Робота 12

Визначення вмісту каротину в рослинах (за методом Попандопуло)

Каротин у рослинах міститься у вигляді α-, β- і γ-ізомерів. Вміст β-ізомеру переважає над іншими. β-каротин є у складі світлозбирального комплексу хлоропластів і має важливе значення для процесу фотосинтезу, також він може функціонувати як антиоксидант. Відомо, що за умов дії стресових чинників середовища в усіх живих організмах порушується рівновага прооксидантно-антиоксидантної системи біологічних мембран, зокрема, активуються реакції перекисного окислення ліпідів мембран. Це ініціює включення механізмів захисту, бо зміни фізико-хімічних властивостей мембран є небезпечними для клітини. Серед механізмів захисту стану мембран у рослинних клітинах заслуговує уваги нагромадження речовин з антиоксидантними властивостями. Це вітаміни С, Е, каротиноїди та ін. Як антиоксидант β-каротин здатний виводити вільні радикали з обігу ланцюгових реакцій.

Аналіз вмісту каротину у рослинах дає уявлення про якість продуктів харчування та якість кормів. Визначення вмісту каротину грунтується на його властивості добре екстрагуватися неполярними органічними розчинниками.

Мета роботи: показати, що вміст каротинів – це сортозалежна ознака.

Прилади і матеріали дослідження: фотоколориметр КФК-3; торзійна вага, фарфорові ступки з товкачиками, фільтри Шота №3, колба Бунзена, конічні колби на 200 мл, мірний циліндр на 30 мл; лійка, бите скло, петролейний ефір, Na₂SO₄, коренеплоди моркви різних сортів.

Хід роботи.

1.Шматки досліджуваних коренеплодів моркви подрібнюють за допомогою терки. Наважку подрібненого матеріалу 5-10 г ретельно розтирають у фарфоровій ступці з битим склом або піском із додаванням петролейного ефіру.

2.Кількісно переносять розтертий матеріал за допомогою петролейного ефіру із ступки у конічну колбу на 200 мл, на дно якої насипано Na₂SO₄ шаром 1,5 см, і заливають петролейним ефіром до повного покриття рослинного матеріалу. Колбу закривають корком і ставлять на добу в темне місце.

3.Вміст конічної колби поступово фільтрують за допомогою скляного фільтра Шота №3, що з‘єднаний із колбою Бунзена. Осад і адсорбент промивають розчинником до знебарвлення розчинника, який витікає із фільтра.

4.Вимірюють об‘єм отриманого екстракту і колориметрують при синьому світлофільтрі (440 нм).

5.Вміст каротину розраховують за формулою:

X= D·V·k / m, де

X - вміст каротину, мг/г;

D – оптична густина екстракту,

V – об‘єм екстракту,

k – коефіцієнт переведення стандартного розчину дихро-мату калію K₂Cr₂O₇ чи азобензолу в еквівалентну кількість каротину; при використанні дихромату калію k=0,00416, азобензолу – k=0,00235;

m – маса проби, г.

6.Дані заносять у таблицю:

7.Висновки.