Схема определения групп изосерологической системы АВО в жидкой крови
Исследуемые эритроциты стандартные сыворотки | Исследуемая сыворотка + стандартные эритроциты групп | Группы крови | ||
в | а | А | В | |
- | - | + | + | 0а в (I) |
- | + | - | + | ав (II) |
+ | - | + | - | Ва (III) |
+ | + | - | - | АВ0 (IV) |
Затем исследуют образцы крови, высушенные на марле, и контрольную марлю. Детальное изучение образцов крови потерпевших и подозреваемых необходимо для выяснения их особенностей, правильного выбора в каждом конкретном случае стандартных реагентов, методики и техники исследования, что обеспечивает успех экспертизы.
Далее определяют группы в следах крови на вещественных доказательствах, исследуя при этом контрольные участки предмета-носителя, взятые из мест, расположенных рядом со следами крови. Последнее делают для предотвращения ошибочных выводов, так как материалы вещественных доказательств, особенно загрязненные, могут неблагоприятно действовать на стандартные реагенты и имитировать наличие в крови того или иного группового фактора.
Основным методом обнаружения агглютиногенов в высохшей крови является метод абсорбции. Принцип его заключается в связывании агглютинина одноименным агглютиногеном. Делают три одинаковые навески материала из пятна крови и три таких же навески из соответствующего контрольного участка предмета-носителя. К одной из них добавляют сыворотку р или анти-В, к другой — сыворотку а или анти-А, к третьей — сыворотку анти-О(Н) или растительный экстракт анти-Н. Ингредиенты оставляют на 18 — 24 часа в рефрижераторе при температуре от + 4° до + 8°. Затем сыворотки (экстракт), находившиеся в контакте с исследуемыми объектами, т. е. абсорбированные, отделяют от материала и титруют стандартными эритроцитами: сыворотки |3 и анти-В эритроцитами группы В, сыворотки а и анти-А эритроцитами группы А, сыворотку анти-О(Н) и экстракт анти-Н эритроцитами группы 0.
Если в пятне крови содержится агглютиноген А, то он свяжет агглютинин а (анти-А) и абсорбированная сыворотка а (анти-А) либо вовсе перестанет агглютинировать стандартные эритроциты группы А, либо титр ее окажется значительно сниженным, а сыворотка |з (анти-В) останется неизмененной, т. е. будет продолжать агглютинировать стандартные эритроциты группы В так же или почти так же, как и ранее. Когда в крови наряду с основным агглютиногеном А присутствует агглютиноген Н, абсорбированная сыворотка анти-О(Н) или абсорбированный экстракт анти-Н тоже в той или иной мере утратят способность агглютинировать эритроциты группы бит. д. (таблица 2).
Неблагоприятные воздействия контрольных участков материала вещественного доказательства на реагенты (сыворотки и экстракты) в процессе реакции абсорбции эффективно преодолевают методом «нагрузки» агглютининами и лектинами, т. е. повторной реакцией абсорбции с навесками объектов, уже подвергнутых первому исследованию.
Дата добавления: 2015-02-03; просмотров: 955;