Определение группы крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами (перекрестный способ).

Ставятся параллельно две реакции: со стандартными сыворотками по описанной выше методике и со стандартными (известной групповой принадлежности) эритроцитами. Станции переливания крови выпускают для этой цели «Стандартные эритроциты».

Как уже указывалось выше, определение группы крови по системе АВО в лечебном учреждении проводится в два этапа – сначала врач в лечебном подразделении проводит определение прямым методом, а затем результат проверяется в лаборатории перекрестным способом. На территории Самарской области переливание компонентов крови без лабораторного определения группы крови АВО перекрестной реакцией и резус- фактора запрещена.

Определение группы крови перекрестным методом у новорожденных и недоношенных детей затруднено, так как у них не сформирована система агглютиногенов.

Оснащение:

1. Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп Оαβ(I), Аβ(II), Вα(III) двух серий и сыворотка группы АВо(IV) одной серии.

2. Стандартные эритроциты групп Оαβ(I), Аβ(II), Вα(III).

3. Изотонический раствор хлорида натрия.

4. Белые фарфоровые или любые другие пластинки (тарелки) со смачиваемой поверхностью, разделенные на четыре сектора, обозначенные соответственно группам крови.

5. Пипетки.

6. Стеклянные или пластмассовые палочки с округлыми концами для перемешивания крови.

Техника:

1. Заготавливается сыворотка больного: из вены берется 4-5 мл крови, которая центрифугируется или отстаивается 20-30 минут до образования сгустка и прозрачной сыворотки.

2. На размеченную белую пластинку (см.выше) наносят по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп 0(I), А(II), В(III).

3. На эти капли пипеткой наносится по одной капле (0,1 мл) сыворотки больного.

4. Далее реакция проводится как при прямом способе определения групповой принадлежности см. пункты 4, 5, 6. Реакция с эритроцитами группы АВ(IV) не проводится.

5. Одновременно проводится описанное выше определение группы крови прямым способом. Одной реакции со стандартными эритроцитами не достаточно: по ее результатам нельзя дать заключение о групповой принадлежности.

В результате перекрестной реакции выявляются как агглютиногены, так и агглютинины исследуемой крови, таким образом, получается полная формула группы крови. Перекрестная реакция позволяет избежать ошибок в определении группы крови изогемагглютинирующими сыворотками, связанные с наличием иммунных экстраагглютининов, слабых агглютининов и агглютиногенов, подгрупп.

При совпадении результатов реакции со стандартными сыворотками и стандартными эритроцитами дается заключение о групповой принадлежности высочайшей степени точности.