ТАБЛЕТКИ ЭТИНИЛЭСТРАДИОЛА

Идентификация

1. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 1 мг этинилэстрадиола, взбалтывают с 10 мл этанола и фильтруют.

Фильтрат выпаривают досуха на водяной бане. К сухому остатку прибавляют 1 мл кислоты серной концентрированной; появляется оранжевое окрашивание с зеленой флуоресценцией (в Уф-свете, длина волны 365 нм). При разбавлении раствора 10 мл воды: окраска становится фиолетовой и выпадает фиолетовый осадок.

2. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 2 мг этинилэстрадиола, взбалтывают с 10 мл этанола и фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха на водяной бане до объема 2 мл, прибавляют 1 мл 10% раствора серебра нитрата; образуется белый осадок.

3. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 0,1 мг этинилэстрадиола, растирают с 0,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 5 мл воды, оставляют на 5 минут. Затем фильтруют, фильтрат подкисляют 0,15 мл кислоты серной концентрированной, прибавляют 3 мл эфира, взбалтывают. Эфирный слой отделяют и нагревают на водяной бане с 0,2 мл кислоты уксусной ледяной и 2 мл кислоты фосфорной концентрированной. Появляется розовое окрашивание с интенсивной оранжевой флуоресценцией.

4. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 5 мг этинилэстрадиола, взбалтывают с 3 мл 10% раствора натрия гидроксида и 2 мл воды, оставляют на 5 минут и затем фильтруют. К фильтрату прибавляют 3 мл диазореактива; появляется красное окрашивание.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЭСТРОГЕНОВ МЕТОДОМ ТСХ

(этинилэстрадиол, эстрадиола дипропионат).

Хроматографирование проводят на пластинах "Силуфол UF-254" размером 5 х 10 см. На пластину на линию старта наносят по 0,01 мл 1% спиртовых растворов веществ и их смеси. Хроматографируют в системе растворителей гексан - ацетон 7:3 восходящим способом. После разделения пластину сушат на воздухе, детекцию пятен осуществляют в УФ свете. Рассчитывают значения R_f исследуемых веществ (примерное значение R,- для эстрадиола дипропионата а в данной системе растворителей - 0,85; для этинилэстрадиола-0,59).

ПРОГЕСТЕРОН

Идентификация

1. Ультрафиолетовый спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения, в области от 220 до 300 нм имеет максимум поглощения при 241 ±2 нм.

2. Около 5 мг препарата растворяют в 2 мл кислоты серной концентрированной, осторожно прибавляют 3 мл воды и встряхивают, появляется желтое окрашивание с зеленой флуоресценцией. Раствор охлаждают, прибавляют 3 мл хлороформа и встряхивают, оба слоя бесцветные.

Количественное определение

Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в спирте 95% в мерной колбе вместимостью 100 мл, перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 241 нм в кювете с толщиной стоя 10 мм.

Содержание прогестерона в процентах (X) вычисляют по формуле:

где

D - оптическая плотность испытуемого раствора;

- удельный показатель поглощения прогестерона при 241 нм, равный 535;

а - точная навеска препарата (г);

- разведение;

Препарат должен содержать не менее 97% и на более 103% прогестерона в пересчете на сухое вещество.