Neisseria gonorhoeae

Диагноз гонореи может быть легко поставлен с помощью мето­дов культивирования возбудителя. В этих случаях следует брать материал из уретры, шейки матки и прямой кишки. Другие методы выявления возбудителя дают менее удовлетворительные результа­ты, а исследование крови совершенно не эффективно. Методы культивирования обладают высокой чувствительностью, но при этом требуется, чтобы забранный материал был направлен в лабо­раторию в соответствующих транспортных средах. Необходимо от­метить, что ни в одной транспортной среде гонококки полностью не сохраняются на протяжении более 24 часов. Культуральная иден­тификация возбудителя включает оксидазную реакцию и реакцию расщепления декстрозы. Преимуществом культурального метода обнаружения гонококка является возможность одновременно проводить определение антибиотикоустойчивости, поскольку в на­стоящее время у больных циркулируют штаммы, устойчивые к пенициллину и другим антибиотикам. Обнаружение гонококка по­средством выявления антигена с помощью ИФА или РИФ менее эффективно, чем культуральный метод. Окраска препаратов мети-леновым синим и по Граму имеет только указательный характер и не может использоваться для постановки диагноза. В последнее время для обнаружения Neisseria gonorrhoeae используют молеку-лярно-биологические методы — ПЦР и ЛЦР.

Корь

Клинические симптомы кори делают в большинстве случаев не­нужной лабораторную диагностику. Антитела, выявляемые при ИФА, увеличиваются по мере нарастания сыпи и достигают пика к десятому дню (около четырех недель после вакцинации).

IgM и IgG появляются одновременно, но IgM исчезает к 90-му дню от начала заболевания, a IgG снижаются к шестому ме­сяцу и остаются на стабильном уровне.

—------------------------------------ Глава 3 -------------------------------------------------

Парвовирус В19

Не существует традиционных методов исследования клеточных культур для парвовируса В19. Однако разработаны специальные методики, основанные на использовании первичных культур кле­ток-предшественников кроветворного ряда из костного мозга чело­века или печени плода. Однако эти методы применяются только при научных исследованиях. На практике используется метод ДНК-гибридизации, основанный на выделении нуклеиновых кис­лот. Для подтверждения тестов на вирус В19 могут применяться некоторые другие тесты. Надежным средством для обнаружения вируса является электронная микроскопия, поскольку при данной инфекции часто отмечается В19-виремия и достаточное количество частиц вируса может быть визуально определено при негативной окраске. Данный метод может быть использован для исследования тканей.

Для обнаружения антигена В19 используют ряд методов — в час­тности, реакцию встречного иммуноэлектрофореза и радиоимму-ноанализа. Реакция вируса В19 в тестах по определению антигена может быть снижена или блокирована за счет одновременного при­сутствия специфических антител в пробах сыворотки или тканей.

Наиболее широко используемыми тестами на IgM и IgG к В19 в настоящее время являются разные варианты радиоиммуноанали-за. Количественное определение IgM-антител к В19 необходимо для диагностики недавно развившейся инфекции. Количественные по­казатели IgG к В19 определяют в целях получения доказательства ранее перенесенной инфекции и наличия иммунитета.

Наиболее информативным диагностическим тестом является выявление IgM-антител к В19. Диагноз В19-инфекции при бере­менности должен основываться на обнаружении у матери IgM-антител к В19. Беременных женщин, которые имели контакт с больными, следует тестировать на IgM и IgG-антител к В19. Для вы­явления инфицированных эмбрионов применяются такие методы, как определение уровней сывороточного альфа-протеина, ультра­звуковая диагностика и исследование крови плода на IgM-анти-тела к В19. При выкидышах или гибели плода в результате материнской инфекции необходимо проводить исследование пла­центы и тканей плода на наличие В19.

Можно исследовать с помощью прямых тестов на обнаружение вируса В19 пуповинную кровь, глоточные мазки и другие пробы, взятые у новорожденного. Но очень часто имеют место отрицатель-

--------------------------------------- Глава 3 -------------------------------------------

ные результаты. В этих случаях проводят исследование ребенка в возрасте 1 год. К этому времени титры антител, пассивно передан­ных плоду от матери, падают до невыявляемого уровня и при нали­чии инфекции определяются собственные антитела.

Краснуха

Весьма важно, чтобы беременные женщины с заболеваниями, похожими на краснуху или контактировавшие с такими больны­ми, были обследованы как можно быстрее. Материалом для иссле­дования является сыворотка крови.

Существует ряд методик выявления антител против вируса краснухи, которые позволяют проводить количественную оценку уровней антител и тем самым использовать ее для диагностики ин­фекции при нарастании титров антител. К методикам, чаще всего применяющимся для скрининга антител при краснухе, относятся радиальный гемолиз (РГ), иммуноферментный анализ (ИФА) и ла­текс-агглютинация (ЛА). Для выявления нарастания титров анти­тел часто применяют реакцию торможения гемагглютинации (РТГА) и ИФА.

Серологическая диагностика краснухи может быть проведена путем обнаружения значительного подъема титров антител IgG (более чем в 4 раза) или выявления специфических IgM-антител к вирусу краснухи.

Существенный подъем титров антител может быть выявлен в те­чение первых 4-7 дней после появления симптомов, хотя иногда серологический ответ может задержаться до 10 дней. При обследо­вании беременной женщины важно подтвердить полученные результаты с помощью альтернативного метода (например, опреде­ление специфических IgM-антител или путем исследования второй пробы сыворотки).

Специфические IgM-антитела обычно обнаруживаются в тече­ние 6-8 недель после контакта, в отдельных случаях они могут быть выявлены к четвертой неделе после начала болезни.

Пренатальная диагностика имеет значение для решения вопро­са о том, произошло ли инфицирование плода. Теоретически име­ются три возможных метода постановки пренатального диагноза врожденной инфекции:

1. Обнаружение вируса, вирусных антигенов или нуклеиновой кислоты в биоптатах хориона.

---------------------- —------------- Глава 3 -------------------------------------------

2. Обнаружение вируса, вирусных антигенов или нуклеиновой кислоты в амниотической жидкости.

3. Обнаружение специфических IgM-антител в крови плода, по­лученной при кордоцентезе.

Диагноз врожденной краснухи обычно ставят путем исследова­ния пуповинной крови, а также сыворотки новорожденного или младенца на наличие специфических IgM-антител. Отсутствие спе­цифических IgM-антител в неонатальный период, по существу, ис­ключает диагноз врожденной краснухи.

Диагноз можно поставить на основании выделения вируса крас­нухи из глоточных мазков или мочи. При этом вирус обнаружива­ется у большинства новорожденных с врожденной инфекцией. Обнаружение специфических IgG-антител в период от 1 года до 2-х лет жизни ребенка указывает на вероятность врожденной ин­фекции, так как инфицирование детей краснухой в этом возрасте происходит довольно редко.