Стандартные образцы псоралена и изопсоралена готовит и распределяет институт химии растительных веществ АН УзССР.

Реактивы и оборудование: этиловый спирт (этанол); формами д; метиловый спирт (метанол); н-гексан; бензол; NaOH, 0,05 н; диазореактив (ГФ X); изопсоралена и псоралена стандартный раствор (0,0025—0,0030 мг/мл в 95%-ном этиловом спирте).

Бумага хроматографическая марки «Б»; бюксы с притертыми крышками; набор сит; кофемолка; колбы с нормальным шлифом вместимостью 100 мл; стек­лянные шарики; вибрационный аппарат, термостат; мерные колбы вместимостью 50 мл; фильтры стеклянные № 1; микропипетки измерительные вместимостью 1 мл; камеры хроматографические для БХ; химископ 4П-1; колбы конические вмести­мостью 25 мл; фотоэлектроколориметр ФЭК-М.

Методика количественного определения кумаринов в листьях инжира Folium Ficus caricae (ВФС42-878-79). Листья культиви­руемого кустарника или дерева смоковницы обыкновенной (ин­жира) (Ficus carica L) семейства тутовых (Moraceae) используются в качестве лекарственного сырья для получения препарата «Псо- беран», представляющего собой смесь псоралена и бергаптена. Количественное определение псоралена и бергаптена проводится хроматоспектрофотометрическим методом.

Около 5 г (с погрешностью до 0,01 г) листьев инжира, измельчен­ных и просеянных сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, по­мещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл; заливают 50 мл 60 %-ного водного ацетона и интенсивно встряхивают в течение 3 ч на вибрационном аппарате и настаивают 15 ч. Извлечение отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр.

Стеклянную пластинку размером 13 X 18 см с незакрепленным слоем нейтрального оксида алюминия (II) делят на 4 части. На стартовую линию двух частей наносят в виде полосы по 0,1 мл по­лученного извлечения: на третью — 25 мл раствора стандартного образца псоралена (раствор А); четвертая часть служит фоном (кон­трольная проба) при спектрофотометрировании. Пластинку с на­несенными пробами высушивают на воздухе в течение 10 мин, а затем помещают в камеру с этиловым эфиром и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до исчезно­вения запаха этилового эфира (1—2 ч) и просматривают в УФ све­те при Я = 254 нм. Псоберан проявляется в виде голубого пятна на уровне пятна стандартного образца псоралена. Отмеченную зону сорбента с псобераном переносят в колбу со шлифом вмести­мостью 50—100 мл, заливают 20 мл 95 %-ного этилового спирта, закрывают пробкой и элюируют в термостате при t = 40—50 °С в течение 3 ч.

После охлаждения элюат отфильтровывают через воронку со стеклянным фильтром № 4 (элюат должен быть прозрачным) и опре­деляют его оптическую плотность на спектрофотометре при длинах волн 246, 268 и 298 нм в кювете с толщиной слоя 1 см по отношению к элюату (95 %-ный этиловый спирт) с равным по площади окси­дом алюминия, хроматографированного в тех же условиях без ве­щества (контрольная проба).

Параллельно при тех же длинах волн измеряют оптическую плот­ность раствора стандартного образца псоралена.

Процентное содержание псоберана х в пересчете на абсолютно сухую массу вычисляют по формуле

РхАУУуЮО • 100 ^х"^а D„ml/i(100—w)'

где D₁ — оптическая плотность испытуемого раствора при к = = 298 нм; D₀ — оптическая плотность раствора стандартного образца псоралена при "К = 298 нм; А — концентрация раствора стандартного образца псоралена, г/мл; т — масса навески, г; V — общий объем извлечения, мл; V₁ — объем извлечения, на­несенного на хроматограмму, мл; V₂ — объем элюата, мл; w — потеря в массе сырья при высушивании, %.

Процентное содержание псоралена х в пересчете на абсолютно сухую массу вычисляют по формуле

(Р»«° —Dj">) ДУУ_г100-100

(024в_£>268) /ИК, (100 — W) '

где D*^ie и Df^s — оптическая плотность испытуемого раствора при длинах волн 246 и 268 нм; D²⁴⁸ и D^2m — оптическая плотность раствора стандартного образца псоралена при длинах волн 246 и 268 нм; А — концентрация раствора стандартного образца псо­ралена, г/мл; т — масса навески сырья, г; У — общий объем из­влечения, мл; Vj — объем извлечения, нанесенного на хромато- грамму, мл; V₂ — объем элюата, мл; w — потеря в массе сырья при высушивании, %.

Содержание псоберана не менее 0,7 %. Содержание псоралена не менее 0,42 %.

Приготовление стандартного образца псоралена. 0,05 г (точная навеска) стандартного образца псоралена (ВФС 42-532-76) раство­ряют при энергичном встряхивании в 95%-ном этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 200 мл и доводят объем раствора тем же спиртом до метки (раст­вор А). 0,6 мл раствора А вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора 95%-ным этиловым спиртом до метки (раствор В). Раствор хранят в темноте в колбе с притертой пробкой. Срок хранения 6 мес 1 мл раствора стан­дартного образца содержит 0,000006 г псоралена

Приготовление 60% -ного водного раствора аце­тона. Смешивают 600 мл ацетона и 400 мл воды.

Реактивы и оборудование: ацетон; А1(ОН)₃; псорален; этиловый эфир; этиловый спирт (этанол).

Колбы с притертой пробкой вместимостью 250 мл, с нормальным шлифом вместимостью 100 мл; пластинки стеклянные для ТСХ размером 13 X 18 см; фильтры стеклянные № 4; бумага фильтровальная; термостат; спектрофотометры СФ-4А, СФ-6; УФ-лампа; колбы мерные вместимостью 25, 250 мл; камера хро- матографическая для ТСХ; весы лабораторные аналитические.

ВопросыДЛЯ ПОДГОТОВКИ