Метод Тенфорда определения разности свободной энергии денатурированного и нативного белка по денатурации в растворе мочевины

Для изменения свободной энергии денатурации белка в растворе мочевины можно записать:

ΔFu = RTlnKu = RTln , где и − концентрации денатурированного и нативного белка.

δ(ΔF) = ΔFu - ΔFH O = ΔFД – ΔFN.

δ(ΔF) = .

ni – число групп (звеньев) типа i в белке.

αi – численный параметр, зависящий от степени доступности растворителю групп данного типа в нативной конформации.

ΔFi – вклад групп типа i в свободную энергию перехода.

αi (пептидн.) 0.5;

αi (полярн.) 0.25;

αi (гидроф.) 0.75;

ΔFi определяется из данных о растворимости аминокислот в воде и в растворе мочевины данной концентрации. Для концентрации мочевины (C ), при которой [Д] = [N] (ΔFu = 0), тогда

ΔFH O =− δ(ΔF) =− .

 

 

3.32. Калориметрические измерения денатурационных изменений в белках

Денатурацию рассматривают как мономолекулярную реакцию перехода из нативного состояния белка (N) в денатурированное (Д):

N←→ Д

В калориметрии измеряют ΔН или ΔСр, сопровождающие эти переходы. В соответствии с формулой Киргоффа изменение энтальпии при плавлении:

ΔН = , где Cp(T) − теплоёмкость при постоянном давлении.

В обычных измерениях подводят теплоту к образцу: и регистрируют скорость повышения температуры образца ( ).

Чувствительность микрокалориметров высокая, примерно 10-7 Вт.

ΔСpd – это разность теплоемкостей белка в нативном и денатурированном состояниях при температуре перехода Td.

ΔНден = - - = ΔНd - ,

где ΔНd − молярная энтальпия перехода.

Для энтропии:

ΔSден = - .

Свободная энергия Гиббса для процесса денатурации (ΔFден ) запишется в виде:

ΔFден = ΔНден - T1 ΔSден = ΔНd - .

 

 








Дата добавления: 2015-02-07; просмотров: 950;


Поиск по сайту:

При помощи поиска вы сможете найти нужную вам информацию.

Поделитесь с друзьями:

Если вам перенёс пользу информационный материал, или помог в учебе – поделитесь этим сайтом с друзьями и знакомыми.
helpiks.org - Хелпикс.Орг - 2014-2024 год. Материал сайта представляется для ознакомительного и учебного использования. | Поддержка
Генерация страницы за: 0.005 сек.