Определение. Биологические методы. Вначале для .определения АКТГ применя­ли методы, предполагающие регистрацию изменений уровня кор­тикостерона в надпочечниках

Биологические методы. Вначале для .определения АКТГ применя­ли методы, предполагающие регистрацию изменений уровня кор­тикостерона в надпочечниках, плазме венозной крови, оттекающей от надпочечников, или плазме периферической крови у гипофиз­эктомированных крыс или животных с нейрофармакологической блокадой гипофиза. Чувствительность определений удалось повы­сить путем разработки методов in vitro, в которых вначале приме­нялась инкубация V4 части надпочечников крыс, а позднее — изо­лированных адренокортикальных клеток в свежей культуре. Хотя последняя система в силу трудности получения все еще применя­ется главным образом в научно-исследовательских целях, но она достаточно чувствительна для определения тех уровней АКТГ, которые присутствуют в плазме здорового человека [16].

Поскольку в обычных условиях уровень кортизола в плазме прямо связан с уровнем АКТГ, определение кортизола служит очень удобным способом биологического тестирования АКТГ при нормальной функции коры надпочечников. С практической точки зрения, определение уровня кортизола в плазме, будь то флуорометрическим, белковосвязывающим или радиоиммунологическим методом, оказывается менее дорогим и, как правило, более легко доступным способом оценки АКТГ-функции гипофиза.

Радиоимммунологпческпе методы. Метод радиоиммунологиче­ского определения АКТГ в плазме разрабатывался дольше, чем соответствующие методы для других гормонов передней доли ги­пофиза. Это было связано с некоторыми техническими трудностя­ми, обусловленными низкой концентрацией АКТГ в плазме, отно­сительно слабой антигенностью этого гормона и его подвержен­ностью разрушению присутствующими в плазме пептидазами [17]. Кроме того, существование семейства пептидов, обладающих частичной структурной гомологией (т. е. гептапептидом), без тща­тельной характеристики антисыворотки и доказательства ее реак­ции с уникальными структурными детерминантами АКТГ остав­ляло открытым вопрос о специфичности метода его определения. Несмотря на все эти трудности, радиоиммунологическое опреде­ление АКТГ становится все более надежным и приносит все большую пользу в диагностике и контроле за лечением отдельных на­рушений секреции этого гормона.

Прочие методы. Разработан радиолигандный, или радиорецеп­торный, метод определения АКТГ, в котором используются ча­стично очищенные мембраны клеток коры надпочечников и чув­ствительность которого почти равна чувствительности радиоиммунологического метода [18]. Технические трудности этого метода препятствуют его применению для рутинных определений уровней АКТГ в плазме. Описан также изящный цитохимический метод определения АКТГ [19], основанный на регистрации денситометрических сдвигов, ферментативно сопряженных с вызываемым АКТГ снижением содержания аскорбата в срезах надпочечников морских свинок. Этот метод намного чувствительнее других, и с его помощью удается определять гормон в концентрации 5 фг/мл (5•10~¹⁵ г/мл), причем он обладает и прекрасной специфичностью. Однако сложность этого метода ограничивает его применение рам­ками научно-исследовательских задач.