Приготовление О- и Н-антигенов

Соматический 0-антиген бактерий является по своему составу сложным химическим комплексом, специфичность ко­торого определяется глюцидолштоидополипептидпым компо­нентом.

Этот антиген устойчив к воздействию температуры, спирта в противоположность жгутиковому Н-антигену. Эта различная устойчивость О- и Н-антигенов к нагреванию и спирту поло­жена в основу приготовления 0-антигена.

Наиболее простым способом приготовления 0-антигена является прогревание пробирки со смывом агаровой культуры соответствующего микроорганизма в кипящей водяной бане в течение 1,5—2 часов (по Кауфману достаточно 30 минут).

Для приготовления спиртового 0-антигена берут возможно более густую взвесь микробов в физиологическом растворе (смыв агаровой культуры). К определенному объему взвеси маленькими порциями медленно добавляют равный объем абсолютного этилового спирта, причем после добавления каж­дой его порции пробирку с антигеном встряхивают. После до­бавления всего объема спирта пробирку помещают в термостат на 12—24 часа, после чего в нее добавляют физиологический раствор в количестве половины объема жидкости, содержащей­ся в данной пробирке (концентрация спирта—33%). Перед употреблением полученный антиген разводят еще в 6 раз.

Приготовление жгутикового Н-антигена основано на том, что обработка подвижных микробов формалином приводит к по­нижению активности соматического антигена. Для приготовле­ния жгутикового антигена к взвеси агаровой культуры микро­бов в физиологическом растворе добавляют 0,2% формалина, после чего взвесь выдерживают в термостате при 37° в течение 24 часов.

Агглютинирующая диагностическая сыворотка содержит антитела, полученные из сыворотки крови гипериммунизироанных животных, предназначена для постановки реакций агглютинации

Определение антигенного состава Х-культуры с помощью неадсорбированных и адсорби­рованных агглютинирующих сывороток.