ОСВОЕНИЕ ПРИНЦИПОВ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА СТЕРИЛИЗАЦИИ И НАВЫКОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБИОТКОЧУСТВИТЕЛЬНОСТИ

Контроль эффективности физического способа стерилизации (кипячение) бактериологическим методом

Исследуемый материал – спорогенная (B. anthracoides) и аспорогенная культуры(E. coli ).

Ход работы:

1) Проверка культур на чистоту:

-приготовление мазка из культуры E. сoli и окраска по Грамму. E. сoli представляет собой грамотрицательные палочки, расположенные по одиночке;

-приготовление мазка из культуры B. аnthracoides и окраска по Ожешке. Bac. аnthracoides представляет собой синие палочки, расположенные в цепочку; центрально расположенные споры красного цвета (по морфологическим и тинкторальным признакам не отличается от B. anthracis).

2) Кипячение культур в водяной бане в течение 30 минут.

3) С целью проверки гибели микробов делаем контрольные посевы: B. аnthracoidesзасеваем на скошенный МПА,Е. сoli – на МПБ.

4) Инкубация посевов в термостате при 37⁰ в течение 18-24час.

5) Макроскопическое изучение посевов: на МПА отмечаем рост в виде матового налёта, желтоватого цвета; МПБ – прозрачен.

6) При микроскопическом исследовании материала с МПА обнаруживаем стрептобациллы и споры.

7) Оформление заключения об эффективности стерилизации.

5.2 Определение антибиотикочусвтвительности бактерий методами «бумажных дисков» и серийных разведений

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом «бумажных дисков»

Биологическая активность антибиотиков выражается в международных единицах (ME). За единицу активности принимается то минимальное количество антибиотика, которое задерживает рост стандартного штамма, определенного вида микроорганизма в строго определенных условиях. Степень чувствительности к антибиотикам необходимо определять для успешного проведения лечения. Наиболее распространен метод «бумажных дисков».

Методика.

1.В чашку Петри с МПА «газоном» засевают взвесь изучаемой культуры микроба, например, S. aureus.

2. На засеянную поверхность агара пинцетом накладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. Диски располагают на равном расстоянии друг от друга и на расстоянии от края чашки 15 мм.

3.Чашки выдерживают в термостате 18-24 часов при температуре 37 °С.

4.Учёт результатов проводят на 2-ой день путем измерения зон задержки роста бактерий вокруг дисков. Так, зоны диаметром до 10мм указывает на отсутствие чувствительности, до 15 – слабую, до 25 – среднюю и более 25 – высокую чувствительность исследуемого микроба к антибиотику (рис.23).

5.Оформление заключения: К каким антибиотикам чувствителен возбудитель? Какой антибиотик можно рекомендовать для лечения и почему?