Посевы (пересевы) на плотные среды

Самым частым методом пересева бактерий является посев в пробирку с косым агаром. Он включает следующие этапы.

1. Пробирку с чистой культурой на косом агаре берут в левую руку в наклонном горизонтальном положении между большим пальцем и первой пястной костью. Скошенная поверхность агара повернута к глазам и должна быть вся видна. Сверху (рядом) с пробиркой с культурой помещают точно в таком же положении пробирку с незасеянной питательной средой. Пробирки держат в таком положении, не выпуская их и не переставляя во время всей манипуляции пересева (рис.5.).

2. Взяв в правую руку петледержатель, как писчее перо, стерилизуют петлю в пламени горелки.

3. Мизинцем правой руки плотно захватывают наружные концы ватных пробок, прижав их к ладонной поверхности руки, и вынимают пробки из пробирок. При дальнейших манипуляциях следят, чтобы пробки ни к чему не прикасались.

4. Обжигают края пробирки на пламени горелки.

5. Вводят петлю в пробирку с культурой. Прикоснувшись петлей к участку среды, свободному от "микробного газона", убеждаются, что петля остыла (агар не должен "кипеть" под петлей), берут полную петлю культуры.

6. Быстро переносят петлю с взятым материалам в пробирку с питательной средой, не задевая краев и стенок обеих пробирок.

7. Опуская петлю до конденсационной воды, находящейся у дна пробирки, делают посев культуры на окошенной поверхности среды одним из трех способов: а) посев чертой - проводят петлю по прямой линии по середине питательной среды от конденсационной воды до верхнего края; б) посев "штрихом" - проводят зигзагообразную линию, скользя петлей по поверхности среды от одного края пробирки к другому, поднимая штрихи от конденсационной воды до верхушки среды; в) посев сплошным газоном - растирают материал непрерывными круговыми движениями по всей поверхности питательной среды.

8. Вынимают петлю из пробирки. Быстро обжигают края пробирки, внутренние концы пробок и закрывают пробирки.

9. Тщательно прокаливают петлю. Прокаливание петли начинают о участка проволоки, примыкающего к кольцу, для того, чтобы микробная масса, оставшаяся на петле, подсохла. Затем петлю переводят в вертикальное положение и прокаливают докрасна. Такой порядок стерилизации петли необходим потому, что при быстром нагревании влажной микробной массы происходит ее разбрызгивание и образование аэрозоля, что может загрязнить воздух. Только после прокаливания петлю можно положить на место (в штатив).

10.Отставив в сторону пробирку с исходной культурой, но не выпуская из рук вновь засеянной пробирки, подписывают (если этого не было сделано заранее) на ней название засеянного микроорганизма и дату посева. Только после этого пробирку с посеянным материалом ставят в штатив или коробку, которую затем помещают в термостат на сутки-двое для выращивания культуры.