ВЫДЕЛЕНИЕ САПОНИНОВ ИЗ ЛРС

Выделение сапонинов из ЛРС (схема 6) включает следующие стадии:

1. Разрушение комплекса сапонинов со стеринами, белками, фенольными соединениями.

2. Получение суммы сапонинов.

3. Очистка от балластных веществ.

4. Разделение суммы на индивидуальные соединения.

1. Разрушение комплекса сапонинов со стеринами и другими соединениями достигается предварительным обезжириванием сырья органическим растворителем (петролейным эфиром, четыреххлористым углеродом и др.).

2. Выделяют сапонины путем экстракции сырья спирто-водными смесями (70% - 80%), метиловым, этиловым или изопропиловым спиртами или водой.

3. Упаривание полученной суммы сапонинов до водного остатка.

4. Очистка от липофильных веществ - путем многократной обработки четыреххлористым углеродом.

5. Водный остаток последовательно экстрагируют хлороформом (фракция малополярных гликозидов), затем - бутанолом (фракция гликозидов средней полярности). Оставшийся водный остаток состоит из сильно полярных сапонинов, олигосахаров и минеральных солей.

6. Полученные фракции разделяют на индивидуальные вещества с помощью колоночной хроматографии на оксиде алюминия, силикагеле, активированном угле; гельфильтрацией на сефадексе, ионообменной хроматографией. Провести разделение суммы сапонинов на отдельные компоненты удается только в результате многократного хроматографирования.

Очистку и разделение сапонинов осуществляют различными методами:

1) из спиртовых растворов:

· образование холестеринового комплекса. Осадок отделяют и разрушают кипячением с бензолом, толуолом или пиридином (холестерин переходит в раствор, а сапонины остаются в осадке);

· осаждение суммы сапонинов большим количеством растворителя (эфир, ацетон, этилацетат, хлороформ), в осадок выпадают малополярные сапонины с небольшим числом моносахаридов в углеводной части;

2) из водных растворов:

· осаждение сапонинов гидроксидом бария или магния. Осадки солей отделяют, и полученные комплексы с сапонинами разрушают пропусканием через раствор углекислого газа или подкислением серной кислотой (сапонины переходят в раствор);

· осаждение сапонинов водным раствором таннина с последующим разрушением полученного комплекса кипячением с оксидом цинка (сапонины переходят в раствор, таннины остаются в осадке в виде комплексов с цинком);

· образование комплекса сапонинов с белками. Отделение осадка, разрушение полученного комплекса кипячением с этанолом (сапонины переходят в раствор, белок остается в осадке).