Этап. Предварительное холодовое обогащение в неселективной жидкой среде.

Общепризнанным методом обогащения исследуемого материала при исследованиях на иерсиниозы является метод холодового обогащения, основанный на способности иерсиний размножаться в питательных субстратах при низких плюсовых температурах. При этом используется и способность данных микроорганизмов расти на голодных средах.

Исследуемый материал растирают в ступках. Вносят в пробирки со стерильной средой обогащения (например, 1%-я пептонная вода с добавлением K₂HPO₄) в соотношении 1:5. Пробирки или колбы помещают в холодильник при температуре +4^о С. На жидких питательных средах в первые сутки образуется помутнение, затем появляется осадок и плёнка на поверхности среды.

2 этап. Посев на плотные питательные среды. Из середины столбика надосадочной жидкости, не взбалтывая, бактериологической петлёй делают пересев на плотные дифференциально-диагностические среды СБТС (среда с бромтимоловым синим), Мак-Конки, цефсулодин-иргазан-новобиоциновый агар, дезоксихолатный агар, среду Серова. Иерсинии растут и на среде Эндо, но на этой среде наблюдается также активный рост посторонней микрофлоры, поэтому она не рекомендуется для культивирования иерсиний.

Чашки с посевом инкубируют при 22-25^оС, чашки со средой СБТС – при 37^оС. Пересев производят петлёй из верхней трети среды накопления, но не с поверхности, перед пересевом содержимое не взбалтывают.