Кинетические методы измерения

Кинетические методы измерения – это методы, когда изменения оптической плотности регистрируются во времени и измеряется скорость изменения, которая пропорциональна либо концентрации исследуемого вещества, либо активности этого вещества (например, ферментов). Расчет производится либо по фактору, либо по стандарту. Активность ферментов обычно вычисляется по фактору:

1.Измерение «по конечной точке» (одноточечная кинетика)Он заключается в измерении оптической плотности на линейном участке кинетической кривой по истечении определенного четко фиксированного отрезка времени от начала реакции (внесения исследуемой пробы в реакционную смесь). Такой способ называют еще одноточечной кинетикой. Как правило, по истечении указанного отрезка времени в реакционную смесь добавляют реагент, останавливающий ферментативную реакцию, например щелочь или кислоту. Отсюда и название метода – «по конечной точке», т. е. с остановкой реакции

2.Расчет с калибровкой по стандарту:

В случае калибровки по стандарту, расчет происходит по той же самой формуле, только здесь фактор не является параметром, заданным в методике на реагенты, а вычисляется по формуле:

3.Измерение многоточечное, или кинетическое. При этом способе оптическую плотностьна линейном участке кинетической кривой определяют 3–5 и болеераз через четко фиксированные равные интервалы времени. Многоточечная кинетика используется только для биохимических анализаторов, так как в ручном варианте это достаточнотрудоемко. На этом способе основано, например, определениеактивности АЛТ и АСТ.