Изготовление препаратов для трансмиссионной микроскопии

Для фиксации материала обычно используют осмиевую кислоту. Для заливки обезвоженного препарата используют различные смолы (а не парафин). Для изготовления сверхтонких срезов (толщиной 20...100 нм) используется ультрамикротом с алмазными или стеклянными ножами. Вместо окрашивания органическими красителями используется импрегнация образца солями свинца, урана, осмия. Часто вместо импрегнации производят напыление поверхности образца тяжелыми металлами.

Для изучения мембран используются более сложные методики приготовления препаратов. Например, вначале образец ткани замораживается при температуре менее 100О. Затем образец раскалывается острым ножом. При этом часто трещина проходит параллельно плоскости мембраны. В результате обнажаются ранее скрытые структуры, например, интегральные белки.

Затем создается реплика скола. Вначале в вакууме производится возгонка льда. На поверхность скола наносится слой углерода, а на эту реплику из углерода напыляется тяжелый металл. Биологические структуры растворяются в сильной кислоте. Получившаяся поверхность является точной копий биологической структурой.

Электроны, прошедшие через образец, фокусируются и направляются на флуоресцентный экран, на котором и формируется видимое изображение.