Типовые приемы и особенности культивирования

Клеток животных - I

История применения культур клеток животных

Этапы истории

1.в первом десятилетии ХХ века впервые выделили клетки из тканей организма высших животных и создали условия для их роста и воспроизводства в искусственных условиях (in vitro);

2.стало возможным выращивание и репродукция в таких клетках вирусов;

3.показана возможность получения в клетках животных больших количеств вирусного материала для применения в вакцинных препаратах;

4.стало возможным вставить в клетки специфические экзогенно полученные гены и получить их экспрессию; подтверждена возможность выращивания из одиночной клетки целой популяции.

К настоящему времени разработаны методы культивирования клеток и тканей животных на искусственных жидких и твердых средах в пробирках, чашках Петри, флаконах. Культура клеток позволяет решать фундаментальные научные проблемы генетики, физиологии, биохимии. Для культивирования используют клетки опухолевых тканей, различных органов, лимфоциты, фибробласты, эмбрионы и т.п.

Применение культуры клеток животных для практических целей началось впервые с работ, в которых была показана возможность выращивания вирусов в культивируемых клетках. Для этого в 1949 г. были использованы клетки почек взрослых обезьян, клетки куриного эмбриона.

Основные характеристики клеток животных

Рост – представляет собой увеличение биомассы. Достигается за счет увеличения средней массы клетки (гипертрофия) или числа клеток (гиперплазия). Масса клетки удерживается в строго определенных пределах регуляторными факторами, поэтому в практической технологии термин «рост» подразумевает пролиферацию, то есть увеличение числа клеток.

Выделяют следующие регуляторные агенты: наследственные – осуществляют внутриклеточную регуляцию при решении вопроса о том, будет или нет происходить митоз (например, масса и структура клетки); межклеточные – действуют внутри популяции (например, величина пространства, питательные факторы); межпопуляционные – осуществляют регуляцию между популяциями (например, гормоны, стимуляторы роста и ингибиторы).

Специализация клеток –благодаря этому свойству, формируются индивидуальные ткани с конкретными функциями.

Трансформация –изменение ростовых свойств культивируемых клеток. Это необратимый процесс. При этом клетки пролиферируют в условиях, неблагоприятных для нетрансформированных клеток.