ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ СТАНДАРТНЫМИ ГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМИ СЫВОРОТКАМИ.
Стандартные гемагглютинирующие сыворотки (из крови доноров или ретроплацентарной крови) поступают в ампулах по 2 мл. Перед определением следует убедиться в наличии на этикетке ампулы обозначения:
группы сыворотки,
срока годности,
номера серии
наименования учреждения его изготовившего.
Срок годности сыворотки- 4 месяца со дня изготовления. Если в ампулах с сыворотками обнаруживаются хлопья или взвесь, то они для использования не пригодны, несмотря на не истекший срок. Для удобства пользования сыворотка окрашивается в различные цвета.
Сыворотка 1-й группы не окрашивается,
2-й группы - окрашивается в голубой цвет,
3-ей группы в розовый,
4-ой группы в желтый.
Аналогичного цвета полосами маркируются ампулы. Ампулы хранятся в холодильнике при температуре +4о-+6о С. Допускается хранение открытых ампул 3-4 дня в холодильнике при условии, если горлышко заклеивается лейкопластырем или закрывается ваткой.
Определение группы крови проводится при температуре +150 - +250С на маркированной плоскости (тарелке) белого цвета, где записывается фамилия лица, у которого определяется кровь, согласно международной классификации маркируются точки нанесения сыворотки. Используются стандартные сыворотки двух серий групп О(I), А(II), В(III). После их нанесения получается шесть капель, расположенных в два ряда в следующем порядке: О(I), А(II), В(III). Каждая сыворотка наносится своей пипеткой. Исследуемая кровь углами предметного стекла или стеклянными палочками вносится в сыворотку в количестве в десять раз меньшем и тщательно перемешивается. Можно перемешивать кровь с сывороткой одним и тем же углом предметного стекла (или стеклянной палочкой), но в этом случае после каждого перемешивания необходимо промывать стекло в воде и насухо вытирать. За ходом реакции, в общей сложности, наблюдают не менее 5-ти минут, периодически покачивая тарелку. В лунки, где к третьей минуте наблюдения произошла агглютинация, вносят по капле физ.раствора и наблюдают еще две минуты. Добавление физиологического раствора не разрушает истинной агглютинации и позволяет отдифференцировать ее от псевдоагглютинации, обусловленной самопроизвольным склеиванием эритроцитов в монетные столбики. Результат оценивается по наличию агглютинации. Эритроциты группы О(I) не содержат антигенов и в реакцию агглютинации не вступают. Эритроциты группы А(II) не дают агглютинации только с сывороткой своей группы, эритроциты В(III) также не дают агглютинации только с сывороткой своей группы. Если во всех сыворотках произошла агглютинация, то для исключения неспецифической панагглютинации и подтверждения, что это эритроциты IV группы крови, следует дополнительно исследовать их стандартной сывороткой группы АВ (IV). Для этого используется одна сыворотка, исследование проводится с соблюдением всех выше указанных условий. Сыворотка группы АВ(IV) не содержит никаких антител, а поэтому не должна давать агглютинации. (таблица 1). При определении групп крови следует обратить особое внимание на сроки чтения результата - они не должны быть менее 5-ти минут. Так разновидность второй группы крови А(II) дает агглютинации, как правило, раньше чем обычно - к исходу 3-4-ой минуты.
Таблица 1.
| Результат реакции с изогемагглютинирующими сыворотками группы | Исследуемая кровь принадлежит к группе | |||
| 0аb(I) | Аb(II) | Ва(III) | АВ(IV) | |
| - | - | - | - | 0(I) |
| + | - | + | - | А(II) |
| + | + | - | - | B(III) |
| + | + | + | - | AB(IV) |
Оценка результатов определения групп крови при помощи стандартных гемагглютинирующих сывороток.
Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - её отсутствие.
Дата добавления: 2014-12-09; просмотров: 3503;