Определение креатинина в моче
Принцип метода. Креатинин при взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде образует окрашенные соединения, интенсивность окраски которых пропорциональна концентрации креатинина в моче.
Ход работы. В одну мерную колбу отмеривают 0,5 мл мочи, в другую – 0,5 мл дистиллированной воды (контрольная проба). В обе колбы добавляют по 3 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты, смесь перемешивают, добавляют по 0,2 мл 10% раствора NaOH и доводят объем до 100 мл дистиллированной водой. Перемешивают содержимое колб, выдерживают в течение 10 минут при комнатной температуре и измеряют на ФЭКе оптическую плотность против контроля в кюветах с толщиной слоя 1 см с зеленым светофильтром (длина волны 540 нм).
Зная оптическую плотность опытного раствора, по калибровочному графику определяют содержание креатинина в пробе, взятой для анализа, и рассчитывают количество креатинина, выделенного с мочой за сутки, по формуле:
А ´ Vсут
К = ,
V
где А – содержание креатинина в пробе с мочой, найденное по калибровочному графику, ммоль; V – объем мочи, взятой для анализа, мл; Vсут – суточный объем мочи, мл.
Данные для построения калибровочного графика
Оптическая плотность, Е | Концентрация креатинина в моче, ммоль. |
0,10 0,18 0,28 0,38 |
Клинико-диагностическое значение. Креатинин является постоянной составной частью мочи. За сутки в норме выделяется 8,8-17,6 ммоль или 1-2 г. Повышенное содержание креатинина в моче наблюдается при острых инфекциях, лихорадочных состояниях, у больных сахарным и несахарным диабетом.
Тема 5.4. ОБМЕН ФЕНИЛАЛАНИНА, ТИРОЗИНА,
АСПАРАГИНОВОЙ, ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТ,
Дата добавления: 2015-08-04; просмотров: 835;