчин оцтової кислоти ;

· обережно струшуючи змішувач, перемішати розчин із кров’ю в його ампулі ( для полегшення змішування в ній є маленька прозора намистинка). Кров буде розведена у 20 разів.

3 Заповнити камеру кров’ю:

· перші дві краплі розчину, що йдуть з капіляра меланжера, видути на вату;

· наступні краплі з ампульного розчину помістити в камеру. Для цього кінчик меланжера поставити на край камери біля покривного скла й легенько натиснути на грушу. Розчин зайде під покривне скло в камеру й заповнить її. Почекати 1-2 хв, щоб лейкоцити осіли на дно камери.

4 Підрахувати кількість еритроцитів:

· знайти кількість лейкоцитів у 100 великих, не розкреслених квадратах. Для точності розрахунок слід проводити по всій площині сітки, починаючи з верхнього лівого краю;

· розрахувати кількість лейкоцитів у 1 мкл крові за формулою:

Л = (а · 4000 · 20) / 1·100·16,

де Л – кількість лейкоцитів у 1 мкл;

а - кількість лейкоцитів у 100 великих квадратах сітки;

100 – кількість великих квадратів;

16 – кількість малих квадратів;

20 – ступінь розведення крові;

1/4000 мм³ - об’єм 1 маленького квадрата.

Для підрахунку можна використовувати спрощену формулу:

Л = (а :2) · 10².

• Знайти кількість лейкоцитів в 1 л крові,

для цього Л ·10⁶.