Серийные разведения в жидких средах
С помощью этого метода можно установить МИК и МБК препарата для исследуемого микроорганизма. Для исследования можно брать различные объемы питательной среды (1-10 мл). Обычно в 7 пробирках готовят серию двойных разведений препарата на жидкой питательной среде. Концентрацию препарата уменьшают соответственно от 100 до 3,12 мкг/мл в зависимости от активности препарата. Объем среды в каждой пробирке составляет 1 мл. Для контроля берут пробирку, содержащую чистую питательную среду. В каждую пробирку вносят по 0,05 мл физиологического раствора, содержащего 106 /мл микробных клеток. Пробирки ставят в термостат на 10-18 часов при температуре 370С. Результаты учитывают по изменению оптической плотности среды визуально или нефелометрически. Можно использовать модифицированный метод, используя среду, дополненную глюкозой и индикатором. При росте микроорганизмов происходит изменение рН среды и окраски индикатора. Интерпретацию результатов осуществляют на основании критериев приведённых в таблицах 2,3.
Таблица – 2. Определение МПК антимикробных препаратов методом серийных разведений
| Номер пробирки | Разведение антибиотика | Концентрация антибиотика мкг/мл | Рост бактерий (помутнение среды) |
| 1:100 | - | ||
| 1:200 | - | ||
| 1:400 | - | ||
| 1:800 | 12,5 | - | |
| 1:1600 | 6,25 | + | |
| 1:3200 | 3,12 | + | |
| Среда без антибиотика (контроль) | - | + |
Таблица – 3. Интерпретация результатов определения чувствительности бактерий к антибиотикам методом серийных разведений.
| Антибиотик | МПК (мкг/мл) | ||
| Чувстви- тельные (S) | Промежу- точные (I) | Устойчи- вые (R) | |
| Пенициллины Бензилпенициллин: · для стафилококков; · для других бактерий. | ≤0,12 ≤1,5 | - - | >0,25 >1,5 |
| Оксациллин: · для Staphylocoocus aureus; · для других стафилококков. | ≤2 ≤0,25 | - - | ≥4 ≥0,5 |
| Метициллин | ≤2 | - | >4 |
| Ампициллин: · для стафилококков; · для E. cоli и др. бактерий. | ≤0,25 ≤8 | - | ≥0,5 ≥32 |
| Карбенициллин: · для E. cоli и др. бактерий; · для Pseudomonas aeruginosa. | ≤16 ≤128 | ≥64 ≥512 | |
| Пиперрациллин: · для E. cоli и др. бактерий; · для Pseudomonas aeruginosa. | ≤16 ≤64 | - | ≥64 ≥182 |
| Азлоциллин | ≤64 | - | ≥128 |
| Цефалоспорины Цефазолин Цефалотин Цефаклор Цефалексин Цефуроксим Цефамандол Цефотаксим Цефтриаксон Цефоперазон Цефтазидим Цефепим | <8 <8 <8 ≤8 <8 <8 <8 <8 <16 <8 <8 | 16-32 16-32 | >32 >32 >32 ≥32 >32 >32 >64 >64 >64 >32 >32 |
| Новые бета-лактамы Имипенем Меропенем | <4 <4 | >16 >16 | |
| Хинолоны Налидиксовая кислота Ципрофлоксацин Офлоксацин Норфлоксацин | ≤16 ≤4 ≤2 ≤4 | - | ≥32 ≥4 ≥8 ≥16 |
| Аминогликозиды Канамицин Гентамицин Тобрамицин Амикацин Нетилмицин | ≤16 ≤4 ≤4 ≤16 ≤8 | ≥64 ≥16 ≥16 ≥64 >32 | |
| Тетрациклины, макролиды, линкозамиды Тетрациклин Доксициклин Эритромицин Азитромицин Кларитромицин Алендомицин Линкомицин Клиндамицин | ≤2 ≤4 ≤0,5 ≤2 ≤2 ≤2 ≤2 ≤0,25 | 4 – 8 1 – 4 0,5 | ≥16 ≥16 ≥8 ≥8 ≥8 ≥8 ≥8 ≥1 |
| Антибиотики других групп Хлорамфеникол (левомецитин) Фузидиевая кислота Рифампицин Полимиксин Ванкомицин Фурадонин | ≤8 ≤2 ≤2 <50 ЕД/мл ≤4 ≤32 | 4 – 8 8 – 16 | ≥32 ≥16 ≥8 ≥50 ЕД/мл ≥32 ≥128 |
Дата добавления: 2017-03-29; просмотров: 659;