Морфология, ультраструктура грибов.

Myces (грибы) относятся к эукариотам. Существует огромное кол-во, но лишь некоторые вызывают заболевания чка и животных. Основной стрк элемент – гифы – это ниитевидные структуры, переплетающиеся м/у собой, образуя мицеллы. При выращивании на пит средах образуют ВОЗДУШНЫЕ (на поверхности) и СУБСТРАТНЫЕ (в среде) мицеллы.

Размножаются бесполым путём (спорами), а высшие ещё и половым (при слиянии 2 спор образуется зигота). По способности к спорообразованию делятся на 2 группы: ВЫСШИЕ и НИЗШИЕ. У низших грибов несептированный МИЦЕЛИЙ (относятся к 1# Ò), у высших хотя и есть перегородки (септы) (Þ мн##), но может происходить обмен цитоплазматическим материалом через отверстия в перегородках. У низших СПОРЫ образуются в спец о-нах на коне одного из гиф – в спорангиях, т.к. они заключены внутри Þ ЭНДОспоры. При разрыве спорангия споры распыляются во внеш среде и в благоприятных условиях прорастают. У высших грибов споры расположены снаружи и непосредственно соприкасаются с окр средой (ЭКЗОспоры). Спорообразующие о-ны т/х грибов называются конидиями. Разновидности спор:

1) АРТРОСПОРЫ – гиф мицелия нач дробиться и каждый фрагмент даёт начало новому мицелию.

2) ХЛАМИДИОСПОРЫ – в местах сочленения мицелия начинают образовываться выпуклости или же одна из нитей утолщается, превращаясь в боб.

3) БЛАСТОСПОРЫ – в основном формируются у дрожжей, когда от материнской # отпочковывается дочерняя, от неё ещё одна и т.д.

4) АСКОСПОРЫ – относятся к половым спорам.

По морфологическим особенностям грибы делятся на 7 КЛАССОВ, патогенные представители встречаются в 4:

1) Oomycetes

2) Ascomycetes (сумчатые)

3) Basidiomycetes

4) Deuteromycetes (Несовершенные грибы – включает наибольшее кол-во патогенных грибов)

Вызывают ЗАБОЛЕВАНИЯ: ПОВЕРХНОСТНЫЕ МИКОЗЫ – поражают волосы, ногти, кожу; ЭПИДЕРМОФИТИИ – вызывает эпидермофитон, поражаются складки кожи м/у пальцами; ПОДКОЖНЫЕ МИКОЗЫ – подкожная клетчатка и мышцы; СИСТЕМНЫЕ МИКОЗЫ – внутренние органы, оч большой % летальных исходов. Чаще всего поражаются иммунодефицитные больныеÞ относится к СПИД–индикаторным. Очень часто на фоне ВИЧ-инфекции происходит активация грибка Crypyococcus (заб-е криптококкоз), рода Candida (кандидоз).

Химический состав Грам «+» и Грам «–» бактерий. Механизмы окраски по Граму.

Клеточная стенка. Это внешняя структура бактерий толщиной 10– 35 нм, отделенная от цитоплазматической мембраны очень узким ободком периплазматического пространства. Она несет в основном формообразующую и защитную функции.

Главным компонентом клеточной стенки бактерий является особый, только им присущий гетерополимер, который называется пептидогликаном. Это вещество состоит из параллельно чередующихся полисахаридных (гликановых) цепей, поперечно скрепленных пептидными связями. Пептидогликан придает клеточной стенке бактерий большую прочность и защищает их от действия осмотического давления, которое может дос­тигать внутри клетки 20–25 атм.

При действии лизоцима, пенициллина и некоторых других веществ, разрушающих пептидогликан или нарушающих его синтез, бактерии вна­чале превращаются в сферопласты, а далее, полностью утратив клеточную стенку, – в бесформенные протопласты, быстро подвергающиеся плаз­молизу. Дефектные по клеточной стенке бактерии, которые образуются в организме, обладают жизнеспособностью и патогенностью, называют L–формами в честь института Листера, где они были открыты.

Количественное содержание пептидогликана определяет характер ок­раски бактерий и других прокариот по Граму. Те из них, которые содержат в клеточной стенке большое его количество (около 90 % пептидогликана), окрашиваются по Граму в сине–фиолетовый цвет и их называют грамположительными, все другие, содержащие в оболочке 5–20 % пептидо­гликана, – в розовый цвет и их называют грамотрицательными. Толщина слоя пептидогликана в клеточной стенке грамположительных бактерий в несколько раз больше, чем у грамотрицательных.

Помимо пептидогликана, в клеточной стенке грамположительных бак­терий содержатся тейхоевые кислоты, полисахариды и белки. Грамотрицательные бактерии покрыты наружной мембраной, в состав которой входят липополисахариды и базальные белки.

Для окраски по Граму необходимо подготовить: 1) феноловый раствор генцианового фиолетового (генцианвиолет – 1 г, этанол 96 % – 10 мл, фенол кристаллический – 2 г, вода дистиллированная – 100 мл); 2) ра­створ Люголя – концентрированный раствор калия иодида (2 г), в котором растворяют кристаллический йод (1 г), а затем прибавляют дистиллированную воду (300 мл); 3) этанол 96 %; 4) водный фуксин Пфейффера.

Техника окраски по Граму. 1. Фиксированный мазок 1–2 мин ок­рашивают раствором генцианвиолета (по методу Синева его покрывают пропитанной тем же красителем полоской фильтровальной бумаги, ко­торую смачивают 2–3 каплями воды). 2. Слив генцианвиолет (сняв полоску бумаги Синева), мазок 1 мин обрабатывают раствором Люголя и, не промывая водой, сливают его. 3. Обесцвечивают спиртом в течение 0,5 мин, промывают водой. 4. Окрашивают 1–2 мин фуксином Пфейф­фера. 5. Мазок ополаскивают водой и высушивают.

Для выявления грамположительных кислото– и спиртоустойчивых микобактерий туберкулеза и лепры, которые из–за большого количества в клеточных оболочках жировосковых веществ, миколовой кислоты и дру­гих оксикислот непроницаемы для разведенных растворов красителей, используют окраску по методу Циля – Нельсена. Окрашивание их по этому способу достигается при помощи концентрированного фенолового фуксина Циля с подогреванием над пламенем горелки до закипания и отхождения паров. Окрашенные с применением термокислотной обра­ботки микобактерии не обесцвечиваются слабыми растворами минераль­ных кислот и этилового спирта.

Техника окраски. 1. Фиксированный мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, на которую наносят фуксин Циля, и несколько раз подогревают над пламенем горелки до появления паров, подливая краситель, далее бумагу снимают и промывают водой. 2. Препарат об­рабатывают (обесцвечивают) 5 % раствором серной кислоты и промывают водой. 3. На мазок наливают водно–спиртовой раствор метиленового синего, спустя 3–5 мин промывают водой и высушивают. Кислотоус­тойчивые бактерии окрашиваются в интенсивно красный цвет, остальные виды микробов, обесцвечивающиеся в процессе обработки препарата кис­лотой, – в светло–синий.