Групповое разделение белков

1. Высаливание - разделение белков на фрак­ции по их растворимости. Принцип метода заключается в дегидратации белков (обычно с помощью сернокислого аммония) при рН близком к ИЭТ. Различные белки выпадают в осадок при разных концентрациях соли. Это грубый метод разделения на группы. Например, глобулины выпадают в осадок при полунасыщении, а альбумины при полном насыщении (NH₄)₂SO₄.

2. Избирательная денатурация - многие белки денатурируют и выпадают в осадок при нагревании раствора до 50°C или при подкислении среды до рН 5,0. Если выделяемый белок устойчив к нагреванию и изменению рН, то часть ненужных белков можно удалить таким простым способом.

3. Органические растворители при низких температурах используются для щадящего группового разделения белков. По методу Кона фракционируют белки плазмы крови спиртом при - 3-5 °С: альбумины - спирт 40%, рН 4.8, 1-5 °С; b, g-глобулины - спирт 25%, рН 6.9, 1-5 °С;a-глобулины - спирт 18%, рН 5.2, 1-5 °С; фибриноген - спирт 8%, рН 7.2, 1-3 °С; a₂-глобулин - спирт 40%, рН 5.8, 1-5 °С. 4) Диализ - освобождение белковых растворов от низкомолекулярных соединений (например, от сернокислого аммония (NH₄)₂SO₄). Принцип: белки не проходят через полупроницаемую мембрану, а низкомолекулярные вещества проходят, что и позволяет очистить раствор белков от низкомолекулярных примесей. Получаем группу (смесь) белков, обладающих близкими физико-химическими свойствами.