Метод Труанта для окрашивания на кислотоустойчивость.
| Реактив для флуоресцентной окраски: | |
| Аурамин О, С141000 | 1,5 г |
| Родамин В, С1 749 | 0,75 г |
| Глицерин | 75 мл |
| Фенол (кристаллы, расплавленные при нагревании) | 10 мл |
| Дистиллированная вода | 50 мл |
Оба красителя тщательно перемешивают с 25 мл воды и фенолом. Затем добавляют оставшуюся воду и глицерин и снова перемешивают. Получившийся реактив для флуоресцентной окраски фильтруют через стекловату и хранят при 4°С или при комнатной температуре.
| Растворитель для обесцвечивания: | |
| Этанол 70% (объем/объем) | 99,5 мл |
| Соляная кислота (концентрированная) | 0,5 мл |
| Дополнительный краситель: | |
| Марганцевокислый калий | 0,5 г |
| Дистиллированная вода | 99,5 мл |
Выполнение методики:
1. Погружают фиксированный нагреванием бактериальный мазок на 15 минут в реактив для флуоресцентной окраски при 20—37°С.
2. Промывают мазок под слабой, падающей под углом струей дистиллированной воды, пока сток не станет бесцветным.
3. На 2—3 минуты погружают мазок в обесцвечивающий растворитель, затем промывают дистиллированной водой, как описано выше.
4. Погружают мазок в дополнительный краситель на 2—4 минуты.
5. Отмывают дистиллированной водой, как описано выше, и подсушивают фильтровальной бумагой.
Просматривают образцы в люминесцентный микроскоп с использованием возбуждающего светофильтра типа BG-12 и запирающего светофильтра типа OG-1. Клетки кислотоустойчивых бактерий флуоресцируют желто-оранжевым светом на темном фоне.
Для микроскопической дифференциальной диагностики туберкулезных палочек от спиртоподатливых сапрофитов существует несколько методов.
Дата добавления: 2014-12-06; просмотров: 1092;