Зворотна транскриптаза. Ферментативний синтез генів.

Великі за розмірами гени одержують методом ферментативного синтезу. Суть його полягає в тому, що з клітин виділяють певний тип іРНК, яка є комплементарною копією гена. На цих копіях за допомогою фермента — зворотної транскриптази — синтезують відповідний ген. Цей фермент здійснює синтез ДНК у напрямі 5' → 3', який приєднує по одному нуклеотиду шляхом комплементарного спарювання основ з іРНК-матрицею. Продукт реакції становить собою гібридну молекулу, яка складається з РНК-матриці, що з'єднана з комплементарним ланцюгом ДНК. Одержаний комплекс (РНК — ДНК) руйнують обробленням лугом (на ДНК луг не впливає). Внаслідок цього утворюється одноланцюгова ДНК, комплементарна іРНК (її позначають кДНК). За допомогою ДНК-полімерази пере­творюють одноланцюгову кДНК у дволанцюгову шляхом добудови комплементарного ланцюга. Завдяки зворотній транскриптазі був знайдений шлях для синтезу будь-якого з існуючих генів, незалежно від їх складності. За відкриття цього фермента Д. Балтімор і X. Тьомін були удостоєні в 1975 р. Нобелівської премії.

Шляхом ферментативного синтезу були створені гени глобіну кролика, миші, голуба, качки та людини. Приклади штучно синтезованих генів ссавців, які проявили свою біологічну активність у клітинах кишкової палички, наведені в табл. 1.

Таблиця 1. Приклади генів ссавців, виражених в Е. соlі