Элиспот (ELIspot), ЭС

ЭС – метод определения клеток, секретирующих определенные продукты (цитокины, антитела, медиаторы и др.). ЭС основан на тИФА по принципу «сэндвича», однако специфический продукт, секретируемый клетками, захватывается и определяется в месте секреции. Таким образом удается избежать его разведения в культуральной жидкости, ферментации клеточными протеазами, потребления клетками культуры, связывания с клеточными или растворимыми рецепторами. После удаления культуры захваченный продукт визуализируется вторыми моноклональными антителами к другому эпитопу продукта, меченными ферментом. После добавления субстрата в местах секреции продукта появляется окрашивание (в виде пятен/точек по принципу: одна специфическая клетка-продуцент – одно пятно). Результат выражается в количестве (проценте) клеток-продуцентов. Несмотря на то, что оба метода основаны на тИФА, они имеют существенные отличия (см. табл. 2).

ЭС применяется для определения секреции цитокинов, антител, биоактивных веществ и медиаторов с целью определения функционального состояния иммунных клеток (цитокиновый профиль, поляризация иммунного ответа Th1-Th2-Th3, функция клеток-регуляторов), секреции специфических и общих IgE и др. для диагностики, мониторинга и контроля терапии аллергии, аутоиммунных заболеваний, трансплантационного иммунного ответа, противоопухолевого иммунитета и т.д. Следует отметить, что ЭС к настоящему времени не нашел широкого применения из-за относительной сложности и дороговизны соответствующих тест-систем.

Таблица 2. Отличия тИФА и Элиспот