Вторичная структура ДНК и РНК. Комплементарность азотистыx оснований.
Вторичная структура ДНК образ-ся за счет взаимод нуклеотидов (в большей степени азотистых оснований) между собой, водородных связей. Классич пример вторичн структуры ДНК - двойная спираль ДНК – это сам распростр в природе форма ДНК, сост из двух полинуклеотидных цепей ДНК. Построение каждой новой цепи ДНК осуществл по принципу комплементарности, т.е. каждому азотистому основанию одной цепи ДНК соотв строго опред основание др цепи: в комплемнтарной паре напротив A стоит T, а напротив G располагается C и т.д.
Вторичная структура матричных и рибосомных РНК. Относительно вторичной структуры тРНК наиб вероятной представл-ся модель, предложенная Р. Холли, плоское изображение в форме клеверного листа. Последовательность почти всех природных тРНК укладывается в эту схему «клеверного листа». При сравнении этих структур выявл ряд закономерностей, имеющих опред биол смысл.Принцип комплементарности используется в синтезе ДНК. Это строгое соответствие соединения азотистых оснований, соединёнными водородными связями, в котором: А-Т (Аденин соединяется с Тимином) Г-Ц (Гуанин соединяется с Цитозином) Денатурация ДНК происходит при нагревании раствора до 70-100 °С, а также в сильнокислой или щелочной средах, или в растворе мочевины. В результате разрушения водородных и гидрофобных связей цепи расходятся и принимают конфор-мацию беспорядочного клубка. Температура денатурации зависит от состава ДНК: чем больше в ДНК нуклеотидных пар ГЦ, тем выше температура денатурации.
Денатурация данного образца ДНК происходит в довольно узком интервале температур, поэтому ее часто называют плавлением.
10. Денатурация и ренативация ДНК. Гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК.
Денатурация - расхождение цепей ДНК при нагревании ~1000C или при повыш. pH. Расхождение цепей происх. из-за разрушения слабых водородных связей и плоскостных взаимод. между осн-ми. На денат. также влияют: ионы одно- и двухвалентных металлов, белки, нейтрализ. отриц. заряды фосфат.
Ренатурация, происходит припониж.температуры или рН При резком пониж. t или рН правильное воссоед. комплем. цепей затрудняется из-за спарив. осн-й локально компл-х участков в пределах одной или разных цепей. При ренатурации сначало соединяются участки цепей с повторенной ДНК и затем с уникальными участками.
Гибридизация ДНК, гибридизация нуклеиновых кислот - комбинирование комплементарных одноцепочечных нуклеиновых кислот в одну молекулу. При полной комплементарности объединение происходит легко, а в случае отличий слияние цепочек замедляется, что позволяет оценить степень комплементарности. Возможна гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК.Гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК используется как эффективное средство в молекулярной генетике, судебной медицине, антропологии для установления генетического родства между видами.
Дата добавления: 2015-07-22; просмотров: 2223;