Генная терапия.

Быстрому развитию генной терапии, способствовали результаты, полученные в ходе выполнения международного проекта «Геном человека». Ожидается, что в ближайшие годы исследователи определят все функции генов и будут успешно использовать полученные данные в генно-терапевтических работах для лечения и предупреждения наследственных болезней.

Генную терапию на современном этапе можно определить как лечение наследственных заболеванийпутем введения генов в клетки пациентов с целью направленного изменения генных дефектов или придания клеткам новых функций.

Первым моногенным наследственным заболеванием, в отношении которого были применены методы генной терапии, оказался наследственный иммуннодефицит, обусловленный мутацией в гене аденозиндезаминазы (ADA). 14 сентября 1990 года в США четырехлетней девочке Ашанти Де-Сильва, страдающей этим достаточно редким заболеванием (1:100000), были пересажены ее собственные Т-лим-фоциты, предварительно трансформированные вне организма геном ADA при помощи ретровирусного вектора. Лечебный эффект наблюдался в течение нескольких месяцев, после чего процедура была повторена с интервалом 3-5 месяцев. За три года терапии в общей сложности проведены 23 внутривенные трансфузии ADA-трансформи-рованных Т-лимфоцитов без видимых неблагоприятных эффектов. После лечения Ашанти в 25-30% ее Т-лимфацитах уровень фермента аденозиндезаминазы стал нормальным и сейчас она совершенно здорова. Столь же успешным оказалось и лечение второй пациентки с этим заболеванием. В настоящее время генная терапия этого заболевания проводится в Италии, Франции, Великобритании и Японии.

Решающим условием успешной генотерапии является обеспечение эффективной доставкичужеродногогена в клетки-мишени, обеспечение длительного функционирования его в этих клетках и создание условий для полноценной работы гена (его экспрессии).

Для введения терапевтического гена в клетки пациента используют специальные векторы. Проблема доставки гена значительно усложняется в тех случаях, когда необходимо перенести большой ген (векторы имеют ограниченную емкость), особенно в клеточное ядро. Правильное внесение гена обеспечивает его функционирование в течение всей жизни человека и полное излечение пациента от соответствующего заболевания.

В качестве клеток-мишеней чаще всего используются лимфоциты, клетки костного мозга, солидных опухолей, печени, легких, сердца, скелетных мышц и др.

Прямая инъекция генетического материала – самый простой метод доставки трансгена в клетки in vivo, при котором ДНК вводится непосредственно в ткань путем инъекции. Область использования данного метода ограничена такими тканями, как кожа, тимус и поперечно-полосатые мышцы, некоторыми так называемыми солидными опухолями.

Американскими исследователями успешно осуществлено введение векторной конструкции, несущей ген фактора свертываемости крови больным гемофилией А. Результаты клинических исследований свидетельствуют, что такое «генное» лечение предупреждает возникновение кровотечений и пациенты с гемофилией А более года не испытывают необходимости в инъекциях фактора. Сейчас на проведение курсов заместительной терапии для одного больного гемофилией А затрачивается 100000 $ в год. Считается, что новый метод позволит пациентам обходиться без дорогостоящих инъекций 5-10 лет.

Введение генетического материала внутрь кровеносных сосудов, питающих трансфецируемый орган, применяется в первую очередь для лечения болезней печени, почек и мочевыводящих путей. Аэрозольное введение генетического материала в дыхательные пути используется при заболевании легких.

Разрабатывают также методы коррекции дефектных генов (при мутациях, изменяющих небольшой участок ДНК), замены дефектного гена нормальным, методы усиления экспрессии нормального гена, восстановления экспрессии блокированного гена или методы блокады экспрессии болезнетворного гена.

С точки зрения генной терапии самыми простыми заболеваниями являются моногенные, которые требуют работы с одним геном. Например, серповидноклеточная анемия, гемофилия, мышечная дистрофия Дюшена. Имеются данные о разработке экспериментальных подходов и проведения клинических испытаний методов генной терапии почти 30 моногенных заболеваний человека.

Более сложными являются исследования в направлении ряда приобретенных заболеваний, развитие которых обусловлено комплексным взаимодействием генов с факторами окружающей среды— диабета, остеопороза, ревматоидного артрита, рака. Результаты первых клинических испытаний этих подходов оказались в высшей степени обнадеживающими, в особенности при лечении нейродегенеративных и онкологических заболеваний нервной системы.

В настоящее время наибольшее распространение получила генная терапия опухолевых заболеваний,по-видимому, из-за огромного множества раковых заболеваний в мире. С другой стороны в отношении тяжелых, часто безнадежных раковых больных утрачивает своё значение отдаленный риск генетических повреждений.

Таким образом, генетическая революция, апофеозом которой явилась генотерапия, не только предлагает пути лечения тяжелых наследственных и ненаследственных недугов, но и в своем стремительном развитии ставит перед обществом новые проблемы, решение которых настоятельно необходимо уже в ближайшем будущем.