ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эти методы представляют собой варианты описанных биологиче­ских исследований in vitro. Они обычно обладают большей чув­ствительностью, чем радиоиммунологические методы, но значи­тельно более громоздки и дороги при расчете на одно определение. Результаты цитохимических биологических исследований количе­ственно оценивают на гистологических срезах с помощью специ­ального устройства — микроденситометра. Гистологические срезы готовят из специфических для данного гормона тканей или клеток-мишеней, до того подвергшихся воздействию разных концентра­ций стандартного и испытуемого гормона. С помощью денситомет­ра сканируют область диаметром 250—300 нм для количественной оценки цветной реакции, обусловленной изменением редокс-состояния объекта под влиянием гормональной стимуляции. Для коли­чественного анализа используют гистологические красители, чув­ствительные к этим изменениям.

Первая система цитохимического биологического исследования была разработана для АКТГ, и тканью-мишенью в этой системе служила кора надпочечников [8]. Другие способы биологического определения АКТГ либо слишком малочувствительны, либо требу­ют больших объемов плазмы. Таким образом, цитохимическое определение редокс-состояния ткани является ценным средством анализа нормальной и измененной функции системы гипотала­мус—гипофиз—надпочечники по уровню АКТГ. Разработан цито­химический метод определения и Л Г, но при этом встретились су­щественные трудности, связанные со значительными колебаниями результатов разных определений и непостоянной чувствительно­стью объекта, что, возможно, отражает известные биологические расхождения у разных животных [9]. Чувствительные специфиче­ские цитохимические методы предложены для определения парат­гормона, АД Г и тиротропина [10, 11]. При дальнейшем усложнении оборудования, которое позволит увеличить число исследова­ний в одном определении, этот метод может найти более широкое применение. Он особенно привлекателен потому, что не требует использования радиоактивных соединений. Цитохимические мето­ды нешироко применяются в клинике и используются в основном в качестве чувствительного способа в научных исследованиях.

 

Таблица 5—1. Биологические методы определения гормонов in vivo и in vitro

 

Гормон Метод Показатель Ссылка
АКТГ In vivo (гипофизэктомированные крысы) Снижение уровня аскор­биновой кислоты в надпочечниках [12]
АДГ In vivo (голодные кры­сы с водной нагруз­кой) Снижение скорости мочевыделения или уве­личение удельной мас­сы мочи [13-16]
Холецистокинин In vitro (полоски желч­ного пузыря кролика) Сокращение полосок [17]
ФСГ In vivo (неполовозре­лые самки крыс) Увеличение массы яич­ников [18]
СТГ In vivo (гипофизэктомированные крысы) Ширина некальнифицированного эпифизарно­го хряща большебер­цовой кости [19j
ЛГ/ХГЧ In vivo (21-дневные гипофизэктомированные крысы) Увеличение массы вент­ральной части пред­стательной железы [1,2]
ЛГ/ХГЧ In vitro (изолированные клетки Лейдига) Увеличение синтеза и секреции тестостерона в культуральную среду [6]
Паратгор­мон In vitro (корковый слой почек крыс) Образование цАМФ [20]
Пролактин In vitro (эксплантаты молочной железы мы­ши) Активность лактозаминсинтетазы или синтез фосфопротеина [21]
Ренин In vitro (активность ре­нина) Образование ангиотензи­на I из субстрата ре­нина [22]
Соматоме­дин In vitro (тазовые руди­менты 11-дневных ку­риных эмбрионов) Включения 35S-сульфата [24]
ТТГ 1. In vivo (интактные мыши, получившие предварительно 131I и тироксин) 1. Высвобождение 131I из щитовидной железы в кровь [25]
    2. In vitro (цитохимиче­ский, сегменты щито­видной железы мор­ской свинки) 2. Активность лизосом­ной нафтиламидазы [11]

 

 

В табл. 5—1 перечислены различные биологические методы in vivo и in vitro, применяемые для определения полипептидных гормонов. Для многих гормонов специфические чувствительные методы биологического определения не разработаны.

 









Дата добавления: 2015-01-19; просмотров: 472; ЗАКАЗАТЬ НАПИСАНИЕ РАБОТЫ


Поиск по сайту:

При помощи поиска вы сможете найти нужную вам информацию, введите в поисковое поле ключевые слова и изучайте нужную вам информацию.

Поделитесь с друзьями:

Если вам понравился данный ресурс вы можете рассказать о нем друзьям. Сделать это можно через соц. кнопки выше.
helpiks.org - Хелпикс.Орг - 2014-2020 год. Материал сайта представляется для ознакомительного и учебного использования. | Поддержка
Генерация страницы за: 0.013 сек.