Хід роботи. 1 Приготувати для роботи камеру Горяєва: знежирити спиртом і витерти насухо камеру і покривне скло; притерти покривне скло до камери до появи кілець
1 Приготувати для роботи камеру Горяєва:
- знежирити спиртом і витерти насухо камеру і покривне скло;
- притерти покривне скло до камери до появи кілець Ньютона;
- знайти під малим збільшенням мікроскопа сітку.
2 Приготувати для роботи кров:
· на верхній отвір змішувача надіти гумову грушу;
· до позначки 0,5 набрати кров, ватним тампоном зняти надлишок крові з носика капіляра;
· не випускаючи кров із капіляра, до позначки 101 набрати 3% розчин натрію хлориду;
· обережно струшуючи змішувач, перемішати розчин із кров’ю в його ампулі ( для полегшення змішування в ній є маленька червона намистинка). Кров буде розведена у 200 разів.
3 Заповнити камеру кров’ю:
· перші дві краплі розчину, що йдуть з капіляра, видути на вату;
· наступні краплі з ампульного розчину помістити в камеру. Для цього кінчик меланжера поставити на край камери біля покривного скла й легенько натиснути на грушу. Розчин зайде під покривне скло в камеру й заповнить її. Почекати 1-2 хв, щоб еритроцити осіли на дно камери.
4 Підрахувати кількість еритроцитів:
· знайти кількість еритроцитіву 5 великих квадратах сітки по діагоналі. Під час підрахунку еритроцитів треба пам’ятати правило Бюркера: у маленьких квадратах рахувати ті клітини, що містяться посередині квадрата сітки, а також на його верхньому та лівому боках. Це потрібно для того, щоб двічі не рахувати еритроцити, що містяться на боках суміжних квадратиків;
· розрахувати кількість еритроцитів у 1 мкл крові за формулою
Е = (а · 4000 · 200) / 1·5·16,
де Е – кількість еритроцитів у 1 мкл;
а - кількість еритроцитів у 5 великих квадратах сітки;
5 – кількість великих квадратів;
16 – кількість малих квадратів;
200 – ступінь розведення крові;
1/4000 мм3 - об’єм 1 маленького квадрата.
Для підрахунку можна використовувати спрощену формулу:
Е = а ·104.
• Знайти кількість еритроцитів в 1 л крові, для цього Е·106.
Рекомендації щодо оформлення результатів роботи.
ü Замалювати змішувач для еритроцитів.
ü Записати процес підрахунку кількості еритроцитів.
ü Визначити кількість еритроцитів в 1 л крові.
У висновках відповісти на запитання:
Чи нормальна кількість еритроцитів у досліджуваній крові?
Робота 5 Колориметричний метод кількісного визначення рівня гемоглобіну в крові (метод Салі)
Метод Салі застосовується для визначення кількості гемоглобіну в крові.
Принцип методу полягає в наступному. При додаванні до крові соляної кислоти гемоглобін перетворюється на хлористоводневий гематин коричневого кольору, інтенсивність якого прямо пропорційна вмісту гемоглобіну. Отриманий розчин хлористоводневого гематину розводять водою до кольору стандарту.
Цей метод визначення кількості гемоглобіну дає результати з точністю до 10 %. Помилка пов’язана із самою технікою визначення і можливими суб’єктивними помилками у визначенні кольору. Однак метод дуже поширений, оскільки зручний і простий.
Для визначення використовують гемометр Салі. Це штатив з трьома пробірками. У крайніх запаяних пробірках міститься 1% розчин хлористоводневокислого гематину. Середня пробірка має поділки від 0 до 23 х 10 г/л і призначена для визначення гемоглобіну в досліджуваній крові.
У нормі кількість гемоглобіну становить у чоловіків 140 – 160 г/л , у жінок – 120 – 140 г/л.
Рисунок 29 -Гемометр Салі: а – пробірки зі стандартним розчином солянокислого гематину; б – пробірка для визначення гемоглобіну
Мета роботи - визначити й оцінити кількість гемоглобіну в крові досліджуваного.
Для роботи потрібні: гемометр Салі, піпетка, скляна паличка, 0,1N розчин хлористоводневої кислоти, дистильована вода, 96% спирт етиловий, вата, гумова груша.
Дата добавления: 2015-02-16; просмотров: 708;