Метод адсорбции агглютининов по Кастеллани

При постановке реакции агглютинации иногда наблюдается явление групповой агглютинации, когда сыворотка больного (а иногда и агглютипирующая диагностическая сыворотка) агглютинирует не один вид микро­ба, а несколько видов, родственных один другому. Так, например, сыво­ротка больного брюшным тифом может агглютинировать не только брюшнотифозных бактерий, но и паратифозных А и В; диагностическая дизентерийная сыворотка агглютинирует несколько видов дизентерийных бактерий. То же явление может встретиться и при определении вида иссле­дуемого микроба путем агглютинации, когда обнаруживается, что он агглютинируется не одной специфической сывороткой, но и другими сыворотками близких типов.

В этих случаях, благодаря наличию идентичных компонентов в слож­ных бактериальных антигенах, в иммунной сыворотке могут оказаться не только антитела к специфическому микробу, но и групповые антитела к родственным видам микробов. Это явление, затрудняющее точную серо­диагностику и идентификацию микроба, может быть устранено методом адсорбции агглютининов, предложенным Кастеллани.

Метод основан на том, что при добавлении к иммунной сыворотке спе­цифического антигена он адсорбирует полностью все антитела — и специ­фические, и групповые, в то время как неспецифический антиген способен связать только побочные (групповые) антитела, оставляя свободными анти­тела к специфическому антигену. Так, в приведенном выше примере после прибавления брюшнотифозных бактерий к сыворотке больного брюшным тифом они адсорбируют все антитела, и в дальнейшем эта сыворотка больше не будет способной к агглютинации. Если же к другой порции этой сыворотки прибавить микробов паратифа, то в наступившей групповой реакции паратифозные бактерии свяжут только групповые антитела, но не специфические, после чего сыворотка окажется вполне способной агглюти­нировать специфических микробов — брюшнотифозные палочки.

Титрование агглютинирующей сыворотки:

Тип реакции: реакция агглютинации.

Исследуемый материал: сыворотка животного, гипериммунизированного бактериальной взвесью.

Диагоностический препарат: взвесь убитых бактерий, применявшихся для гипериммунизации.

Принцип метода: к серийным разведениям агглютинирующей сыворотки добавляют равные количества взвеси убитых бактерий, применявшихся для получения этой сыворотки.

Положительный результат реакции: образование хлопьев, просветление жидкости. Отрицательный результат: равномерная муть. Применение: для определения титра агглютинирующей сыворотки.

Титр агглютинирующей сыворотки -наибольшее разведение сыворотки, в которой еще наблюдается агглютинация. В данном случае титр агглютинирующей сыворотки равен

Серотипирование – изучение антигенного состава микроорганизмов