Иммунорадиометрический анализ (ИРМА)

Определение антител с помощью изотопной метки получило название иммунорадиометрического анализа. В качестве примера ИРМА рассмотрим радиоаллергосорбентный тест (РАСТ).

РАСТ (рис. 3.) был разработан в начале 1970-х (Wide L.) для определения аллерген-специфических IgE в сыворотке крови. Аллерген сорбировали на пористом носителе (бумага, полимерные мембраны, гранулы, губки). Далее добавляли сыворотку пациента, инкубировали 3 часа, отмывали и добавляли антиглобулиновую сыворотку (против IgE), меченную радиоактивным изотопом. После отмывки несвязавшихся реагентов, радиоактивность учитывали на счетчике.

Рисунок 3. Схема радиоаллергосорбентного теста

Первые тесты характеризовались низкой чувствительностью, плохо коррелировали с клиникой и другими аллергологическими тестами (прик-тесты) и не нашли широкого применения. В конце 70-х были предложены РАСТ второго поколения (большая чувствительность за счет меньшей специфичности и большей продолжительности теста; тесты по-прежнему носили качественный характер). Наконец, в 80-х – 90-х годах распространились РАСТ третьего поколения (большая чувствительность и специфичность за счет применения моноклональных антител против IgE, автоматизации, использования флуорохромных, ферментных меток или электрохемолюминисценции; применение IgE стандартов ВОЗ позволило получать количественные результаты).

В целом, применение изотопных меток (РИА, ИРМА) сыграло важную роль в становлении иммуноанализа. Именно эти методы впервые раскрыли потенциал иммуноанализа и дали толчок к его разработке и коммерческому применению. Тем не менее, недостатки данного подхода (в первую очередь небезопасность, трудности разработки, транспортировки, хранения, утилизации отходов, необходимость применения дорогостоящего оборудования и др.) привели к вытеснению методов, основанных на радиоактивной метке, альтернативными.