Радиоиммунный анализ (РИА)
РИА разработан в 50-х годах прошлого века Yalow R.S. и Berson S.A. (определение инсулина). РИА (рис. 2.) основан на конкуренции определяемого антигена из клинического материала с определенным количеством идентичного, меченного изотопом, антигена с ограниченным количеством антител. Связанные антигены отделяются от свободных добавлением антиглобулиновой сыворотки, белка А стафилококков или микробус, меченных антителами к иммуноглобулинам, и центрифугированием. Супернатанты отбрасываются, а остаточная радиоактивность измеряется на гамма-счетчике. При указанной схеме постановки радиоактивность обратно пропорциональна содержанию антигена в образце.
Рисунок 2. Схема радиоиммунного анализа
Таким образом, РИА является конкурентным гетерогенным методом исследования. Основными преимуществами РИА является высокая чувствительность и специфичность. Применение изотопной метки и мечение антигена обеспечивают высокий уровень соотношения сигнал/шум и низкое неспецифическое связывание метки.
Разработан также твердофазный РИА (разделение связавшихся и свободных антигенов достигается простой промывкой флаконов/планшет).
Дата добавления: 2015-02-23; просмотров: 2124;